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        • 乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒 其它
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        產(chǎn)品名稱:

        乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒 其它

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2025-04-21
        儲存條件
        -20℃
        中文名稱
        乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒 其它
        有效期
        6個月
        單位

        英文名稱
        Acetokinase(ACK) Activity Assay Kit
        檢測方法
        紫外分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC3170
        規(guī)格50T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途乙酸激酶(ACK)活性檢測應用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒說明書
        紫外分光光度法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
        貨號BC3170
        規(guī)格50T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體50 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體30 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×12-8℃保存
        試劑三粉劑×2-20℃保存
        試劑四粉劑×2-20℃保存
        試劑五粉劑×1-20℃保存
        試劑六液體95 μL×12-8℃保存
        試劑七液體110 μL×1-20℃保存
        試劑八粉劑×12-8℃保存
        試劑九粉劑×12-8℃保存
        溶液的配制:
        1. 提取液:臨用前將試劑九加入到提取液中,并于2-8℃保存;

        2. 試劑二:臨用前每瓶加入4 mL蒸餾水,充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存;

        3. 試劑三:臨用前每瓶加入3 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;

        4. 試劑四:臨用前每瓶加入2 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;

        5. 試劑五:臨用前每支加入1 mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑-20℃保存;

        6. 試劑六:液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑、蒸餾水按43:457(V:V)的比例配制備用,現(xiàn)用現(xiàn)配;

        7. 試劑七:液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑、蒸餾水按1:9(V:V)的比例配制備用,現(xiàn)用現(xiàn)配;

        8. 試劑八:臨用前加入5 mL蒸餾水,充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存;

        9. 工作液:吸取0.3 mL 試劑二、1 mL試劑三、0.65 mL試劑四、0.2 mL試劑五、0.2 mL試劑六、0.2 mL試劑七、1 mL試劑八混勻,也可根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配,于冰上備用。

        產(chǎn)品說明:
        ACK廣泛存在于生物體內(nèi),催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP,是細菌碳代謝和能量代謝的關(guān)鍵酶,尤其是在古細菌甲烷合成代謝中起著中樞作用。
        測定原理如下:(1)ACK催化乙酸鈉和ATP生成乙酰磷酸和ADP,(2)*酸激酶催化ADPPEP生成ATP和*酮酸,(3)乳酸脫氫酶催化丙*酸和NADH生成乳酸和NAD+,(4)在340nm下測定NADH氧化生成NAD+

        速率,即可反映ACK活性。
        注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
        自備的儀器和用品
        臺式離心機、紫外分光光度計、水浴鍋、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。
        操作步驟具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        注意事項:
        1. 測定過程中樣本和所有試劑在冰上放置,以免變性和失活。

        2. 比色皿中反應液的溫度必須保持37℃或25℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃25℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃25℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。

        3. ΔA大于1時,建議稀釋后測量,注意計算公式乘以稀釋倍數(shù);ΔA小于0.01時,建議延長反應時間測量,注意計算公式變化。

        實驗實例:
        1. 取0.1g腎臟組織樣本,加入1mL提取液進行勻漿研磨,取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A測定1-A測定2=1.893-1.147=0.746,ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005,ΔA=ΔA測定-ΔA空白= 0.746-0.005=0.741按樣本質(zhì)量計算酶活得

        ACK(U/g 質(zhì)量)=536×ΔA÷W=536×0.741÷0.1=3971.76 U/g 質(zhì)量。
        1. 500萬大腸桿菌加入1mL提取液超聲破碎,離心,取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A測定1-A測定2=1.476-1.448=0.028,ΔA空白=A1-A空白2=1.453-1.448=0.005ΔA=ΔA測定-ΔA空白=0.028-0.005=0.023,按細菌數(shù)量計算酶活得

        ACK(U/104 cell)=1.072×ΔA=1.072×0.023=0.0247 U/104 cell。
        參考文獻:
        1. Mukhopadhyay S, Hasson M S, Sanders D A. A continuous assay of acetate kinase activity: Measurement of inorganic phosphate release generated by hydroxylaminolysis of acetyl phosphate[J]. Bioorganic chemistry, 2008, 36(2): 65-69.

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        乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒 其它 乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒 其它

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