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        • UDPG焦磷酸化酶檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        UDPG焦磷酸化酶檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-11
        儲存條件
        -20℃
        中文名稱
        UDPG焦磷酸化酶檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        推薦
        若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
        英文名稱
        UDP-glucose pyrophosphosphprylase(UGP) Activity Assay Kit
        別名
        UDPG焦磷酸化酶試劑盒 UGP Kit UDPG焦磷酸化酶(UPG)試劑盒 UDPG焦磷酸化酶(UPG

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC3365-100T/96S
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定意義:UDPG焦磷酸化酶是生物體糖原合成過程中的關(guān)鍵酶。在葡萄糖合成糖原前催應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        UDPG焦磷酸化酶(UGP)活性檢測試劑盒說明書
        微量法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號: BC3365
        規(guī)格: 100T/96S
        產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體110 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一粉劑×1-20℃保存
        試劑二粉劑×22-8℃保存
        試劑三粉劑×1-20℃保存
        試劑四粉劑×2支-20℃保存
        試劑五液體2.5 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑六液體5 mL×1瓶2-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑一:臨用前加15 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存可保存4,禁止反復(fù)凍融。

        2. 試劑二:臨用前加1.25 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后2-8℃保存2周。

        3. 試劑三:臨用前加0.7mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存4周,禁止反復(fù)凍融。

        4. 試劑四:臨用前每支加1 mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存2周,禁止反復(fù)凍融。

        5. 工作液的配制:將試劑一:試劑二:試劑三:試劑四:試劑五:試劑六按體積比=600:1002040100250混合,現(xiàn)用現(xiàn)配。

        產(chǎn)品說明:
        尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-glucose pyrophosphosphprylase,UGP,EC 2.7.7.9)在自然界廣泛分布。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化,將1-磷酸葡萄糖與UTP分子合成為UDP-葡萄糖(UDPG),UDPG是高等植物和動物中主要活化酶的形式,作為葡萄糖基供體參與糖原、蔗糖、纖維素等的合成代謝。

        UGP可逆的催化生成1-磷酸葡萄糖,其在磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下將NADP轉(zhuǎn)化為NADPH,UGP活性可以用340nm的吸光值的變化來反應(yīng)。  



        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、微量石英比色皿/96UV板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

        • 樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

         

        1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

        2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

        3. 血清等液體:直接檢測。

        二、測定步驟

        1. 紫外分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 操作表:

        試劑名稱空白管測定管
        樣本(µL)-20
        工作液(µL)180180
        蒸餾水(µL)20-
        在微量石英比色皿/96孔UV板中分別加入上述試劑,充分混勻后于340nm處測定10s時的吸光值A1,迅速置于37水浴鍋或者培養(yǎng)箱5min(酶標(biāo)儀有控溫功能的可將溫度調(diào)至37),拿出迅速擦干測定310s時的吸光值A2,計算ΔA測定管= A2測定-A1測定,ΔA空白管=A2空白-A1空白,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管(空白管只需做1-2次)。


        注意事項(xiàng):

        1. 空白管為檢測各試劑組分質(zhì)量的檢測孔,正常情況下,變化不超過0.01。

        2. A大于0.6或者A2測定大于1.5時,建議將樣本稀釋后再進(jìn)行測定。當(dāng)ΔA小于0.01時,可以延長反應(yīng)時間(5min10min)來測定。

        UDPG焦磷酸化酶檢測試劑盒 微量法 UDPG焦磷酸化酶檢測試劑盒 微量法

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