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        • 漆酶活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        漆酶活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-17
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        漆酶活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Micro Laccase Assay Kit
        別名
        漆酶試劑盒 漆酶試劑盒
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/96S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC1635
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定意義:漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        漆酶活性檢測試劑盒說明書
        微量法
        貨號(hào)BC1635
        規(guī)格100T/96S
        產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體110 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×22-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 工作液的配制:一瓶試劑二用10 mL試劑一溶解?,F(xiàn)用現(xiàn)配。

        產(chǎn)品說明:
        漆酶(CE1.10.3.2)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,漆酶存在菇、菌及植物中,是一種環(huán)保型酶,其催化性質(zhì)在生物檢測中有廣泛的應(yīng)用。
        漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、天平、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水,水浴鍋
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))   
        1、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
        2、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
        3、培養(yǎng)液:直接檢測。
        二、測定步驟

        1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至420nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

        2. 水浴鍋溫度調(diào)至45。

        3. 操作表:在微量玻璃比色皿/96孔板中分別加入下列試劑:

         

        試劑名稱測定管空白管
        樣本(μL30-
        蒸餾水(μL-30
        工作液(μL170170
        在微量玻璃比色皿/96孔板中分別加入上述試劑,充分混勻后于420nm處測定10s時(shí)的吸光值A1,迅速置于45水浴3min,拿出迅速擦干測定190s時(shí)的吸光值A2,計(jì)算ΔA測定管= A2測定-A1測定,ΔA空白管=A2空白-A1空白,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管。(空白管只需做1-2次)


        注意事項(xiàng):
        1、工作液需臨用前配制,并且盡快使用,4℃保存一周,若變色則不能使用。
        2、測定前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請將樣本用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
        3、空白管為檢測各試劑組分質(zhì)量的檢測孔,正常情況下,OD值變化不超過0.05。
        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1g香菇加1mL提取液進(jìn)行樣本處理,取上清后按照測定步驟操作,用微量玻璃比色皿測得計(jì)算ΔA測定管=A2測定-A1測定=0.8963-0.1004=0.7959ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.0729-0.0542=0.0187,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.7959-0.0187=0.7772,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        漆酶酶活(U/g 質(zhì)量)=61.7×ΔA÷W=61.7×0.7772÷0.1=479.53 U/g 質(zhì)量。
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0200/BC0205 過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒
        BC0090/BC0095 過氧化物酶(POD)活性檢測試劑盒
         

        漆酶活性檢測試劑盒 微量法 漆酶活性檢測試劑盒 微量法

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