黃*呤氧化酶（XOD）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC1095
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑三：根據(jù)樣本量再用試劑二稀釋5倍后備用。用不完的試劑2-8℃可保存1周。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：10μmol/mL 亞*鈉。

產(chǎn)品說明：
XOD（EC 1.17.3.2）催化次黃*呤氧化生成黃*呤和超氧陰離子，是活性氧主要來源之一；同時也是核苷酸代謝的關(guān)鍵酶之一。XOD主要分布于哺乳動物的心、肺、肝臟等組織中，當(dāng)肝功能受損時，XOD大量釋放到血清中，對肝損害的診斷具有特異性的意義。
XOD催化次黃*呤產(chǎn)生超氧陰離子，超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO₂^-，NO₂^-在對氨 基苯磺酰胺和萘乙二 胺鹽酸鹽的作用下，生成紫紅色的偶氮化合物，在530nm有特征吸收峰，根據(jù)其生成量可反映XOD活性的大小。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、勻漿器/研缽、細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

實驗實例：

1. 取0.1011g兔腎臟加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算?A樣本=A測定管-A空白管=0.155-0.052=0.103，?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.450-0.052=0.398，按樣本質(zhì)量計算酶活得： XOD活性（U/g 質(zhì)量）=12.5×?A樣本÷?A標(biāo)準(zhǔn)÷W×F =32.0U/g 質(zhì)量。

2. 取0.01mL牛奶，加入0.99mL試劑一，即稀釋100倍后直接測定，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算?A樣本=A測定管-A空白管=0.059-0.052= 0.007，?A標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.450-0.052=0.398，按樣本質(zhì)量計算酶活得： XOD活性（U/mL）=12.5×?A樣本÷?A標(biāo)準(zhǔn)×F =22.0 U/mL。

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