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        • 人白細胞介素24(IL-24)ELISA試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        人白細胞介素24(IL-24)ELISA試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2022-08-16
        Solarbio ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。人白細胞介素24(IL-24)ELISA試劑盒是將抗人IL-24 單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上;分別加入梯度稀釋的標(biāo)準品和預(yù)稀釋的樣本;洗板后加入生物素化抗人IL-24 抗體;后,在λmax=450 nm(OD=450 nm)處測定反應(yīng)孔樣品吸光度(OD),通過計算出樣本中人IL-24的濃度。?

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶貨號SEKH-0035
        規(guī)格96T/48T供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途人IL-24含量測定應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁

        人白細胞介素24(IL-24)ELISA試劑盒

        注意事項: 
        1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。 
        2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準品,請丟棄。 
        3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。 
        4. 在試驗中標(biāo)準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持*。 
        5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜(※)及潔凈塑料容器。. 
        6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶 蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹 打幾次。 
        7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的 試劑代替本試劑盒中的某單個組分。 
        8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標(biāo)準曲線。 
         

        安全提示: 
        試劑盒中的終止液為酸性溶液,操作人員在使用時請帶上手套并注意防護;在操作過程中也要避免試 劑接觸皮膚和眼睛,如果不慎接觸,請用大量清水清洗;檢測血液樣本及其它體液樣本時,請按國家生物 實驗室安全防護有關(guān)管理規(guī)定執(zhí)行。




         

        自備實驗器材(不提供,可代購) 
        1. 酶標(biāo)儀(主波長 450nm,參考波長 630nm) 
        2. 高精度移液器及一次性吸頭:0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl 
        3. 洗板機或洗瓶 
        4. 37℃孵育箱 
        5. 雙蒸水,去離子水,量筒等 
        6. 稀釋用聚丙烯試管 
         

        人白細胞介素24(IL-24)ELISA試劑盒

         樣本收集及儲存: 
        1. 細胞培養(yǎng)上清: 將細胞培養(yǎng)基移無菌離心管,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于 -20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。 
        2. 血清樣本: 室溫血液自然凝固20 min后,在4℃條件下1000×g離心10 min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃ 下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。 
        3. 血漿樣本: 將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢 測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。 
        ※注意:
        血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本,以免影響檢測結(jié)果;如果樣本中的靶標(biāo)物檢測濃度高于 標(biāo)準品的值,請將樣品做適當(dāng)倍數(shù)稀釋后檢測,建議正式實驗前做預(yù)實驗以確定稀釋倍數(shù)。 
         

        試劑準備: 
        1. 試劑回溫:首先在實驗前 30 min 將試劑盒,待測樣本放置于室溫下,濃縮洗滌液如出現(xiàn)結(jié)晶,請放入 37℃溫浴直到結(jié)晶全部溶解。 
        2. 配制洗滌液:預(yù)先計算好稀釋后的洗滌液使用體積,然后用雙蒸水或去離子水將 20 倍濃縮洗滌液稀釋 成 1 倍應(yīng)用液,未用完的濃縮洗滌液放入 4℃冰箱保存。 
        3. 標(biāo)準品梯度稀釋:加入標(biāo)準品/樣本稀釋液(SR1)1ml凍干標(biāo)準品中,靜置15分鐘待其*溶解后輕 輕混勻(濃度為4000pg/ml),然后按照以下濃度進行2倍稀釋:4000、2000、1000、500、250、125、62.5 pg/ml進行稀釋,4000pg/ml為標(biāo)準曲線點濃度,標(biāo)準品/樣本稀釋液(SR1)作為標(biāo)準曲線的零點 (0pg/ml)。復(fù)溶過的標(biāo)準品原液(4000pg/ml)未用完的應(yīng)廢棄或根據(jù)需要按照一次用量分裝,并將其 貯存在-20~-80℃冰箱,具體如下圖。



         

        4. 生物素化抗體工作液:預(yù)先計算好試驗所需用量,用檢測稀釋液(SR2)將100倍抗體濃縮液稀釋成1倍 應(yīng)用工作液(稀釋前充分混勻),請在30分鐘內(nèi)加入到反應(yīng)孔中。

         

         

         



        5. 酶結(jié)合物工作液:按每次試驗所需用量配制,用酶結(jié)合物稀釋液(SR3)將100倍濃縮酶結(jié)合物稀釋成1 倍應(yīng)用工作液(稀釋前離心),請在30分鐘內(nèi)使用。

        6. 洗滌方法: ? 自動洗板:甩盡酶標(biāo)板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,注入洗滌液為 300ul/孔,注 與吸出間隔為 30 秒,洗板 5 次。 ? 手工洗板:甩盡酶標(biāo)板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,用洗瓶加入洗滌液 300ul/孔,靜止 30 秒后甩凈酶標(biāo)板孔中液體,在厚迭的吸水紙上拍干,洗板 5 次。

         

        結(jié)果判斷: 
        1.用酶標(biāo)儀 450 nm 波長測定 OD 值。選擇雙波長檢測,參考波長為 630 nm。如不能進行雙波長檢測,請 用 450 nm 的 OD 測定值減去 630 nm 的 OD 測定值。 
        2.計算標(biāo)準品、樣品的平均 OD 值:每個標(biāo)準品和標(biāo)本的 OD 值應(yīng)減去零孔的 OD 值。 
        3.以標(biāo)準品濃度為橫坐標(biāo),吸光度OD值為縱坐標(biāo),用軟件繪制標(biāo)準曲線,樣品中IL-24含量可通過對應(yīng)OD 值由標(biāo)準曲線換算出相應(yīng)的濃度。 
        4.若標(biāo)本 OD 值高于標(biāo)準曲線上限,應(yīng)做適當(dāng)稀釋后重新檢測,計算濃度時再乘以稀釋倍數(shù)


        2. 靈敏度: 
        低可檢測人 IL-24 濃度達 30pg/ml, 20 個零標(biāo)準品濃度 OD 的平均值加上兩個標(biāo)準差,計算相應(yīng)的可檢測濃度。 
        3. 特異性: 
        不與人 IL-22R、IL-20Rα/Fc Chimera,小鼠 IL-24 等反應(yīng)。 
        4. 重復(fù)性: 
        板內(nèi),板間變異系數(shù)<10%。 
        5. 回收率: 
        在選取的健康人血漿、細胞培養(yǎng)上清中加入 3 個不同濃度水平的人 IL-24,計算回收率

        6. 線性稀釋: 分別在選取的 4 份健康人血漿和細胞培養(yǎng)上清中加入高濃度人 IL-24,在標(biāo)準曲線動力學(xué)范圍內(nèi)進行稀釋, 評估線性。






         

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