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        • 胞漿異檸檬酸脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
        產品名稱:

        胞漿異檸檬酸脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法

        產品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2025-04-22
        儲存條件
        2-8℃
        中文名稱
        胞漿異檸檬酸脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        推薦
        若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
        英文名稱
        Isocitrate Dehydrogenase Cytoplasmic(ICDHc) Activity Assay Kit
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)

        產品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC0405
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定意義:ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)應用領域環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁,綜合


        胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)活性檢測試劑盒說明書
        微量法
        貨號:BC0405
        規(guī)格:100T/96S
        產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體120 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一粉劑×12-8℃保存
        試劑二粉劑×12-8℃保存
        試劑三粉劑×12-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑一:用時加入20 mL提取液溶解;

        2. 試劑二:用時每支加275 μL雙蒸水充分溶解備用;

        3. 試劑三:用時每支加275 μL雙蒸水充分溶解備用;

        4. 工作液配制:將試劑一、試劑二、試劑三按85:11的比例混合,現(xiàn)用現(xiàn)配。

        產品說明:
        ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細胞質中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源,在逆境中該酶活性通常會發(fā)生顯著變化。
        利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應,在340nm下測定NADPH濃度的增加,即可反映ICDHc活性。
        注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        紫外分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
        注意事項:

        1. 若A2-A1大于0.5,需將酶液用提取液稀釋,使A2-A1小于0.5,可提高檢測靈敏度。若初始值A1大于0.5可嘗試將酶液用提取液稀釋。

        2. 實驗時,試劑二、試劑三和樣本在冰上放置,以免變性和失活;工作液37℃水浴放置。

        3. 比色皿中反應液的溫度必須保持37℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。

        4. 最好兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結果的準確性。

        實驗實例:

        1. 取0.1g稗草,加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,然后8000g 4℃離心10min,取上清,之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計算ΔA=A2-A1=0.2285-0.2139=0.0146,按樣本質量計算酶活得:

        ICDHc活性(U/g 質量)=1608×ΔA÷W=234.768 U/g 質量。

        1. 0.1g小鼠腎組織,加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,然后8000g 4℃離心10min,取上清稀釋10,之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計算ΔA=A2-A1=0.5989-0.1263=0.4726,按樣本質量計算酶活得:

        ICDHc活性(U/g 質量)=1608×ΔA÷W×10=75994.08 U/g 質量。
        參考文獻:

        1. Miake F, TORIKATA T, KOGA K, et al. Isolation and characterization of NADP+-specific isocitrate dehydrogenase from the pupa of Bombyx mori[J]. The Journal of Biochemistry, 1977, 82(2): 449-454.

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