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        • 漆酶活性檢測(cè)試劑盒 其他系列
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        產(chǎn)品名稱:

        漆酶活性檢測(cè)試劑盒 其他系列

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-21
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        漆酶活性檢測(cè)試劑盒 其他系列
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Laccase Activity Assay Kit
        檢測(cè)方法
        可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC1630
        規(guī)格50管/48樣供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途漆酶活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        漆酶活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

        可見(jiàn)分光光度法

        貨號(hào)BC1630

        規(guī)格50T/48S

        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液

        液體60 mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體50 mL×1

        2-8℃保存

        試劑二

        粉劑×2

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 工作液的配制:一瓶試劑二用25 mL試劑一溶解?,F(xiàn)用現(xiàn)配。

        產(chǎn)品說(shuō)明:

        漆酶(CE1.10.3.2)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,漆酶存在菇、菌及植物中,是一種環(huán)保型酶,其催化性質(zhì)在生物檢測(cè)中有廣泛的應(yīng)用。

        漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測(cè)定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

        自備的儀器用品:

        可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、天平、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水,水浴鍋

        操作步驟:

        一、樣本處理可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)   

        1、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

        2、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃10000g離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

        3、培養(yǎng)液:直接檢測(cè)。

        二、測(cè)定步驟

        1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至420nm,蒸餾水調(diào)零。

        2、 水浴鍋溫度調(diào)至45。

        3、 操作表:在1mL玻璃比色皿中分別加入下列試劑:

         

         

         

         

        樣本名稱

        測(cè)定管

        空白管

        樣本(μL

        150


        蒸餾水(μL

        -

        150

        工作液(μL

        850

        850

        1mL玻璃比色皿中分別加入上述試劑,充分混勻后于420nm處測(cè)定10s時(shí)的吸光值A1,迅速置于45水浴3min,拿出迅速擦干測(cè)定190s時(shí)的吸光值A2,計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定,ΔA空白管=A2空白-A1空白,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管。空白管只需做1-2

        三、漆酶活計(jì)算

        1、按蛋白濃度計(jì)算

        酶活定義:每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

        漆酶酶活(U/mg prot=ΔA÷ε×d×V反總×109÷V×Cpr÷T=61.7×ΔA÷Cpr

        2、按樣本質(zhì)量計(jì)算

        酶活定義:每克樣本每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

        漆酶酶活(U/g 質(zhì)量=ΔA÷ε×d×V反總×109÷V×W÷V樣總)÷T=61.7×ΔA÷W

        3、按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

        酶活定義:每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

        漆酶酶活(U/104 cell=ΔA÷ε×d×V反總×109÷V×500÷V樣總)÷T=0.123×ΔA

        4、按液體體積計(jì)算

        酶活定義:每mL液體每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

        漆酶酶活(U/mL=ΔA÷ε×d×V反總×109÷V÷T=61.7×ΔA

        εABTS摩爾消光系數(shù):36000L/mol/cmd:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.001LV樣:反應(yīng)中樣本體積,0.15mLV樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL,蛋白濃度需自行測(cè)定;W,樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,3min500:細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn);109:?jiǎn)挝粨Q算系數(shù),1mol=109nmol。

        注意事項(xiàng):

        1、工作液需臨用前配制,并且盡快使用,4℃保存一周,若變色則不能使用。

        2、測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請(qǐng)將樣本用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

        3、空白管為檢測(cè)各試劑組分質(zhì)量的檢測(cè)孔,正常情況下,OD值變化不超過(guò)0.05。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 0.1g香菇加1mL提取液進(jìn)行樣本處理,取上清后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定=0.657-0.084=0.573,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.087-0.058=0.029ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.573-0.029=0.544,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        漆酶酶活(U/g 質(zhì)量=61.7×ΔA÷W=61.7×0.544÷0.1=335.648 U/g 質(zhì)量。

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        BC0200/BC0205 過(guò)氧化氫酶(CAT)活性檢測(cè)試劑盒

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        漆酶活性檢測(cè)試劑盒 其他系列 漆酶活性檢測(cè)試劑盒 其他系列

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