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        • NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2025-04-22
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        中文名稱
        NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        NADH Oxidase(NOX) Activity Assay Kit
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC0635
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定原理: NOX能夠?qū)ADH氧化為NAD,NADH的氧化與2,6二氯酚靛藍(lán)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        NADH氧化酶
        (NOX)活性檢測試劑盒說明書

        微量法
        貨號(hào):BC0635
        規(guī)格:100T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        試劑一液體50 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二液體10 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑三液體1 mL×1支-20℃保存
        試劑四液體35 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑五液體5 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑六粉劑×2-20℃保存

        溶液的配制:
        試劑六:臨用前加入4.5 mL雙蒸水,用不完的試劑-20℃分裝保存。
        產(chǎn)品說明:
        NOX(EC 1.6.99.3)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可在氧氣存在下,直接將NADH氧化為NAD+。該酶不僅參與NAD+的再生,而且與免疫反應(yīng)密切相關(guān)。
        NOX能夠?qū)?span style="font-family: Times New Roman, Times, serif;">NADH氧化為NAD+,NADH的氧化與2,6二氯酚靛藍(lán)(DCPIP)的還原相偶聯(lián),藍(lán)色的DCPIP被還原為無色的DCPIP,在600nm下測定藍(lán)色DCPIP的還原速率計(jì)算出NADH氧化酶活性的大小。
        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        注意事項(xiàng):
        1、粗酶液的提取必須在0℃- 4℃中操作完成,以防止酶變性失活。
        2、比色皿中反應(yīng)液的溫度最好保持37℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
        3、最好兩個(gè)人同時(shí)做此實(shí)驗(yàn),一個(gè)人比色,一個(gè)人計(jì)時(shí),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
        4、實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑六樣本在冰上放置,以免變性和失活。
        5、因通過反應(yīng)速率計(jì)算酶活,使用96孔板時(shí)請(qǐng)根據(jù)操作速度控制一次測定的樣本數(shù)量。
        6、推薦使用樣本蛋白濃度計(jì)算酶活,若用樣本質(zhì)量計(jì)算,則需加測胞漿提取物酶活,上清和沉淀酶活之和方為總酶活。
        7、附:使用樣本質(zhì)量計(jì)算公式
        A、按微量玻璃比色皿計(jì)算:
        單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘A600變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
        NOX上清活性(U/g 質(zhì)量)=ΔA1÷0.01×V反總÷(W÷V提取×V)÷T=2525×ΔA1÷W
        NOX沉淀活性(U/g 質(zhì)量)=ΔA2÷0.01×V反總÷(W÷V樣總×V)÷T=505×ΔA2÷W
        NOX活性(U/g 質(zhì)量)= NOX上清+ NOX沉淀=2525×ΔA1÷W+505×ΔA2÷W
        ΔA1:上清測定值;ΔA2:沉淀測定值;V反總:反應(yīng)總體積,0.25mL;V樣:加入樣本體積,0.01mL;V提取:加入試劑一體積,1.01mL;V樣總:沉淀重懸體積,0.202mLW:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,1min。
        B、按96UV板計(jì)算:
        單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘A600變化0.005定義為一個(gè)酶活力單位。
        NOX上清活性(U/g 質(zhì)量)=ΔA1÷0.005×V反總÷(W÷V提取×V)÷T=5050×ΔA1÷W
        NOX沉淀活性(U/g 質(zhì)量)=ΔA2÷0.005×V反總÷(W÷V樣總×V)÷T=1010×ΔA2÷W
        NOX活性(U/g 質(zhì)量)= NOX上清+ NOX沉淀=5050×ΔA1÷W+1010×ΔA2÷W
        ΔA1:上清測定值;ΔA2:沉淀測定值;V反總:反應(yīng)總體積,0.25mL;V樣:加入樣本體積,0.01mL;V提取:加入提取液體積,1.01mL;V樣總:沉淀重懸體積,0.202mLW:樣本質(zhì)量,gT:反應(yīng)時(shí)間,1min
        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1g肺進(jìn)行樣本處理,按照測定步驟操作,用微量玻璃比色皿測得ΔA1=ΔA測定-ΔA對(duì)照=0.8136-0.118-0.9216-0.8079=0.5819,ΔA2=ΔA測定-ΔA對(duì)照=0.8546-0.4736-0.9539-0.9121=0.3392,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        NOX上清活性(U/g 質(zhì)量)=2525×ΔA1÷W=2525×0.5819÷0.1=14692.975
        NOX沉淀活性(U/g 質(zhì)量)=505×ΔA2÷W=505×0.3392÷0.1=1712.96
        NOX活性(U/g 質(zhì)量)=NOX上清+NOX沉淀=2525×ΔA1÷W +505×ΔA2÷W
        =2525×0.5819÷0.1+505×0.3392÷0.1=16405.935 U/g 質(zhì)量。

        1. 取0.1g葉片進(jìn)行樣本處理,按照測定步驟操作,用微量玻璃比色皿測得ΔA1=ΔA測定-ΔA對(duì)照=0.8518-0.7998-0.886-0.8831=0.0491ΔA2=ΔA測定-ΔA對(duì)照=0.872-0.8296-0.916-0.9149=0.0413,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        NOX上清活性(U/g 質(zhì)量)=2525×ΔA1÷W=2525×0.0491÷0.1=1239.775
        NOX沉淀活性(U/g 質(zhì)量)=505×ΔA2÷W=505×0.0413÷0.1=208.565
        NOX活性(U/g 質(zhì)量)=NOX上清+NOX沉淀=2525×ΔA1÷W +505×ΔA2÷W
        =2525×0.0491÷0.1+505×0.0413÷0.1=1448.34 U/g 質(zhì)量。
        相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

        1. Dou S, Liu S, Xu X, et al. Octanal inhibits spore germination of Penicillium digitatum involving membrane peroxidation[J]. Protoplasma, 2017, 254(4): 1539-1545.

        2. Liu P, Zhang H M, Hu K, et al. Sensory plasticity of carotid body is correlated with oxidative stress in paraventricular nucleus during chronic intermittent hypoxia[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(8): 13534-13543.

        3. Yongtao Du,Mengjie Zhao,Changtao Wang,et al. Identification and characterization of GmMYB118 responses to drought and salt stress. BMC Plant Biology. December 2018;(IF3.67)



         

        1. Youqiang Xu,Chunyan Xu,Xiuting Li,et al. A combinational optimization method for efficient synthesis of tetrame thylpyrazine by the recombinant Escherichia coli. Biochemical Engineering Journal. January 2018;(IF3.371)

        2. Weida Li,Kai Wang,Nanfang Jiang,et al. Antioxidant and antihyperlipidemic activities of purified polysaccharides from Ulva pertusa. Journal of Applied Phycology. April 2018;(IF4.784)

        參考文獻(xiàn):

        1. Kawai S, Mori S, Mukai T, et al. Cytosolic NADP phosphatases I and II from Arthrobacter sp. strain KM: implication in regulation of NAD+/NADP+ balance[J]. Journal of Basic Microbiology: An International Journal on Biochemistry, Physiology, Genetics, Morphology, and Ecology of Microorganisms, 2004, 44(3): 185-196.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0310/BC0315 輔酶Ⅰ NADH)含量檢測試劑盒
        BC1030/BC1035 NAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒
        BC1040/BC1045 NAD-蘋果酸脫氫酶(NAD-MDH)活性檢測試劑盒

        NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 微量法 NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 微量法 

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