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        • PFP試劑盒 光合作用
        產(chǎn)品名稱:

        PFP試劑盒 光合作用

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-21
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        中文名稱
        PFP試劑盒 光合作用
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Pyrophosphate: Fructose-6-Phosphate-1-Phosphoric Acid Transferase(PFP) Activity Assay Kit
        別名
        焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸轉(zhuǎn)移酶(PFP)試劑盒 焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC3400
        規(guī)格50T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸轉(zhuǎn)移酶(PFP)檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸轉(zhuǎn)移酶PFP活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

        紫外分光光度法

        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。

        貨號(hào)BC3400

        規(guī)格50T/48S

        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液

        液體55 mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體40 mL×1

        2-8℃保存

        試劑二

        粉劑×1

        -20℃保存

        試劑三

        粉劑×1

        -20℃保存

        試劑四

        液體×2

        2-8℃保存

        試劑五

        液體×2

        -20℃保存

        試劑六

        液體60 μL×1

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、 試劑二:臨用前加6 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存兩周,禁止反復(fù)凍融。

        2、 試劑三:臨用前加6 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存兩周,禁止反復(fù)凍融。

        3、 試劑四:臨用前1加入0.3 mL蒸餾水溶解備用,2-8℃保存一周。

        4、 試劑五:臨用前1加入0.3 mL蒸餾水溶解備用,-20分裝保存一周,禁止反復(fù)凍融。

        5、 試劑六:臨用前加入0.6 mL蒸餾水溶解備用,2-8保存一周,也可按比例現(xiàn)用現(xiàn)配。

        產(chǎn)品說(shuō)明:

        焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸轉(zhuǎn)移酶(PFPEC2.7.1.90)是一種胞質(zhì)酶,廣泛存在于植物組織中,與磷酸果糖激酶一樣催化果糖-6-磷酸的磷酸化,單PEP催化反應(yīng)為可逆反應(yīng),并以焦磷酸代替ATP,在光合作用碳代謝中起重要作用。

        PFP催化6-磷酸果糖轉(zhuǎn)化為1,6-二磷酸果糖,它在醛縮酶和磷酸丙糖異構(gòu)酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿岫u丙 酮,再由α-磷酸甘油脫氫酶和NADH 催化生成3-二磷酸甘油和NAD,340nm處的吸光度變化反映了PFP的活性的高低。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

        需自備的儀器和用品:

        可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1 mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水、EP管。

        操作步驟:

        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        1、組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1 g,加入1 mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃20000 g離心15 min,取上清置冰上待測(cè);

        2、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1 mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300 W,超聲3 s,間隔7 s,總時(shí)間3 min);然后4℃,20000 g離心15 min,取上清置冰上待測(cè);

        3、液體:直接檢測(cè)。

        二、測(cè)定步驟

        1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340 nm,蒸餾水調(diào)零。  

        2、 操作表:

        試劑名稱(μL

        測(cè)定管

        空白管

        試劑一

        670

        670

        試劑二

        100

        100

        試劑三

        100

        100

        試劑四

        10

        10

        試劑五

        10

        10

        試劑六

        10

        10

        樣本

        100

        -

        蒸餾水

        -

        100

        充分混勻于1 mL石英比色皿中測(cè)定37℃條件下,340 nm處初始值A130 min的吸光值A2,分別記為A1測(cè)定管、A1空白管、A2測(cè)定管,A2空白管。計(jì)算 ΔA= A1測(cè)定管-A2測(cè)定管)-A1空白管-A2空白管)。

        注:也可將試劑一、二、三、四、五、六按操作表比例,配制成工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用;空白管只需做1-2次。

        三、焦磷酸:果糖6-磷酸-1磷酸轉(zhuǎn)移酶活性的計(jì)算

        1)按照樣本蛋白濃度計(jì)算

        酶活單位定義:每毫克組織蛋白每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個(gè)酶活力單位。

        PFPU/mg prot=ΔA÷ε×d×V反總×109÷(V×Cpr) ÷T=53.59×ΔA÷Cpr

        2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

        酶活單位定義:每克組織每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個(gè)酶活力單位。

        PFPU/g 質(zhì)量)=ΔA÷ε×d×V反總×109÷(W×V÷V提取) ÷T=53.59×ΔA÷W

        3)按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

        酶活單位定義:每104個(gè)細(xì)胞每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個(gè)酶活力單位。

        PFPU/104 cell= ΔA÷ε×d×V反總×109÷(V×細(xì)胞數(shù)量÷V提取) ÷T=53.59×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量

        4)按照液體體積計(jì)算

        酶活單位定義:每毫升液體每分鐘消耗1 nmolNADH定義為一個(gè)酶活力單位。

        PFPU/mL=ΔA÷ε×d×V反總×109÷V÷T=53.59×ΔA

        V反總:反應(yīng)體系總體積,0.001 L;εNADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1 cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V提?。杭尤胩崛∫后w積,1 mLT:反應(yīng)時(shí)間,30 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g109換算系數(shù),1mol=109 nmol

         

        注意事項(xiàng):

        1、每次檢測(cè)樣本數(shù)不宜太多以免耽誤過(guò)多的酶促反應(yīng)時(shí)間。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1、0.1g豆芽進(jìn)行樣本處理,取上清后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算 A1測(cè)定管-A2測(cè)定管=1.041-0.963=0.078、A1空白管-A2空白管=0ΔA=A1測(cè)定管-A2測(cè)定管)-A1空白管-A2空白管)=0.078,按照樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        PFPU/g 質(zhì)量)=ΔA÷ε×d×V反總×109÷(W ×V÷V提取) ÷T=53.59×ΔA÷W=41.8 U/g 質(zhì)量

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC0990/BC0995  植物葉綠素含量檢測(cè)試劑盒

        BC2210/BC2215  3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)活性檢測(cè)試劑盒

        BC4330/BC4335  植物類胡蘿卜素含量檢測(cè)試劑盒

        PFP試劑盒 光合作用 PFP試劑盒 光合作用

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