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        • ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測(cè)試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測(cè)試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-11
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測(cè)試劑盒 微量法
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Acyltransferase(AAT) Activity Assay Kit
        別名
        ?;D(zhuǎn)移酶試劑盒 AAT Kit 酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)試劑盒 ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒
        檢測(cè)方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/96S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC2355
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測(cè)定意義:AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種酰基化和去?;?/td>應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測(cè)試劑盒說明書
        微量法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號(hào):BC2355
        規(guī)格:100T/96S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體110 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體15 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×2-20℃保存
        試劑三液體3 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑四液體1.5 mL×1支2-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 提取液:內(nèi)含不溶物,使用前搖勻。

        2. 試劑二:臨用前取一支試劑二加1 mL蒸餾水充分溶解,未用完的試劑2-8℃可以保存2周。(為了延長(zhǎng)使用時(shí)間,因此多給一支試劑二)

        產(chǎn)品說明:
        AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?;腿ヵ;磻?yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。
        AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙?;蕉〈?,同時(shí)還原DTNB生成TNBTNB412nm有吸收峰,測(cè)定412 nm吸光度增加速率,來計(jì)算AAT活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
        1、組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行浴勻漿。4℃,15000 g離心20min,上清液待測(cè)
        2、血清(漿)樣本:直接檢測(cè)。(若液體有渾濁則離心后進(jìn)行測(cè)定)
        二、測(cè)定步驟

        1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至412nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 試劑一在37℃水浴保溫20 min以上。

        3. 樣本測(cè)定:

        試劑名稱(μL空白管測(cè)定管
        蒸餾水20-
        上清液/血清-20
        試劑一(預(yù)熱)140140
        試劑二1010
        試劑三2020
        試劑四1010

        將上述試劑按順序加入微量石英比色皿/96孔板中,加試劑四的同時(shí)開始計(jì)時(shí),在412nm波長(zhǎng)下記錄10s時(shí)的初始吸光度A1130s后的吸光值A2,計(jì)算ΔA=A2-A1空;ΔA測(cè)=A2測(cè)-A1測(cè),ΔA=ΔA測(cè)-ΔA空。空白管只需做1-2次。

        注意事項(xiàng):

        1. 上清液蛋白質(zhì)含量需要另外測(cè)定。

        2. 當(dāng)吸光值大于1時(shí),建議稀釋后測(cè)量。

        3. 建議一個(gè)一個(gè)樣本測(cè)定,一人比色一人計(jì)時(shí)。

        4. 如果ΔA測(cè)小于0.01,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,如測(cè)定10 s310 s的吸光度,相應(yīng)修改計(jì)算公式中反應(yīng)時(shí)間。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1g腎臟加入1mL提取液進(jìn)行樣本處理,取上清后稀釋4倍后按測(cè)定步驟操作,用微量石英比色皿測(cè)得ΔA=A2-A1=0.0849-0.08=0.0049、ΔA測(cè)=A2測(cè)-A1測(cè)=0.69-0.4929=0.1971、ΔA=ΔA測(cè)-ΔA=0.1971-0.0049 =0.1922,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:AAT (U/g 質(zhì)量) =5000×ΔA÷W×4(稀釋倍數(shù))=38440 U/g 質(zhì)量。

        2. 取兔血清直接按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得ΔA=A2-A1=0.0849-0.08=0.0049、ΔA測(cè)=A2測(cè)-A1測(cè)=0.629-0.5342 =0.0948、ΔA=ΔA測(cè)-ΔA=0.0948-0.0049=0.0899,按血清體積計(jì)算酶活得:AAT (U/mL 血清) =5000×ΔA=5000×0.0899=449.5 U/mL 血清。

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0590/BC0595  游離脂肪酸(FFA)含量檢測(cè)試劑盒
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        BC0320/BC0325  植物中脂氧合酶(LOX)活性檢測(cè)試劑盒

        酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測(cè)試劑盒 微量法 ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測(cè)試劑盒 微量法


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