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        • 組織及血液酸性磷酸酶活性測(cè)試盒 微量法
        • 組織及血液酸性磷酸酶活性測(cè)試盒 微量法
        產(chǎn)品名稱(chēng):

        組織及血液酸性磷酸酶活性測(cè)試盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠(chǎng)商性質(zhì): 生產(chǎn)廠(chǎng)家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-11
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱(chēng)
        組織及血液酸性磷酸酶活性測(cè)試盒 微量法
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱(chēng)
        Acid Phosphatase(ACP) Activity Assay Kit
        別名
        檸檬酸含量測(cè)定試劑盒 CA Kit 檸檬酸(CA)含量測(cè)定試劑盒 檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒
        檢測(cè)方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/4

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢(xún)
        分子式詳詢(xún)純度詳詢(xún)
        分子量詳詢(xún)貨號(hào)BC2135
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測(cè)定意義:ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱(chēng)無(wú)機(jī)磷酸,常見(jiàn)于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        組織及血
        液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

        微量法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
        貨號(hào):BC2135
        規(guī)格:100T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱(chēng)規(guī)格保存條件
        提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體5 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二液體5 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑三液體15 mL×1瓶2-8℃保存
        標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存

        溶液的配制:
        1、標(biāo)準(zhǔn)品:10μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,臨用前蒸餾水稀釋至0.625μmol/mL備用(可以吸取20μL 10 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液和300μL蒸餾水混合備用),稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)液2-8℃保存一周。
        產(chǎn)品說(shuō)明:
        ACP(Acid Phosphatase)在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱(chēng)無(wú)機(jī)磷酸,常見(jiàn)于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
        在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯*,苯*與4-氨基安*比林和鐵*反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過(guò)測(cè)定510nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算ACP活性。
        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        需自備的儀器和用品:
        可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        操作步驟:
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
        組織樣本:稱(chēng)取約0.1g組織,加提取液1mL充分研磨,4℃,10000rpm離心10min,取上清液待測(cè)。
        血漿(血清):血液可直接用于測(cè)定,如果濃度高的話(huà),用提取液稀釋。
        二、測(cè)定步驟
        1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。
        2、試劑一置于37℃水浴中預(yù)熱30min以上。
        3、操作表:

         

        試劑名稱(chēng)(μL測(cè)定管對(duì)照管空白管標(biāo)準(zhǔn)管
        蒸餾水--20-
        標(biāo)準(zhǔn)品---20
        上清液20---
        試劑一40404040
        試劑二40404040
        混勻后置于37℃中保溫15min
        試劑三120120120120
        上清液-20--
        混勻后于510nm測(cè)定吸光度,分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管??瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)管只需做1-2

        三、ACP活性計(jì)算
        1、按蛋白濃度計(jì)算
        活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 μmol酚為一個(gè)酶活力單位。
        ACP酶活 (U/mg prot)=[C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V]÷(Cpr×V)÷T
                              =0.0417× (A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷Cpr
        2、按樣本質(zhì)量計(jì)算
        活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1 μmol酚為一個(gè)酶活力單位。
        ACP 酶活 (U/g 質(zhì)量)=[C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V] ÷(W÷V提取×V)÷T
                              =0.0417×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
        3、按血液體積計(jì)算
        活性單位定義:37℃中每毫升血液每分鐘催化產(chǎn)生1μmol酚為一個(gè)酶活力單位。
        ACP酶活 (U/mL)=[C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V] ÷V÷T
                           =0.0417×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
        C標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度,0.625μmol/mLV樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,0.02mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;T:反應(yīng)時(shí)間,15min;V提?。杭尤胩崛∫后w積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g。
        注意事項(xiàng):
        1、 試劑一、試劑二和試劑三均需避光保存。
        2、 試劑三變藍(lán)綠色后不能再使用。
        3、 加入試劑三后必須立即混勻,否則顯色不全。
        4、 ACP不穩(wěn)定,尤其在37℃pH大于7的條件下活力喪失快,因此酸性磷酸酶樣本一般需當(dāng)天準(zhǔn)備;血清樣本中,每毫升血清中加入10mg檸檬酸氫二鈉或者5mg硫 酸氫鈉,使pH降至6.5以下,或5mL血清加入30% 醋 酸溶液23滴,置于4℃可保存1周。
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC2020/ BC2025 乙酰膽*酯酶(AchE)活性檢測(cè)試劑盒
        BC2140/ BC2145 組織及血液堿性磷酸酶(AKP/ALP)活性檢測(cè)試劑盒

        組織及血液酸性磷酸酶活性測(cè)試盒 微量法 組織及血液酸性磷酸酶活性測(cè)試盒 微量法

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