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        • 土壤谷氨*胺酶活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        土壤谷氨*胺酶活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-12
        儲存條件
        2-8℃
        土壤谷氨*胺酶活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        英文名稱
        Soil Glutaminase(S-GLS) Activity Assay Kit
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/48S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC3975
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) 活性檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        土壤谷氨*胺酶(S-GLS)活性檢測試劑盒說明書
        微量法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號:BC3975
        規(guī)格:100T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        試劑一液體30mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×22-8℃保存
        試劑三A液體0.4mL×1支2-8℃保存
        試劑三B液體1.6mL×1瓶2-8℃保存
        試劑四液體2mL×1瓶常溫保存
        標(biāo)準(zhǔn)品液體1mL×1支2-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑二:臨用前取1瓶加入6mL蒸餾水溶解,用不完的試劑2-8℃保存一周;

        2. 試劑三:臨用前根據(jù)樣本量按比例(A:B=1:4)配制,現(xiàn)配現(xiàn)用;若發(fā)現(xiàn)變色后則不能再使用;

        3. 標(biāo)準(zhǔn)品:10µmol/mL氮標(biāo)準(zhǔn)液。取15μL 10µmol/mL氮標(biāo)準(zhǔn)液,加入945μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.156μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液待測。(實(shí)驗(yàn)中每管需要80μL,為減小實(shí)驗(yàn)誤差,故配制大體積。)

        產(chǎn)品說明:
        S-GLS(EC3.5.1.2)存在于某些細(xì)菌以及植物根中,催化谷氨*胺水解成谷*酸和氨,在氮素代謝中具有重要調(diào)控作用,尤其是調(diào)節(jié)游離氨含量和尿素代謝。

        S-GLS催化谷氨*胺水解成L-谷*酸和氨,利用靛酚藍(lán)比色法測定氨增加的速率,即可計(jì)算其酶活性。
        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、30~50目篩、研缽、甲苯(不允許快遞)、冰和蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
        新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
        二、測定步驟

        1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至630nm,分光光度計(jì)用蒸餾水調(diào)零。

        2. 樣本測定(在EP管中加入下列試劑)

        試劑名稱測定管對照管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
        風(fēng)干土樣(g)0.050.05--
        甲苯(μL2525--
        充分震蕩后常溫靜置10min。--
        試劑一(μL275275--
        試劑二(μL200---
        蒸餾水-200-80
        充分混勻,37℃水浴或恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)1h。10000g常溫離心10 min,取上清液于96孔板或者1.5mL EP 管中。--
        上清液8080--
        0.156μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液--80-
        試劑三16161616
        試劑四12121212
        蒸餾水92929292

        混勻,室溫放置30min,630nm處讀取吸光值A,分別記為A測定管、A對照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管,計(jì)算ΔA測定=A測定管-A對照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。標(biāo)準(zhǔn)管與空白管只需測1-2次。

        注意事項(xiàng):

        1. 當(dāng)測定吸光值大于0.8時(shí),建議將上清液用蒸餾水進(jìn)一步稀釋后測量。計(jì)算時(shí)乘以稀釋倍數(shù)。

        2. 離心后若上清液仍含有少量雜質(zhì),可將上清液再次10000g,常溫離心10min去除。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取兩管0.05g三葉草土,分別為測定管和對照管,按照測定步驟操作,96孔板測定吸光值,計(jì)算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.8-0.175=0.625,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.268-0.044=0.224,計(jì)算酶活得:

        S-GLS(U/g 土樣)=1.872×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=1.872×0.625÷0.224÷0.05=104.46 U/g 土樣。

        1. 取兩管0.05g林土樣,分別為測定管和對照管,按照測定步驟操作,96孔板測定吸光值,計(jì)算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.466-0.164=0.302,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.268-0.044=0.224,計(jì)算酶活得:

        S-GLS(U/g 土樣)=1.872×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=1.872×0.302÷0.224÷0.05=50.477 U/g 土樣。
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC3100/BC3105  土壤硝酸還原酶(S-NR)活性檢測試劑盒
        BC4020/BC4025  土壤亮*酸氨基肽酶(S-LAP)活性檢測試劑盒

        土壤谷氨*胺酶活性檢測試劑盒 微量法 土壤谷氨*胺酶活性檢測試劑盒 微量法

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