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        • α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-11
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        中文名稱
        α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        α-galactosidase(α-GAL) Activity Assay Kit
        別名
        α-半乳糖苷酶試劑盒 α-GAL Kit α-半乳糖苷酶(α-GAL)試劑盒 α-半乳糖苷酶(α-GAL)測(cè)試盒
        檢測(cè)方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reade

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC2575
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測(cè)定意義:α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        α-半乳糖苷酶(α-GAL)活性檢測(cè)試劑盒說明書
        微量法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號(hào):BC2575
        規(guī)格:100T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一粉劑×2-20℃保存
        試劑二液體4 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑三液體15 mL×1瓶2-8℃保存
        標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存
        溶液的配制:
        1、試劑一:臨用前取1支加入1.25 mL蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融(1瓶粉劑溶解后可做100T,為了延長使用時(shí)間,此產(chǎn)品多給1瓶粉劑);
        2、標(biāo)準(zhǔn)品:5 μmol/mL的對(duì)硝基 苯*溶液。
        產(chǎn)品說明:
        α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,能專一地催化α-半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對(duì)于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要,種子萌發(fā)初期,其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗,為種子的萌發(fā)提供最初的能量來源,后期則主要參與細(xì)胞壁儲(chǔ)藏多糖水解。
        α-GAL分解對(duì)-硝基 苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對(duì)-硝基 苯*,后者在400nm有最大吸收峰,通過測(cè)定吸光值升高速率來計(jì)算α-GAL活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、超聲破碎儀、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
        1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的處理:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),15000g,4℃,離心20min,取上清,置冰上待測(cè)。
        2組織的處理:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;15000g,4℃,離心20min,取上清,置冰上待測(cè)。
         
        • 測(cè)定步驟

        1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至400nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

        2. 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:將標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至200、100、50、2512.5、6.250nmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。

        3. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:

        序號(hào)稀釋前濃度(nmol/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(nmol/mL)
        15000801920200
        220010001000100
        31001000100050
        4501000100025
        5251000100012.5
        612.5100010006.25
        76.25010000(空白管)
        備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需70µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
        1. 樣本測(cè)定(在EP管或96孔板中依次加入下列試劑):

        試劑名稱(μL測(cè)定管對(duì)照管標(biāo)準(zhǔn)管
        試劑一25--
        蒸餾水-25-
        試劑二3535-
        樣本 1010-
        迅速混勻,放入37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中準(zhǔn)確反應(yīng)30min
        標(biāo)準(zhǔn)品--70
        試劑三130130130
        充分混勻,室溫靜置2min后,于400nm處測(cè)定吸光值A,分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)1-2。

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0340/BC0345  糖原含量檢測(cè)試劑盒
        BC0360/BC0365  β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性檢測(cè)試劑盒
        BC2510/BC2515  海藻糖酶(THL)活性檢測(cè)試劑盒

        α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法 α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

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