組織及血液堿性磷酸
酶（AKP/ALP）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC2145
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
1、標(biāo)準(zhǔn)品：10 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液，臨用前蒸餾水稀釋至2.5μmol/mL備用（可以吸取25μL10 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液和75μL蒸餾水混合備用），稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)液2-8℃保存一周。
產(chǎn)品說明：
AKP/ALP（Alkaline Phosphatase）是一種含鋅的糖蛋白酶，在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中，以肝臟為主。
在堿性環(huán)境中，AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚；酚與4-氨基安替*林和鐵*反應(yīng)紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通過測定510nm吸光度增加速率，來計算AKP活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：

1. 試劑一、試劑二和試劑三均需避光保存。

2. 試劑三變藍(lán)綠色后不能再使用。

3. 加入試劑三后必須立即混勻，否則顯色不全。

實驗實例：

1. 取0.1g小鼠胰腺加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算A測定管=0.169、A對照管=0.047、A空白管=0.049、A標(biāo)準(zhǔn)管=0.449，按樣本質(zhì)量計算酶活：

AKP/ALP酶活（U/g質(zhì)量）=0.167×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W=0.167×（0.169-0.047）÷（0.449-0.049）÷0.1=0.509 U/g 質(zhì)量。

1. 取兔血清后按照測定步驟操作，測得計算A測定管=0.147、A對照管=0.047、A空白管=0.049、A標(biāo)準(zhǔn)管=0.449，按血液體積計算酶活：

AKP/ALP酶活（U/mL）=0.167×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) =0.167×（0.147-0.047）÷（0.449-0.049）=0.0418 U/mL。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Yang J, Zhang K, Que K, et al. Surface modification of titanium with hydroxyapatite layer induced by phase-transited lysozyme coating[J]. Materials Science and Engineering: C, 2018, 92: 206-215.

2. Yu Jiang,Dantian Zhu,Wenfeng Liu,et al. Hedgehog pathway inhibition causes primary follicle atresia and decreases female germline stem cell proliferation capacity or stemness. Stem Cell Research & Therapy. July 2019;(IF4.627)

3. Zhongshi Xu,Feng Dai,Ji Chen,et al. Experimental research into the potential therapeutic effect of GYY4137 on Ovariectomy-induced osteoporosis. Cellular & Molecular Biology Letters. October 2018;(IF3.367)

4. Wanxiu Cao,Jing Li,Yaoxian Chin,et al. Transcriptomic analysis reveals effects of fucoxanthin on intestinal glucose transport. Journal of Functional Foods. October 2018;(IF3.197)

相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC2020/BC2025  乙酰膽*酯酶（AchE）活性檢測試劑盒
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