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        • 莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列
        產(chǎn)品名稱:

        莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-12
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        中文名稱
        莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Shikimic acid Dehydrogenase(SD) Activity Assay Kit
        檢測(cè)方法
        紫外分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC4180
        規(guī)格50T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途莽草酸脫氫酶(SD)活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        莽草酸脫氫酶(SD活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
        紫外分光光度法
        貨號(hào): BC4180
        規(guī)格: 50T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×12-8℃保存
        試劑三粉劑×2-20保存
        溶液的配制:
        1. 提取液:內(nèi)含不溶物,用前搖勻。

        2. 試劑二:臨用前加入10 mL蒸餾水溶解。

        3. 試劑臨用前每瓶加入11 mL蒸餾水溶解。

        4. 工作液的配制:根據(jù)用量按照試劑一:試劑二:試劑三為7:4:8的體積比例充分混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配,用前25℃預(yù)熱15min。

        產(chǎn)品說(shuō)明:
        莽草酸途徑是存在于植物和微生物中的一條重要的代謝途徑,莽草酸脫氫酶(EC 1.1.1.25) 是莽草酸合成代謝途徑中催化第四步反應(yīng)的關(guān)鍵酶。
        莽草酸脫氫酶催化莽草酸和NADP產(chǎn)生NADPH,檢測(cè)340nm下的吸光值增加速率來(lái)表示SD活性。
        Shikimic Acid +NADP               NADPH(340nm)
        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        自備的儀器和用品
        紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        操作步驟:
        一、樣本處理可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)
        1、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(加入前搖勻))進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
        2、細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
        3液體:直接檢測(cè)。
        二、測(cè)定步驟具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
        1. 紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 工作液25℃預(yù)熱10min以上。

        3. 操作表:在1mL石英比色皿中分別加入下列試劑

        試劑名稱空白管測(cè)定管
        工作液(µL)950950
        樣本(µL)-50
        蒸餾水(µL)50-
        加入樣本即開始計(jì)時(shí),充分混勻后于340nm處測(cè)定20s時(shí)的吸光值A15min20s時(shí)的吸光值A2,計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定,ΔA空白管=A2空白-A1空白,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管(空白管只需做1-2次)。

        注意事項(xiàng)
        1. 樣本提取上清液置于冰上待測(cè),且樣本提取完成后建議2h內(nèi)測(cè)完。

        2. 樣本的蛋白濃度需自行測(cè)定,由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),所以測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需扣除提取液自身蛋白濃度。

        3. ΔA大于1時(shí),建議將樣本稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。當(dāng)ΔA小于0.01時(shí),可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(10min15min)來(lái)測(cè)定。

        4. 空白管為檢測(cè)各試劑組分質(zhì)量的檢測(cè)孔,正常情況下,變化不超過(guò)0.01。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
        1. 0.1g蘿卜葉,加入1mL提取液,進(jìn)行樣本處理,取上清按照測(cè)得步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A2測(cè)定-A1測(cè)定=1.441-1.201=0.24ΔA空白管=A2空白-A1空白=0,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.24,按照樣本質(zhì)量計(jì)算得:SD酶活(U/g 質(zhì)量)=643×ΔA÷W=1543.2 U/g 質(zhì)量。

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC2030/BC2035 異檸檬酸裂解酶(ICL)活性檢測(cè)檢測(cè)試劑盒
        BC3170/BC3175 乙酸激酶(ACK)活性檢測(cè)試劑盒

         

         莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列 莽草酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 其它系列

         

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