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        • 人骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        人骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-21
        人骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒
        貨號(hào):P5050
        規(guī)格:3×100ml/kit
        保存:室溫避光儲(chǔ)存,有效期少 2 年。

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶貨號(hào)P5050
        規(guī)格200ml/KIT供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途本品用于分離人骨髓單個(gè)核細(xì)胞。應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油

        人骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒
        貨號(hào):P5050
        規(guī)格:3×100ml/kit
        保存:室溫避光儲(chǔ)存,有效期少 2 年。


        試劑盒內(nèi)容:

        全血及組織稀釋液 100ml
        細(xì)胞洗滌液 100ml
        試劑C 100ml
        試劑E 100ml
        試劑F 100ml
        說明書 1 份


        一、  各種動(dòng)物骨髓細(xì)胞的采集方法
            1. 大鼠、小鼠骨髓的采集:用頸椎脫臼法處死動(dòng)物,剝離出胸骨或股骨,用注射器吸取少量的F 液,沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液,以500g(約1800 轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘,棄上清。沉淀以F 液重復(fù)洗滌一次后用含20%胎牛血清的全血及組織稀釋液懸起(細(xì)胞濃度為2×10 8 -1×10 9 個(gè)/ml),備用。
           2. 大動(dòng)物骨髓的采集:
            A.骨髓穿刺點(diǎn)定位
           (1)胸骨:穿刺部位在胸骨中線,胸骨體與胸骨柄連接處,或選胸骨上1/3 部。
           (2)脛骨:穿刺部位在脛骨內(nèi)側(cè),脛骨上端的下方1 厘米處。
           (3)肋骨:穿刺部位在第5~7 肋骨各自的中點(diǎn)上。
           (4)髁骨:穿刺部位在髁前上棘后2~3 厘米的髁嵴。
           (5)股骨:穿刺部位在股骨內(nèi)側(cè)面,靠下端的凹面處。

         

        B.骨髓穿刺方法
           (1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按要求固定,穿刺部位去毛、消毒、麻醉,要求局部麻醉范圍直達(dá)骨膜,也可作全麻。
           (2)操作人員帶消毒手套,確定穿刺點(diǎn),估計(jì)從皮膚到骨髓的距離并依此固定骨髓穿刺針長度。左手拇、食指繃緊穿刺點(diǎn)周圍皮膚,右手持穿刺針在穿刺點(diǎn)垂直進(jìn)針,小弧度左右旋轉(zhuǎn)鉆入,當(dāng)有落空感時(shí)表示針尖已進(jìn)入骨髓腔。用左手固定穿刺針,右手抽出針芯,連接注射器緩慢抽吸骨髓組織,當(dāng)注射器內(nèi)抽到少許骨髓時(shí)立即停止抽吸,收集骨髓細(xì)胞加入4-5ml F 液混勻,以500g(約1800 轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘,棄上清,沉淀以F 液重復(fù)洗滌兩次后用含20%胎牛血清的全血及組織稀釋液懸起(細(xì)胞濃度為2×10 8 -1×10 9 個(gè)/ml),備用。
           (3)左手壓住穿刺點(diǎn)周圍皮膚,迅速拔出穿刺針,用棉球壓迫數(shù)分鐘。如穿刺的是肋骨,除壓迫止血外,還需膠布封貼穿刺點(diǎn),防止發(fā)生氣胸。

         

        3. 人骨髓的采集:
           臨床方法收集骨髓細(xì)胞加入4-5ml F液混勻,以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心20分鐘,棄上清,沉淀以F液重復(fù)洗滌兩次后用含20%胎牛血清的全血及組織稀釋液懸起(細(xì)胞濃度為2×10 8 -1×10 9 個(gè)/ml),備用。


        二、骨髓淋巴細(xì)胞分離方法
            1.取1ml 骨髓細(xì)胞懸液與E液按1:1比例混合再與1份全血及組織稀釋液混勻置20℃-30℃下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,棄去底部紅細(xì)胞備用。
            2. 取渾濁的上清部分液體小心疊加在C 液之液面上(比例為1:1),20℃±2℃,400g(約1500 轉(zhuǎn)/分),離心20 分鐘(半徑15cm 水平轉(zhuǎn)子)。
             此時(shí)離心管中由上下細(xì)胞分四層。*層;為稀釋液層。第二層;為環(huán)狀乳白色含所需單個(gè)核細(xì)胞層。
             第三層;為透明分離液層。第四層;為極少紅細(xì)胞層。收集第二層細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液4-5 毫升的試管中,充分混勻后,以500g(約1800 轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗滌2 次即得所需單個(gè)核細(xì)胞。
            注: 提取率約為80%。
            分離圖例:


        三、  注意事項(xiàng)
             A. 本分離液是敏光型的,在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)在18℃-25℃避光保存,啟封后置4℃保存避免微生物污染。另外,本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
            B. 待分離的骨髓要求新鮮,避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在20℃水浴箱中復(fù)溫20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時(shí)分離效果好,且所有操作過程一定要在無菌條件下進(jìn)行。
            C. 由于各品牌離心機(jī)的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時(shí)間,摸索的分離條件(具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定)。
            D. 好使用無靜電反應(yīng)的離心管,推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。


        四、產(chǎn)品性能指標(biāo)

        pH 7.0-7.5
        滲透壓 280-340mOsmol/kg
        內(nèi)毒素 ≤0.5EU/ml
        無菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
        澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
        含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下


        五、貯藏及保存期限
            18℃-25℃避光保存,有效期兩年。啟封后置4℃保存,有效期一周。
            注:若保證無微生物污染,啟封后可置4℃長期保存。但應(yīng)注意保存溫度較低時(shí)本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

         

        人骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒訂購說明:

        1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
        2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
        3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
        4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
        5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

         

        參考文獻(xiàn):
        《Increased MCL-1 expression predicts poor prognosis and disease recurrence in acute myeloid leukemia》 作者:Xi-xi Li, Jing-dong Zhou, Xiang-mei Wen, Ting-juan Zhang, De-hong Wu, Zhao-qun Deng, Zhi-hui Zhang, Xin-yue Lian,Pin-fang He,Xin-yu Yao,Jiang Lin,Jun Qian 期刊:Onco Targets Ther? 影響因子:3.046 PMID:31118680

        《High expression of PIM2 induces HSC proliferation in myelodysplastic syndromes via the IDH1/HIF1?α signaling pathway》 作者:Zhaoyun Liu, Mengyue Tian, Kai Ding ,Hui Liu, Yangyang Wang, Rong Fu 期刊:Oncol Lett. 影響因子:1.871 PMID:31186757

         

         

         

         

         

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