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        • NAD-蘋果酸酶活性檢測試劑盒 微量法
        • NAD-蘋果酸酶活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        NAD-蘋果酸酶活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2025-04-22
        儲存條件
        -20℃
        中文名稱
        NAD-蘋果酸酶活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        推薦
        若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
        英文名稱
        NAD Malic Enzyme(NAD-ME) Activity Assay Kit
        別名
        NAD-蘋果酸酶試劑盒 NAD-ME Kit NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)試劑盒 NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC1135
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定意義:ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)活性檢測試劑盒說明書
        微量法
        貨號: BC1135
        規(guī)格: 100T/96S
        產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體110 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×12-8℃保存
        試劑三粉劑×12-8℃保存
        試劑四粉劑×1-20℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑二:臨用前加入10 mL提取液充分溶解備用;

        2. 試劑三:臨用前每支加1 mL雙蒸水充分溶解備用;

        3. 試劑四:用時每支加500 μL雙蒸水充分溶解備用;

        4. 工作液:在7.5 mL試劑二中加入1 mL試劑三和0.5 mL試劑四,可以根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配。

        產(chǎn)品說明:
        ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙 酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)NADP-ME(EC1.1.1.40)。
        NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測定NADH增加速率。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、微量石英比色皿/96UV板、研缽/勻漿器、蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        注意事項(xiàng):

        1. 若A2-A1大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A2-A1小于0.5,可提高檢測靈敏度。

        2. 實(shí)驗(yàn)時,樣本在冰上放置,以免變性和失活。試劑一37℃或25℃水浴放置。

        3. 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃25℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。用96孔板做時盡量保持反應(yīng)溫度在37℃25℃。

        4. 最好兩個人同時做此實(shí)驗(yàn),一個人比色,一個人計時,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。用96孔板做時盡量做到樣本反應(yīng)時間一致。

        5. 如果ΔA0.01,可將反應(yīng)時間延長到10分鐘。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1g肝加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清,按照測定步驟操作,使用微量石英比色皿測得計算ΔA=A2-A1=0.893-0.6814=0.2116,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

        NAD-ME(U/g 質(zhì)量)=965×ΔA÷W=965×0.2116÷0.1=2041.94 U/g 質(zhì)量。
        參考文獻(xiàn):

        1. Spampinato C P, Colombo S L, Andreo C S. Interaction of analogues of substrate with NADP-malic enzyme from maize leaves[J]. Photosynthesis research, 1994, 39(1): 67-73.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0310/BC0315 輔酶Ⅰ NADH含量檢測試劑盒
        BC1030/BC1035 NAD激酶NADK活性檢測試劑盒
        BC0630/BC0635 NADH氧化酶NOX活性檢測試劑盒
         

        NAD-蘋果酸酶活性檢測試劑盒 微量法 NAD-蘋果酸酶活性檢測試劑盒 微量法

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