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        • 豬骨髓單個核細胞分離液試劑盒
        產品名稱:

        豬骨髓單個核細胞分離液試劑盒

        產品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2025-04-22
        豬骨髓單個核細胞分離液試劑盒
        貨號:P5120
        規(guī)格:200ml/KIT
        保存:室溫避光儲存,有效期少 2 年。

        產品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶

        豬骨髓單個核細胞分離液試劑盒
        貨號:P5120
        規(guī)格:200ml/kit
        保存:室溫避光儲存,有效期少 2 年。


        試劑盒內容:

        全血及組織稀釋液 100ml
        細胞洗滌液 100ml
        試劑C 100ml
        試劑E 100ml
        試劑F 100ml
        說明書 1 份


        一、  各種動物骨髓細胞的采集方法
            1. 大鼠、小鼠骨髓的采集:用頸椎脫臼法處死動物,剝離出胸骨或股骨,用注射器吸取少量的F 液,沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液,以500g(約1800 轉/分)離心20 分鐘,棄上清。沉淀以F 液重復洗滌一次后用含20%胎牛血清的全血及組織稀釋液懸起(細胞濃度為2×10 8 -1×10 9 個/ml),備用。
           2. 大動物骨髓的采集:
            A.骨髓穿刺點定位
           (1)胸骨:穿刺部位在胸骨中線,胸骨體與胸骨柄連接處,或選胸骨上1/3 部。
           (2)脛骨:穿刺部位在脛骨內側,脛骨上端的下方1 厘米處。
           (3)肋骨:穿刺部位在第5~7 肋骨各自的中點上。
           (4)髁骨:穿刺部位在髁前上棘后2~3 厘米的髁嵴。
           (5)股骨:穿刺部位在股骨內側面,靠下端的凹面處。

         

        B.骨髓穿刺方法
           (1)實驗動物按要求固定,穿刺部位去毛、消毒、麻醉,要求局部麻醉范圍直達骨膜,也可作全麻。
           (2)操作人員帶消毒手套,確定穿刺點,估計從皮膚到骨髓的距離并依此固定骨髓穿刺針長度。左手拇、食指繃緊穿刺點周圍皮膚,右手持穿刺針在穿刺點垂直進針,小弧度左右旋轉鉆入,當有落空感時表示針尖已進入骨髓腔。用左手固定穿刺針,右手抽出針芯,連接注射器緩慢抽吸骨髓組織,當注射器內抽到少許骨髓時立即停止抽吸,收集骨髓細胞加入4-5ml F 液混勻,以500g(約1800 轉/分)離心20 分鐘,棄上清,沉淀以F 液重復洗滌兩次后用含20%胎牛血清的全血及組織稀釋液懸起(細胞濃度為2×10 8 -1×10 9 個/ml),備用。
           (3)左手壓住穿刺點周圍皮膚,迅速拔出穿刺針,用棉球壓迫數分鐘。如穿刺的是肋骨,除壓迫止血外,還需膠布封貼穿刺點,防止發(fā)生氣胸。

         

        3. 人骨髓的采集:
           臨床方法收集骨髓細胞加入4-5ml F液混勻,以500g(約1800轉/分)離心20分鐘,棄上清,沉淀以F液重復洗滌兩次后用含20%胎牛血清的全血及組織稀釋液懸起(細胞濃度為2×10 8 -1×10 9 個/ml),備用。


        二、骨髓淋巴細胞分離方法
            1.取1ml 骨髓細胞懸液與E液按1:1比例混合再與1份全血及組織稀釋液混勻置20℃-30℃下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,棄去底部紅細胞備用。
            2. 取渾濁的上清部分液體小心疊加在C 液之液面上(比例為1:1),20℃±2℃,400g(約1500 轉/分),離心20 分鐘(半徑15cm 水平轉子)。
             此時離心管中由上下細胞分四層。*層;為稀釋液層。第二層;為環(huán)狀乳白色含所需單個核細胞層。
             第三層;為透明分離液層。第四層;為極少紅細胞層。收集第二層細胞放入含細胞洗滌液4-5 毫升的試管中,充分混勻后,以500g(約1800 轉/分)離心20 分鐘。沉淀經反復洗滌2 次即得所需單個核細胞。
            注: 提取率約為80%。
            分離圖例:


        三、  注意事項
             A. 本分離液是敏光型的,在運輸和貯藏過程中應在18℃-25℃避光保存,啟封后置4℃保存避免微生物污染。另外,本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現(xiàn)白色結晶,影響分離效果。
            B. 待分離的骨髓要求新鮮,避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在20℃水浴箱中復溫20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時分離效果好,且所有操作過程一定要在無菌條件下進行。
            C. 由于各品牌離心機的性能不同,國內南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調節(jié)離心轉數,調節(jié)離心的時間,摸索的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。
            D. 好使用無靜電反應的離心管,推薦使用未經過堿處理的玻璃離心管。


        四、產品性能指標

        pH 7.0-7.5
        滲透壓 280-340mOsmol/kg
        內毒素 ≤0.5EU/ml
        無菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
        澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
        含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下


        五、貯藏及保存期限
            18℃-25℃避光保存,有效期兩年。啟封后置4℃保存,有效期一周。
            注:若保證無微生物污染,啟封后可置4℃長期保存。但應注意保存溫度較低時本分離液易出現(xiàn)白色結晶,影響分離效果。

         

        豬骨髓單個核細胞分離液試劑盒訂購說明:

        1、絕大部分產品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
        2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
        3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
        4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
        5、請辦理完貨款后,將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


        運輸說明:

        1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
        2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
        3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。

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