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        • 胃*白酶活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        胃*白酶活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-11
        儲存條件
        2-8℃
        中文名稱
        胃*白酶活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        推薦
        若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
        英文名稱
        Pepsase Activity Assay Kit
        別名
        胃*白酶試劑盒 胃*白酶測試盒
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC2325
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定意義:胃*白酶由胃粘膜主細胞分泌,分解食物中蛋白質(zhì)成小肽段。一般用于神經(jīng)性低應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        胃*白酶活性檢測
        試劑盒說明書

        微量法
        貨號:BC2325
        規(guī)格:100T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        溶液的配制:

        1. 試劑一:臨用前加入10 mL試劑二,充分溶解;

        2. 試劑三:臨用前加入10 mL蒸餾水,充分溶解。

        產(chǎn)品說明:
        胃*白酶由胃粘膜主細胞分泌,分解食物中蛋白質(zhì)成小肽段。一般用于神經(jīng)性低酸癥的鑒別,慢性胃炎、慢性胃擴張、慢性十二指腸炎等癥狀時也會引起胃*白酶分泌的減少。
        胃*白酶可催化血紅蛋白水解,水解產(chǎn)物*氨酸在275nm下有特征吸收峰。通過測定吸光值的變化來計算酶活。
        需自備的儀器和用品:
        紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96UV板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
        稱取約0.1g組織加入1mL提取液進行冰浴勻漿或者0.1mL胃液加入0.9mL提取液。10000rpm 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。
        二、測定步驟

        1. 分光光度計/酶標儀預熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長至275nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 操作表:

        試劑名稱(μL測定管對照管
        樣本20-
        試劑一100100
        混勻,37℃保溫10min。
        試劑三100100

         

        搖勻1min。
        樣本-20
        混勻后10000rpm 4℃ 離心10min,取上清用微量石英比色皿/96UV板測定A275nm。計算?A=A測定-A對照。

        注意:對照管后加樣本,而測定管先加樣本

        • 胃*白酶活性計算

          1. 用微量石英比色皿

        1、按樣本蛋白濃度計算
        活性單位定義:37℃下每毫克蛋白每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個酶活單位。
        胃*白酶酶活(U/mg prot)=?A÷ε÷d×V反總)÷Cpr×V樣本)÷T=0.786×?A÷Cpr
        2、按樣本質(zhì)量計算
        活性單位定義:37℃下每克組織每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個酶活單位。
        胃*白酶酶活(U/g 質(zhì)量)=?A÷ε÷d×V反總)÷W×V樣本÷V提)÷T=0.786×?A÷W
        3、按液體體積計算
        活性單位定義:37℃下每毫升液體每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個酶活單位。
        胃*白酶酶活(U/mL)=?A÷ε÷d×V反總)÷V樣本÷V×V液)÷T= 7.86×?A
        Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),需要另外測定;W:樣本質(zhì)量,g;V反總:反應(yīng)總體積,0.22mL;V提:粗酶液總體積,1mL;T:催化反應(yīng)時間,10min;V樣本:加入樣本體積,0.02mL;V液:液體體積,0.1mLε:*氨酸吸光系數(shù),1.4μmol-1·mL·cm-1;d:光程,1cm。
        B、用96UV
        1、按樣本蛋白濃度計算
        活性單位定義:37℃下每毫克蛋白每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個酶活單位。
        胃*白酶酶活(U/mg prot)=?A÷ε÷d×V反總)÷Cpr×V樣本)÷T = 1.31×?A÷Cpr
        2、按樣本質(zhì)量計算
        活性單位定義:37℃下每克組織每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個酶活單位。
        胃*白酶酶活(U/g 質(zhì)量)=?A÷ε÷d×V反總)÷W×V樣本÷V提)÷T =1.31×?A÷W
        3、按液體體積計算
        活性單位定義:37℃下每毫升液體每分鐘催化血紅蛋白水解生成1μmol*氨酸為一個酶活單位。
        胃*白酶酶活(U/mL)=?A÷ε÷d×V反總)÷V樣本÷V×V液)÷T =13.1×?A
        Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),需要另外測定;W:樣本質(zhì)量,g;V反總:反應(yīng)總體積,0.22mLV提:粗酶液總體積,1mL;T:催化反應(yīng)時間,10min;V樣本:加入樣本體積,0.02mLV液:液體體積,0.1mL;ε:*氨酸吸光系數(shù),1.4μmol-1·mL·cm-1;d:光程,0.6cm。
        實驗實例:

        1. 取0.1g小鼠胃加入1mL提取液充分研磨,10000rpm 4℃離心10分鐘,取上清稀釋2,置冰上,按照測定步驟操作,使用微量石英比色皿測得計算?A=A測定-A對照=1.3345-1.2195=0.115,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

        胃*白酶酶活(U/g 質(zhì)量)=0.786×?A÷W×2(稀釋倍數(shù))=1.808 U/g 質(zhì)量。
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC2280/BC2285 酸性蛋白酶(ACP)活性檢測試劑盒
        BC2290/BC2295 中性*白酶(NP)活性檢測試劑

        胃*白酶活性檢測試劑盒 微量法 胃*白酶活性檢測試劑盒 微量法

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