血清總鐵結(jié)合能力（TIBC）檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC2865
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑四：臨用前根據(jù)用量將A液和B液按1:1混合；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加0.9mL蒸餾水溶解，得到40μmol/mL FeSO₄溶液，2-8℃保存8周。

產(chǎn)品說明：
血清總鐵結(jié)合能力指血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵的能力，其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。
Fe²⁺與菲洛嗪反應(yīng)形成紫紅色化合物，在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下，血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可以與Fe³⁺結(jié)合，剩余未結(jié)合的Fe³⁺可以被還原成Fe²⁺，此時吸光度A1與未結(jié)合Fe³⁺數(shù)量正相關(guān)；酸化后，轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的Fe³⁺釋放，并且進一步被還原成Fe²⁺，此時吸光度A2與總Fe³⁺數(shù)量正相關(guān)。A2減A1與TIBC呈正比。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：第一次測量的檢出限為0.00098 μmol/mL；第二次測量的檢出限為0.0012 μmol/mL。
線性范圍：第一次測量的線性范圍為1.95×10^-3-0.5 μmol/mL；第二次測量的線性范圍為1.95×10^-3-0.5 μmol/mL。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、EP管、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：
1. A1測小于0.1時，建議將樣本用蒸餾水適當(dāng)稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
2. 試劑二、試劑四有一定的毒性，操作時請做好防護措施。
實驗實例：

1. 取40μL用蒸餾水稀釋2倍的駱駝血清，按照測定步驟操作，測得計算ΔA1測=A1測-A1空=0.342，ΔA1標(biāo)=A1標(biāo)-A1空=0.746，ΔA2測=A2測-A2空=0.735，ΔA2標(biāo)=A2標(biāo)-A2空=0.550，計算總鐵結(jié)合能力得：

總鐵結(jié)合能力TIBC（μmol/L）=500×（ΔA2測÷ΔA2標(biāo)-ΔA1測÷ΔA1標(biāo)）×2=877.919 μmol/L。

1. 取40μL用蒸餾水稀釋2倍的鵝血清，按照測定步驟操作，測得計算ΔA1測=A1測-A1空=0.191，ΔA1標(biāo)=A1標(biāo)-A1空=0.746，ΔA2測=A2測-A2空=0.732，ΔA2標(biāo)=A2標(biāo)-A2空=0.550，計算總鐵結(jié)合能力得：

總鐵結(jié)合能力TIBC（μmol/L）=500×（ΔA2測÷ΔA2標(biāo)-ΔA1測÷ΔA1標(biāo)）×2=1074.877 μmol/L。
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