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        • 酪*酸解氨酶(TAL)活性檢測(cè)試劑盒 抗氧化
        產(chǎn)品名稱:

        酪*酸解氨酶(TAL)活性檢測(cè)試劑盒 抗氧化

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-12
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        酪*酸解氨酶(TAL)活性檢測(cè)試劑盒 抗氧化
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Tyrosine Ammonia-lyase (TAL) Activity Assay Kit
        檢測(cè)方法
        紫外分光光度法
        規(guī)格
        50T/48S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說(shuō)明書

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC4060
        規(guī)格50T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途酪*酸酶活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        酪*酸解氨酶(TAL)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)
        明書

        紫外分光光度法
        貨號(hào):BC4060
        規(guī)格:50T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體40 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×22-8℃保存

        溶液的配制:
        試劑二:臨用前取1瓶加入5 mL蒸餾水和20 μL鹽酸(37%充分溶解待用?,F(xiàn)配現(xiàn)用。2-8℃保存4周。
        產(chǎn)品說(shuō)明:
        酪*酸解氨酶(TAL)廣泛存在于植物和微生物中,是苯丙*酸次生代謝途徑的關(guān)鍵酶之一。TAL能夠躍過(guò)肉桂酸-4-羥基化酶(C4H)直接將酪*酸轉(zhuǎn)化為香豆酸,香豆酸可進(jìn)一步生成白藜蘆醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素類天然產(chǎn)物。
        TAL能夠分解酪*酸產(chǎn)生香豆酸,其在310nm下有吸收峰,根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出TAL活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        需自備的儀器和用品:
        紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、細(xì)胞超聲破碎儀、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、冰、鹽酸(37%和蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
        1、組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。12000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
        2、細(xì)胞或細(xì)菌:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照每500萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200w,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)。12000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
        二、測(cè)定步驟

        1. 紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,波長(zhǎng)調(diào)至310nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 加樣表(在1mL石英比色皿中分別加入)

        試劑名稱(μL測(cè)定管
        試劑一700
        試劑二200
        樣本100



        將上述試劑分別加入比色皿后迅速吹打混勻,記錄第10s的吸光值A1,迅速置于37(哺乳動(dòng)物)或25℃(其他物種)水浴或培養(yǎng)箱中3min,拿出迅速擦干測(cè)定3min10s時(shí)的吸光值A2,計(jì)算ΔA =A2 -A1
        三、TAL酶活計(jì)算
        1、按樣本蛋白濃度計(jì)算:
        單位的定義:每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘在310nm下吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活性單位。
        TAL(U/mg prot=ΔA÷0.01×V反總÷(V×Cpr)÷T=333×ΔA÷Cpr
        2、按樣本質(zhì)量計(jì)算:
        單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘在310nm下吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活性單位。
        TAL(U/g 質(zhì)量)=ΔA÷0.01×V反總÷(W÷V提取×V)÷T=333×ΔA÷W
        3、按細(xì)胞或細(xì)菌數(shù)量計(jì)算:
        單位的定義:每104個(gè)細(xì)胞或細(xì)菌在反應(yīng)體系中每分鐘在310nm下吸光度變化0.01定義為一個(gè)酶活性單位
        TAL(U/104 cell)=ΔA÷0.01×V反總÷(500÷V提取×V)÷T=0.667×ΔA
        V反總:反應(yīng)總體積,1mL;V樣:加入的樣本體積,0.1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V提?。禾崛∫后w積,1mL;500500萬(wàn)個(gè)細(xì)胞;T:反應(yīng)時(shí)間,3min。
        注意事項(xiàng):
        當(dāng)ΔA大于0.2或者A1大于1.5時(shí),建議將樣本用蒸餾水稀釋后測(cè)量;ΔA過(guò)小時(shí),建議增加酶促反應(yīng)時(shí)間(5min10min)或增加加入的樣本體積來(lái)測(cè)定。計(jì)算時(shí)注意同步修改計(jì)算公式。(計(jì)算時(shí)注意同步修改計(jì)算公式)
        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1g稗草葉加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清稀釋3倍后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA=A2-A1=0.253-0.243=0.01,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        TAL(U/g 質(zhì)量)=333×ΔA÷W×F(稀釋倍數(shù))=333×0.01÷0.1×3=99.9 U/g 質(zhì)量。
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC1310/BC1315 總抗氧化能力(T-AOC)檢測(cè)試劑盒
        BC1430/BC1435 非蛋白質(zhì)巰基含量檢測(cè)試劑盒
        BC1370/BC1375 總巰基含量檢測(cè)試劑盒

        酪*酸解氨酶(TAL)活性檢測(cè)試劑盒 抗氧化 酪*酸解氨酶(TAL)活性檢測(cè)試劑盒 抗氧化

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