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        • 濾紙酶檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        濾紙酶檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-11
        儲存條件
        2-8℃
        中文名稱
        濾紙酶檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        英文名稱
        Filter Paper Activity(FPA) Activity Assay Kit
        別名
        濾紙酶試劑盒 濾紙酶測試盒
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC2655
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定意義:纖維素酶是由微生物產(chǎn)生的多組分的酶系,能水解纖維素β-1,4葡萄糖苷鍵應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        濾紙酶(FPA)活性檢測試劑盒
        說明書

        微量法
        貨號:BC2655
        規(guī)格:100T/48S
        產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        試劑一液體35 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二液體60 mL×1瓶2-8℃保存
        濾紙條25 mg×100條常溫保存
        標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 濾紙條:常溫防潮保存。

        2. 標(biāo)準(zhǔn)品:10mg無水*萄糖。臨用前加入1 mL蒸餾水溶解,配成10 mg/mL 葡萄糖溶液備用,2-8℃保存兩周。

        產(chǎn)品說明:
        纖維素酶是降解纖維素生成葡萄糖一類酶的總稱,它不是單體酶,而是起協(xié)同作用的多組分酶系。以不溶性纖維素如濾紙為底物測定的纖維素酶稱為濾紙酶,研究濾紙酶活力對纖維素酶總體酶活力的研究的有著重要意義。
        FPA水解濾紙產(chǎn)生還原糖,還原糖與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng)生成在540 nm有特征吸收峰的棕紅色物質(zhì),通過測定540 nm處吸光值變化可計算得FPA活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式低溫離心機(jī)、水浴鍋、超聲破碎儀、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水、EP管(2 mL)。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        三、FPA活性計算

        1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

        2. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(x,mg/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(y,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測定(y,ΔA測定)帶入公式計算樣本濃度(x,mg/mL。

        3. FPA活性的計算:

        (1)按蛋白濃度計算
        酶活定義:每mg蛋白每分鐘分解濾紙產(chǎn)生1 mg葡萄糖為1個酶活力單位。
        FPA酶活(U/mg prot=x×V提取÷V提取×Cpr÷T=0.0333x÷Cpr
        (2)按樣本質(zhì)量計算
        酶活定義:每g樣品每分鐘分解濾紙產(chǎn)生1 mg葡萄糖為1個酶活力單位。
        FPA酶活(U/g 質(zhì)量)=x×V提取÷W÷T=0.0333x÷W
        (3)按照細(xì)胞或細(xì)菌數(shù)量計算
        酶活定義:每104個細(xì)胞每分鐘分解濾紙產(chǎn)生1 mg葡萄糖為1個酶活力單位。
        FPA酶活(U/104 cell)=x×V提取÷細(xì)胞數(shù)量(萬個)÷T=0.0333x÷細(xì)胞數(shù)量(萬個)
        (4)按液體體積計算
        酶活定義:每mL樣本每分鐘分解濾紙產(chǎn)生1 mg葡萄糖為1個酶活力單位。
        FPA酶活(U/mL=x×V÷V÷T=0.0333x
        V提?。禾崛∫海ㄕ麴s水)體積,1 mL;V樣:加入的樣本體積,0.1 mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL,蛋白濃度自行測定;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,30 min。
        注意事項:

        1. 用干凈的鑷子取出濾紙條,帶手套將濾紙條卷成小卷放入Ep管底部。

        2. 當(dāng)A或ΔA超過1時,建議將樣本用蒸餾水稀釋后再進(jìn)行測定,計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

        3. 顯色結(jié)束吸取檢測液時注意槍頭不要碰到濾紙條,以免帶入毛狀物,影響測定結(jié)果。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1g平菇傘部加入1mL蒸餾水,冰浴勻漿后于4℃,12000 rpm離心10 min,取上清置于冰上待測。之后按照測定步驟操作,使用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.744-0.536=0.208,帶入測得標(biāo)準(zhǔn)曲線y=1.0495x-0.1471,計算x=0.3384,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

        FPA酶活(U/g質(zhì)量)=x×V提取÷W÷T=0.0333x÷W=0.113 U/g質(zhì)量。
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC2450/BC2455 植物組織果糖(FT)含量檢測試劑盒
        BC2540/BC2545 纖維素酶(CL)活性檢測試劑盒
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         濾紙酶檢測試劑盒 微量法 濾紙酶檢測試劑盒 微量法


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