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品牌	SOLARBIO/索萊寶	CAS	詳詢
分子式	詳詢	純度	詳詢
分子量	詳詢	貨號(hào)	BC0135
規(guī)格	100T/48S	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關(guān)鍵酶之一,能夠水解蔗糖變	應(yīng)用領(lǐng)域	環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

植物蔗糖酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號(hào): BC0135
規(guī)格: 100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體2 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1支	2-8℃保存
試劑三	液體4 mL×1瓶	常溫保存
標(biāo)準(zhǔn)品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：用時(shí)加入1 mL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑 2-8℃保存一周；
標(biāo)準(zhǔn)品：用時(shí)加入1 mL蒸餾水充分溶解，制備10 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液待用；用不完的試劑2-8℃保存一周。

產(chǎn)品說明：
蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關(guān)鍵酶之一，能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收。
本試劑盒采用3,5-二硝基水楊酸法測定蔗糖酶催化產(chǎn)生的還原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3,5-二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)還原糖的量和反應(yīng)液的顏色深度成正比。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
二、測定步驟
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、標(biāo)準(zhǔn)品的制備：
將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至2.5、2、1.5、1、0.8、0.6、0.4、0.2、0mg/mL（0mg/mL為空白管）。
3、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）：

試劑名稱（μL）	對(duì)照管	測定管	標(biāo)準(zhǔn)管
試劑一	15	15	15
蒸餾水	15	-	-

樣本	30	30	-
標(biāo)準(zhǔn)品	-	-	30
試劑二	-	15	15
置于25℃準(zhǔn)確水浴 10min
試劑三	30	30	30
混勻，100℃水浴 10min 左右（蓋緊，防止水分散失），冷卻至室溫
蒸餾水	210	210	210

混勻，取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中測定各管540nm吸光值，ΔA=A 測定管-A對(duì)照管。（每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管）

注意事項(xiàng)：
當(dāng)A大于1.2時(shí)，建議將樣本用提取液稀釋后進(jìn)行測定。
參考文獻(xiàn)：

Karley A J, Ashford D A, Minto L M, et al. The significance of gut sucrase activity for osmoregulation in the pea aphid, Acyrthosiphon pisum[J]. Journal of insect physiology, 2005, 51(12): 1313-1319.

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