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        • 苯*氨酸解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒 微量法
        • 苯*氨酸解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒 微量法
        產品名稱:

        苯*氨酸解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒 微量法

        產品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2024-04-09
        儲存條件
        2-8℃
        中文名稱
        苯*氨酸解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        推薦
        若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
        英文名稱
        Phenylalnine Ammonialyase(PAL) Activity Assay Kit
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/96S

        產品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC0215
        規(guī)格100T/96S供貨周期現貨
        主要用途檢測樣本中的苯*氨酸解氨酶(PAL)活性應用領域環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁,綜合


        苯*氨酸解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒說明書
        微量法
        注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
        貨號:BC0215
        規(guī)格:100T/96S
        產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體110 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體15 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×22-8℃保存
        試劑三液體1 mL×1支2-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑二:臨用前取1瓶加入2.5 mL蒸餾水充分溶解待用;現配現用,2-8可保存2周。

        產品說明:
        PAL(EC4. 3 1 5)廣泛存在于各種植物和少數微生物中,是植物體內苯丙烷類代謝的關鍵酶和限速酶,在動物體內尚未發(fā)現。與一些重要的次生物質如木質素、類黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關,在植物正常生長發(fā)育、抗病、抗逆反應中起重要作用。
        PAL催化L-苯*氨酸裂解為反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在290nm處有最大吸收值,通過測定吸光值升高速率計算PAL活性。
        注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96UV板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        操作步驟:
        一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
        稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。
        二、測定步驟

        1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至290nm,蒸餾水調零。

        2. 操作表:(在EP管或96孔板中按順序加入下列試劑)

        試劑名稱(μL測定管空白管
        樣本5-
        試劑一145150
        試劑二4040
        混勻,30℃ 準確反應30min
        試劑三1010


        混勻,靜置10min后,290nm處記錄測定管吸光值A1和空白管吸光值A2,ΔA=A1-A2。(空白管只需做1-2次)
        三、PAL活性計算
        a、用微量石英比色皿測定的計算公式如下
        (1)按蛋白濃度計算
        單位的定義:每mg組織蛋白在每mL反應體系中每分鐘使290nm下吸光值變化0.1定義為一個酶活性單位。
        PAL活性(U/mg prot)=ΔA×V反總÷0.1÷(Cpr×V樣)÷T =13.33×ΔA÷Cpr
        (2)按按樣本質量計算
        單位的定義:每g組織在每mL反應體系中分鐘使290nm下吸光值變化0.1定義為一個酶活性單位。
        PAL活性(U/g質量)=ΔA×V反總÷0.1÷(V樣÷V提取×W÷T =13.33×ΔA÷W
        V樣:加入樣本體積,5µL=0.005mL;V提取:加入提取液體積,1mL;V反總:反應總體積,200µL=0.2mL;T:反應時間,30min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g
        b、用96孔板測定的計算公式如下
        (1)按蛋白濃度計算
        單位的定義:每mg組織蛋白在每mL反應體系中每分鐘使290nm下吸光值變化0.05定義為一個酶活性單位。
        PAL活性(U/mg prot)=ΔA×V反總÷0.05÷(Cpr×V樣)÷T =26.67×ΔA÷Cpr
        (2)按按樣本質量計算
        單位的定義:每g組織在每mL反應體系中每分鐘使290nm下吸光值變化0.05定義為一個酶活性單位。
        PAL活性(U/g質量)=ΔA×V反總÷0.05÷(V樣÷V提取×W÷T =26.67×ΔA÷W
        V樣:加入樣本體積,5µL=0.005mL;V提?。杭尤胩崛∫后w積,1mL;V反總:反應總體積,200µL=0.2mL;T:反應時間,30min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。
        相關發(fā)表文獻:

        1. Li B, Ding Y, Tang X, et al. Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)[J]. Food and Bioprocess Technology, 2019, 12(4): 563-574.

        2. Zhang J, Lv J, Xie J, et al. Nitrogen Source Affects the Composition of Metabolites in Pepper (Capsicum annuum L.) and Regulates the Synthesis of Capsaicinoids through the GOGAT–GS Pathway[J]. Foods, 2020, 9(2): 150.

        參考文獻:

        1. Ayda? S B, Ozturk S, Asl?m B. Phenylalanine ammonia lyase (PAL) enzyme activity and antioxidant properties of some cyanobacteria isolates[J]. Food chemistry, 2013, 136(1): 164-169.

        2. Rosler J, Krekel F, Amrhein N, et al. Maize phenylalanine ammonia-lyase has tyrosine ammonia-lyase activity[J]. Plant physiology, 1997, 113(1): 175-179.

        3. Cheng G W, Breen P J. Activity of phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and concentrations of anthocyanins and phenolics in developing strawberry fruit[J]. Journal of the American Society for Horticultural Science, 1991, 116(5): 865-869.

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