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        • 大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-22
        大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒
        貨號(hào):P8630
        規(guī)格:200ml/KIT
        保存 :室溫避光儲(chǔ)存,有效期少 2 年。

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶貨號(hào)P8630
        規(guī)格200ml供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途適用于從動(dòng)物抗凝血液中分離淋巴細(xì)胞,無(wú)菌條件下所分離的淋巴細(xì)胞可用于細(xì)胞培養(yǎng)等。應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油

        大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒
        貨號(hào) :P8630
        規(guī)格 :200ml/KIT
        保存 :室溫避光儲(chǔ)存,有效期少 2 年。


        產(chǎn)品簡(jiǎn)介 :
            本分離液為Ficoll、淀粉550與泛影酸葡jia胺的混合液。抗凝外周血可在分離液中分層。離心時(shí),在Ficoll、淀粉的作用下紅細(xì)胞與粒細(xì)胞聚集并迅速沉降;此時(shí),淋巴細(xì)胞及其他單個(gè)核細(xì)胞仍處于分離液上層,紅細(xì)胞污染可忽略不計(jì)。大部分血小板可在細(xì)胞清洗低速離心過(guò)程中去除。 其他人及動(dòng)物多種比重細(xì)胞分離液,因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,用戶在制定分離液時(shí)應(yīng)提供所需分離液的比重、動(dòng)物種屬及被分離細(xì)胞的名稱。
            適用于從大鼠抗凝血液中分離淋巴細(xì)胞,無(wú)菌條件下所分離的淋巴細(xì)胞可用于細(xì)胞培養(yǎng)等。本品僅供科研使用。


        注意事項(xiàng) :
            A.本實(shí)驗(yàn)要求,在正常大氣壓下,分離液、分離樣本以及分離環(huán)境溫度為20℃±2℃。分離液在低溫時(shí)呈較高密度,在高溫時(shí)呈較低密度。細(xì)胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,操作前可將樣本和分離液復(fù)溫18-22℃。為獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,好在取血后2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),血液提取后存放時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)胞活性越低。
            B.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如需稀釋血液或洗滌細(xì)胞,不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞凝集,大大降低細(xì)胞得率及純度。
            C.優(yōu)抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素,其他抗凝劑也可使用,但會(huì)影響細(xì)胞活性。應(yīng)注意在血液稀釋過(guò)程中去除抗凝劑體積。
            D.實(shí)驗(yàn)操作時(shí),不可使用含粉手套、不可使用內(nèi)毒素含量過(guò)高的液體,手套中的粉末顆粒及高內(nèi)毒素會(huì)激活淋巴細(xì)胞從而降低細(xì)胞得率及活性。
            E.本實(shí)驗(yàn)不可使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,其帶有的靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁影響分離效果。推薦使用未經(jīng)過(guò)堿處理的玻璃離心管。
            F.吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。
            G.如需進(jìn)行B、T細(xì)胞計(jì)數(shù),則需血液貯藏時(shí)間不得多于10小時(shí),否則將導(dǎo)致細(xì)胞被激活,得率降低。
            H.為去除所混雜的血小板,可在分離液上層加上4-20%蔗糖梯度等滲溶液進(jìn)行二次離心。
            I.細(xì)胞純度可在步驟10后使用瑞氏染色方法確定,細(xì)胞活性可用臺(tái)盼藍(lán)處理后觀察。
            J.由于各品牌離心機(jī)的性能不同,國(guó)內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時(shí)間,摸索的分離條件(具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定)。

         

