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        • α-葡萄糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        α-葡萄糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-11
        儲存條件
        -20℃
        中文名稱
        α-葡萄糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        英文名稱
        α-glucosidase(α-GC) Activity Assay Kit
        別名
        α-葡萄糖苷酶試劑盒 α-GC Kit α-葡萄糖苷酶(α-GC)試劑盒 α-葡萄糖苷酶(α - GC)測試盒
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC2555
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定意義:α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        α-葡萄糖苷酶(α-GC)活性檢測試劑盒說明書
        微量法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號:BC2555
        規(guī)格:100T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一粉劑×2-20℃保存
        試劑二液體15 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑三液體15 mL×1瓶2-8℃保存
        標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存

        溶液的配制:
        1、試劑一:臨用前取1瓶加入6 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑建議-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;
        2、標(biāo)準(zhǔn)品:5 μmol/mL的對*溶液。
        產(chǎn)品說明:
        α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖,不僅與細(xì)胞壁的松弛或加固有關(guān),而且與細(xì)胞識別和一些信號分子產(chǎn)生密切相關(guān)。
        α-GC分解對-硝 基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成對-*,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GC活性。


        注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、超聲破碎儀、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
        1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的處理:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每1000萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200W,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),15000g,4℃,離心20min,取上清,置冰上待測。
        2、組織的處理:稱取約0.2g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;15000g4℃,離心20min,取上清,置冰上待測。
        3、液體樣本:直接檢測。若溶液有渾濁需離心后取上清進(jìn)行測定。
        二、測定步驟

        1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至400nm,分光光度計蒸餾水調(diào)零。

        2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:將5μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋成100、50、25、12.56.25、0 nmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測。

        3. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:

        序號稀釋前濃度(nmol/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(nmol/mL)
        150001004001000
        210002001800100
        31001000100050
        4501000100025
        5251000100012.5
        612.5100010006.25
        76.25010000(空白管)

        備注:實驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需70µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        1. 加樣表

        試劑名稱(μL測定管對照管標(biāo)準(zhǔn)管
        試劑一100

        試劑二150150
        樣本 3030
        充分混勻,放入37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中準(zhǔn)確反應(yīng)30min后,立即放入沸水浴中煮沸5min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變)
        試劑一
        100
        充分混勻,8000g,4℃,離心5min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列試劑)
        上清液7070
        標(biāo)準(zhǔn)液

        70
        試劑三130130130
        充分混勻,室溫靜置2min后,于400nm處測定吸光值A,分別記為A測定管、A對照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管。ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個測定管需設(shè)一個對照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測1-2次。



        參考文獻(xiàn):
        [1] Wang S Y, Camp M J, Ehlenfeldt M K. Antioxidant capacity and α-glucosidase inhibitory activity in peel and flesh of blueberry (Vaccinium spp.) cult ivars[J]. Food Chemistry, 2012, 132(4): 1759-1768.
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0340/BC0345  糖原含量檢測試劑盒
        BC0360/BC0365  β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性檢測試劑盒
        BC2510/BC2515  海藻糖酶(THL)活性檢測試劑盒

        α-葡萄糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法 α-葡萄糖苷酶活性檢測試劑盒 微量法

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