亚洲AV无码久久,久草精品首页,97精品资源,九一福利区,三级三级三级日本99

  • <style id="ldh3x"></style>
        歡迎光臨北京索萊寶科技有限公司網(wǎng)站!
        銷售咨詢熱線:
        17801761073
        產(chǎn)品目錄
        您的位置: 網(wǎng)站首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 人甲胎蛋白異質(zhì)體3 ELISA試劑盒說(shuō)明書

        人甲胎蛋白異質(zhì)體3 ELISA試劑盒說(shuō)明書

        發(fā)布日期: 2012-03-01
        瀏覽人氣: 1907

         

        Human甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA檢測(cè)試劑盒
        本試劑僅供研究使用 
        試驗(yàn)原理
               AFP-L3試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA.已知AFP-L3濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將AFP-L3和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物AB,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中AFP-L3的濃度呈比例關(guān)系。
         
        試劑盒內(nèi)容及其配制
        試劑盒成份
        96孔配置
        48孔配置
        96/48人份酶標(biāo)板
        1塊板(96T
        半塊板(48T
        塑料膜板蓋
        1
        半塊
        標(biāo)準(zhǔn)品:50ng/ml    
        1瓶(1.0ml
        1瓶(0.5ml
        空白對(duì)照
        1瓶(1.0ml
        1瓶(0.5ml
        標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液
        1瓶(8.0ml
        1瓶(4.0ml
        生物素標(biāo)記的抗AFP-L3抗體
        1瓶(8.0ml
        1瓶(4.0ml
        親和鏈酶素-HRP
        1瓶(12ml
        1瓶(5ml
        洗滌緩沖液
        1瓶(20ml
        1瓶(10ml
        底物A
        1瓶(6.0ml
        1瓶(3.0ml
        底物B
        1瓶(6.0ml
        1瓶(3.0ml
        終止液
        1瓶(6.0ml
        1瓶(3.0ml
         
        自備材料
        1. 蒸餾水。
        2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
        3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
        4.
         
        樣品收集、處理及保存方法
         
        1、血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原
        和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅
         
        細(xì)胞迅速小心地分離。
        2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
        3、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
        4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
         5、 保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
         
        操作注意事項(xiàng)
         
        ●   試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
        ●   實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
        ●   不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
        ●   使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
        ●   使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
        ●   底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
        ●   加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
        ●   按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
         
         
         
         
        安全性
         
        1.   避免直接接觸終止液和底物AB,一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
        2.   實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
        3.   不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
         
        試劑的準(zhǔn)備
         
        1.   標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
        50
        ng/ml
        (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
        原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
        25
        ng/ml
        (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
        100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
        12.5
        ng/ml
        (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
        100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
        6.25
        ng/ml
        (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
        100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
        3.12
        ng/ml
        (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
        100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
        1.56
        ng/ml
        (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
        100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
        0
        ng/ml
        (空白對(duì)照)
        原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
         
         
        2.   洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
         
        試劑盒性能
         
        1.   靈敏度:小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
        2.   特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
        3.   重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
         
        操作步驟
         
        1.   使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
        2.   根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
        3.   加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
        4.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
        6.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
        7.   每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
        8.   取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
        9.   450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
         
        結(jié) 果 判 斷 與 分 析
         
        1、 儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD
        2、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的AFP-L3標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的AFP-L3含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
        3、 檢測(cè)值范圍: 0-50ng/ml
        4、 敏感度:0.1ng/ml


        分享到:
        华亭县| 人妻黄色| 久久婷婷开心| 无码人妻丰满熟妇| 国产精品黄| 最新AV在线免费观看| 丁香五月在线| 青草一区二区| 91精品国产综合久久久久久漫画| 错那县| 精品欧美一区二区三区| 91国产中文字幕| 波多野结衣青青草| 日韩三级小说| 丁香五月婷婷中文字幕| 爱福利视频导航| 错那县| 久久无码啪啪一区二区| 97人妻天天摸天天爽天天| 伊人久久麻豆| 日本爱爱免费视频| 用力干我视频| 久久久久久久久久久久久久久影院| 欧美一片内射| 莎车县| 欧美精品top| 国产制服丝袜在线| 国产成人精品无码久久久精东影业| 又黄又粗又大熟妇熟女| 综合久久综合久久| 大香蕉欧美视频| 国产传媒激情| 欧美高清操逼| 亚洲欧美另类无码| 青娱乐av| 东京热一区二区| 91人妻成人精品一区二区| 性欧美大战久久久久久久| 辽阳县| 国产精品少妇| 免费黄色动漫|