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您的位置： 網(wǎng)站首頁 > 產(chǎn)品中心 > 生化檢測(cè)試劑盒-常量法 > 其它系列 > BC3170-50T/48S乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 其它
  • 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 其它
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產(chǎn)品名稱：

乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 其它
產(chǎn)品品牌： SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格：
廠商性質(zhì)： 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間： 2025-04-21
儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 其它
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Acetokinase(ACK) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品概述

品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
分子式詳詢純度詳詢
分子量詳詢貨號(hào)BC3170
規(guī)格50T/48S供貨周期現(xiàn)貨
主要用途乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


乙酸激酶（ACK）活性檢測(cè)試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC3170
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體50 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×1瓶2-8℃保存
試劑三粉劑×2瓶-20℃保存
試劑四粉劑×2瓶-20℃保存
試劑五粉劑×1支-20℃保存
試劑六液體95 μL×1瓶2-8℃保存
試劑七液體110 μL×1瓶-20℃保存
試劑八粉劑×1瓶2-8℃保存
試劑九粉劑×1支2-8℃保存
溶液的配制：

  1. 提取液：臨用前將試劑九加入到提取液中，并于2-8℃保存；

  2. 試劑二：臨用前每瓶加入4 mL蒸餾水，充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存；

  3. 試劑三：臨用前每瓶加入3 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；

  4. 試劑四：臨用前每瓶加入2 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；

  5. 試劑五：臨用前每支加入1 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；

  6. 試劑六：液體置于試劑瓶?jī)?nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑六、蒸餾水按43:457（V:V）的比例配制備用，現(xiàn)用現(xiàn)配；

  7. 試劑七：液體置于試劑瓶?jī)?nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑七、蒸餾水按1:9（V:V）的比例配制備用，現(xiàn)用現(xiàn)配；

  8. 試劑八：臨用前加入5 mL蒸餾水，充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存；

  9. 工作液：吸取0.3 mL 試劑二、1 mL試劑三、0.65 mL試劑四、0.2 mL試劑五、0.2 mL試劑六、0.2 mL試劑七、1 mL試劑八混勻，也可根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配，于冰上備用。

產(chǎn)品說明：
ACK廣泛存在于生物體內(nèi)，催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP，是細(xì)菌碳代謝和能量代謝的關(guān)鍵酶，尤其是在古細(xì)菌甲烷合成代謝中起著中樞作用。
測(cè)定原理如下：（1）ACK催化乙酸鈉和ATP生成乙酰磷酸和ADP，（2）*酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和*酮酸，（3）乳酸脫氫酶催化丙*酸和NADH生成乳酸和NAD+，（4）在340nm下測(cè)定NADH氧化生成NAD+

速率，即可反映ACK活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

  1. 測(cè)定過程中樣本和所有試劑在冰上放置，以免變性和失活。

  2. 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。

  3. ΔA大于1時(shí)，建議稀釋后測(cè)量，注意計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)；ΔA小于0.01時(shí)，建議延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間測(cè)量，注意計(jì)算公式變化。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

  1. 取0.1g腎臟組織樣本，加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定1-A測(cè)定2=1.893-1.147=0.746，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005，ΔA=ΔA測(cè)定-ΔA空白= 0.746-0.005=0.741，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

ACK（U/g 質(zhì)量）=536×ΔA÷W=536×0.741÷0.1=3971.76 U/g 質(zhì)量。

  1. 取500萬大腸桿菌加入1mL提取液超聲破碎，離心，取上清后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定1-A測(cè)定2=1.476-1.448=0.028，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005，ΔA=ΔA測(cè)定-ΔA空白=0.028-0.005=0.023，按細(xì)菌數(shù)量計(jì)算酶活得：

ACK（U/104 cell）=1.072×ΔA=1.072×0.023=0.0247 U/104 cell。
參考文獻(xiàn)：

  1. Mukhopadhyay S, Hasson M S, Sanders D A. A continuous assay of acetate kinase activity: Measurement of inorganic phosphate release generated by hydroxylaminolysis of acetyl phosphate[J]. Bioorganic chemistry, 2008, 36(2): 65-69.

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乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 其它 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒 其它

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