        分離方法 :
        一、當(dāng)血液樣本小于3ml時(shí),實(shí)驗(yàn)方法如下:
            1. 取一支15ml離心管,加入3ml分離液置于18-22℃復(fù)溫。
            2. 將血液樣本小心加于分離液之液面上。18-22℃,400g離心20分鐘。低溫(如4℃)離心會(huì)降低細(xì)胞得率。
            3. 離心后,用吸管小心吸出分離液上層(包含淋巴細(xì)胞的細(xì)胞層)0.5cm以上的上清液部分,棄去。
            4. 用吸管小心吸取分離液層及淋巴細(xì)胞層于另一新離心管內(nèi)。
            5. 在步驟4中所得離心管中加入10ml PBS緩沖液或HBSS緩沖液混勻。
            6. 250g離心10分鐘。
            7. 棄上清。
            8. 用吸管以5ml PBS緩沖液或HBSS緩沖液重懸所得細(xì)胞。
            9. 250g離心10分鐘。
            10. 棄上清。重復(fù)步驟7、8、9,后以0.5ml后續(xù)試驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。
        二、當(dāng)血液樣本大于3ml時(shí),實(shí)驗(yàn)方法如下:
            1. 當(dāng)血液樣本粘度過(guò)高或血液樣本大于等于3ml時(shí),優(yōu)稀釋方法:將血液于18-22℃以250g離心10分鐘,棄去血漿,補(bǔ)充添加生理鹽水,添加量為所棄去血漿體積的1.5-2倍,混勻備用。注:不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞?huì)降低細(xì)胞得率及活性。
            2. 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管,加入分離液(加入量與稀釋后的血液樣本體積相等),置于18-22℃復(fù)溫。
            3. 將經(jīng)稀釋處理的血液樣本小心加于分離液之液面上。18-22℃,400g離心20分鐘。低溫(如4℃)離心會(huì)降低細(xì)胞得率。注:加入血液樣本后,樣本及分離液總體積不得超過(guò)離心管總體積的三分之二。
           4. 剩余步驟同“情況一”中步驟3步驟10。

         

        產(chǎn)品性能指標(biāo) 

        pH 7.0-7.5
        滲透壓 280-340mOsmol/kg
        內(nèi)毒素 ≤0.5EU/ml
        無(wú)菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
        澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10µm 以上的不溶性微粒20 粒以下,含25µm 以上的不溶性微粒5 粒以下
        貯藏及保存期限 :
        本分離液是敏光型的,應(yīng)在18℃-25℃避光保存,有效期兩年。啟封后置4℃保存,溶液變渾濁或污染細(xì)菌時(shí),產(chǎn)品失效。保存溫度較低(10℃以下)時(shí)分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

         

        大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒

         

         

         

        參考文獻(xiàn):
        《β?estradiol alleviates hypertension? and concanavalin A?mediated inflammatory responses via modulation of connexins in peripheral blood lymphocytes》 作者:Xin Ni, Liang Zhang, Xin Ma, Li?Ya Shan, Li Li, Jun?Qiang Si, Xin?Zhi Li, You?Yi Zhang, Ke?Tao Ma 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.922 PMID:30896818

        《Increased expression and functionality of the gap junction in peripheral blood lymphocytes is associated with hypertension-mediated inflammation in spontaneously hypertensive rats》 作者:Xin Ni, Xin-zhi Li, Zhi-ru Fan, Ai Wang, Hai-chao Zhang, Liang Zhang, Li LI, Jun-qiang Si & Ke-tao Ma  期刊:Cellular & Molecular Biology Letters 影響因子:3.367 PMID:30151015

        《Exosomes Derived from IDO1-Overexpressing Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Promote Immunotolerance of Cardiac Allografts》 作者:Ji-Gang He, Qiao-Li Xie, Bei-Bei Li, Liang Zhou, Dan Yan 期刊:Cell Transplantation 影響因子:3.477 PMID:30311501

        《Evaluation of controlled-release triamcinolone acetonide-loaded mPEG-PLGA nanoparticles in treating experimental autoimmune uveitis》 作者:Dadong Guo, Qin Li, Yuanyuan Sun, Junguo Guo, Qing Zhao, Xuewei Yin, Huixia Wei, Shanshan Wu and Hongsheng Bi 期刊:Nanotechnology 影響因子:3.399 PMID:30641491

         

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