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        • 小鼠白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        小鼠白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2022-08-16
        Solarbio ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。小鼠白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒是將抗小鼠IL-2 單克隆抗體包被在酶標板上;分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本;洗板后加入生物素化抗小鼠IL-2 抗體;后,在λmax=450 nm(OD=450 nm)處測定反應孔樣品吸光度(OD),通過計算出樣本中小鼠IL-2 的濃度。?

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶貨號SEKM-0004
        規(guī)格96T供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途小鼠IL-2 含量測定應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁
        小鼠白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒
        注意事項:※※※

         1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。

         2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。

         3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。 

         4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持*。

         5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜(※)及潔凈塑料容器。.

         6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶 蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請 用移液器小心吹打幾次。

         7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試 劑代替本試劑盒中的某單個組分。

         8. 為保證結果準確,每次檢測均需做標準曲線。

         

        安全提示:

        試劑盒中的終止液為酸性溶液,操作人員在使用時請帶上手套并注意防護;在操 作過程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛,如果不慎接觸,請用大量清水清洗;檢測血液樣本 及其它體液樣本時,請按國家生物實驗室安全防護有關管理規(guī)定執(zhí)行。 

        小鼠白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒

        試劑盒組成及儲存:

         

        自備實驗器材(不提供,可代購) 

        1. 酶標儀(主波長 450nm,參考波長 630nm)

        2. 高精度移液器及一次性吸頭:0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl 

        3. 洗板機或洗瓶 

        4. 37℃孵育箱 

        5. 雙蒸水,去離子水,量筒等 

        6. 稀釋用聚丙烯試管 

         

         

        小鼠白細胞介素2

        樣本收集及儲存:

        1. 細胞培養(yǎng)上清: 將細胞培養(yǎng)基移無菌離心管,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝 于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。 

        2. 血清樣本: 室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝 于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀, 請再次離心,避免反復凍融。

        3. 血漿樣本: 將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作 為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。 

        ※注意:

        血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本,以免影響檢測結果;如果樣本中的靶標 物檢測濃度高于標準品的值,請將樣品做適當倍數(shù)稀釋后檢測,建議正式實驗前做預實 驗以確定稀釋倍數(shù)。

         

        試劑準備:

        1. 試劑回溫:首先在實驗前 30 min 將試劑盒,待測樣本放置于室溫下,濃縮洗滌液如出現(xiàn) 結晶,請放入 37℃溫浴直到結晶全部溶解。

        2. 配制洗滌液:預先計算好稀釋后的洗滌液使用體積,然后用雙蒸水或去離子水將 20 倍 濃縮洗滌液稀釋成 1 倍應用液,未用完的濃縮洗滌液放入 4℃冰箱保存。

        3. 標準品梯度稀釋:加入標準品/樣本稀釋液(SR1)1ml凍干標準品中,靜置15分鐘待 其*溶解后輕輕混勻(濃度為1000pg/ml),然后按照以下濃度:1000、 500、 250、125、 62.5、31.25、15.625、 0 pg/ml進行稀釋。復溶過的標準品原液(1000pg/ml)未用完的 應廢棄或根據(jù)需要按照一次用量分裝,并將其貯存在-20~-80℃冰箱,具體如下圖。

         

        4. 生物素化抗體工作液:預先計算好試驗所需用量,用檢測稀釋液(SR2)將100倍抗體濃 縮液稀釋成1倍應用工作液(稀釋前充分混勻),請在30分鐘內(nèi)加入到反應孔中。 

         

        生物素化抗體工作液具體稀釋方法如下:

        5. 酶結合物工作液:按每次試驗所需用量配制,用酶結合物稀釋液(SR3)將100倍濃縮酶 結合物稀釋成1倍應用工作液(稀釋前離心),請在30分鐘內(nèi)使用。

         

         酶結合物工作液具體稀釋方法如下:

        6. 洗滌方法: ? 自動洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,注入洗滌液為 300ul/ 孔,注與吸出間隔為 30 秒,洗板 5 次。 ? 手工洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,用洗瓶加入洗滌液 300ul/孔,靜止 30 秒后甩凈酶標板孔中液體,在厚迭的吸水紙上拍干,洗板 5 次。 

         

         

         

        檢測步驟:

         

         

        結果判斷: 

        1.用酶標儀 450 nm 波長測定 OD 值。選擇雙波長檢測,參考波長為 630 nm。如不能進行 雙波長檢測,請用 450 nm 的 OD 測定值減去 630 nm 的 OD 測定值。

         2.計算標準品、樣品的平均 OD 值:每個標準品和標本的 OD 值應減去零孔的 OD 值 

        3.以標準品濃度為橫坐標,吸光度OD值為縱坐標,用軟件繪制標準曲線,樣品中IL-2含量可 通過對應OD值由標準曲線換算出相應的濃度。 

        4.若標本 OD 值高于標準曲線上限,應做適當稀釋后重新檢測,計算濃度時再乘以稀釋倍數(shù)。 

         

        小鼠白細胞介素2( IL-2 )ELISA試劑盒參數(shù)表征:

         1. 數(shù)據(jù)及標準曲線

        2. 靈敏度: 

        低可檢測小鼠 IL-2 濃度達 7pg/ml, 20 個零標準品濃度 OD 的平均值加上兩個標準差,計算相應的可檢測濃度。

        3. 特異性:

         不與小鼠 IL-2、4、6、8、10 反應,大鼠 IL-2、4、6、8 等反應

        4. 重復性: 

        板內(nèi),板間變異系數(shù)<10% 5. 回收率: 在選取的健康小鼠血漿、細胞培養(yǎng)上清中加入 3 個不同濃度水平的小鼠 IL-2,計算回收率。

        5. 回收率: 

        在選取的健康小鼠血漿、細胞培養(yǎng)上清中加入 3 個不同濃度水平的小鼠 IL-2,計算回收率。

        6. 線性稀釋

        分別在選取的 4 份健康小鼠血漿和細胞培養(yǎng)上清中加入高濃度小鼠 IL-2,在標準曲線動力 學范圍內(nèi)進行稀釋,評估線性。

         

         

        小鼠白細胞介素2( IL-2 )ELISA試劑盒

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