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        • 維生素B1(VB1)含量檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        維生素B1(VB1)含量檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質: 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-15
        儲存條件
        2-8℃
        中文名稱
        維生素B1(VB1)含量檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        英文名稱
        Vitamin B1(VB1) Content Assay Kit
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/96S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC4195
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途維生素B1(VB1)含量檢測應用領域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農林牧漁,綜合


        維生素B1(VB1)含量檢測試劑盒說明書
        微量法
        貨號: BC4195
        規(guī)格: 100T/96S
        產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體70 mL×12-8℃保存
        稀釋液液體100 mL×12-8℃保存
        試劑一液體2.5 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二液體3 mL×12-8℃保存
        試劑三液體3 mL×12-8℃保存
        試劑四液體7 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑五液體4 mL×1瓶2-8℃保存
        標準品粉劑×12-8℃保存

        溶液的配制:
        1、提取液:內含不溶物,使用前搖勻;
        2標準品:10mg維生素B1。臨用前加入1mL稀釋液,配成10mg/mL(即10000µg/mL)的標準液
        產(chǎn)品說明:
        維生素B1(Vitamin B1)又稱硫胺素,以輔酶形式參與糖的分解代謝,在生物體能量代謝中有重要的作用。

        VB1在堿性條件下還原鐵*生成亞鐵*,亞鐵*與Fe3+在弱酸條件下生成普魯士藍,測定布魯士藍在704nm下的特征吸收峰,即可反映VB1的含量。

        技術指標:
        低檢出限:0.057 µg/mL
        線性范圍:1.953-250 µg/mL
        注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
        自備的儀器和用品
        可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、EP管、冰和蒸餾水。
        操作步驟:

        • 樣本處理可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻

        1、組織:將樣本磨碎,按照質量(g):提取液體積mL為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入0.6mL提取液)加入提取液,60浸提30min,加蒸餾水0.4mL,混勻后于25,13000g離心10min,取上清測定(動物組織、豆類種子等蛋白含量較高的樣本建議離心20-30分鐘或反復離心2-3次至上清無渾濁)。
        2、細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入0.6mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);加蒸餾水0.4mL,混勻后于25,13000g離心10min,取上清測定。
        3、液體:直接檢測。
        二、測定步驟

        1. 分光光度計/酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至704nm,分光光度計蒸餾水調零。

        2. 將10mg/mL(10000µg/mL)標準液用稀釋液稀釋為250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125μg/mL的標準溶液備用。

        3. 標準品稀釋表

        序號稀釋前濃度(µg/mL)標準液體積(µL)稀釋液體積(µL)稀釋后濃度(µg/mL)
        11000025975250
        2250200200125
        312520020062.5
        462.520020031.25
        531.2520020015.625
        615.6252002007.8125

        實驗中每個標準管需25µL標準溶液。

        1. 操作表在1.5mL EP管中進行下列操作


        測定管標準管空白管
        樣本(µL)25--
        稀釋液(µL)--25
        標準品溶液(µL)-25-
        試劑一(µL)202020
        試劑二(µL)252525
        充分混勻,80水浴反應30min。
        試劑三(µL)202020
        試劑四(µL)555555
        試劑五(µL)303030
        蒸餾水(µL)757575
        充分混勻,反應5min吸取200μL于微量玻璃比色皿或96孔板中測定704nm處吸光值A,計算ΔA=A測定管-A空白管,ΔA標準=A標準管-A空白管空白管只需做1-2次。

        三、維生素B1含量計算
        1、標準曲線的繪制:
        以各個標準溶液的濃度為x軸,其對應的ΔA標準為y軸,繪制標準曲線,得到標準方程y=kx+b,將ΔA帶入方程得x(μg/mL)。
        2、維生素B1含量的計算:
        (1)按蛋白濃度計算VB1(μg/mg prot=x×V樣總÷Cpr×V樣總= x÷Cpr
        (2)按樣本質量計算VB1(μg/g 質量)=x×V樣總÷W = x÷W
        (3)按照細胞數(shù)量計算VB1(μg/104 cell)= x×V樣總÷細胞數(shù)量(萬個)= x÷細胞數(shù)量(萬個)
        (4)按液體體積計算VB1(μg/mL= x
        V樣總:樣本總體積,1mL; Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mLW:樣本質量,g。

        注意事項

        1. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定

        2. 蛋白濃度較高的樣本,比如動物組織,豆類種子等建議將樣本稀釋20倍或40倍后再測定并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

        3. 顯色完成后立即進行測定,若顯色完成后有沉淀產(chǎn)生,將其搖勻后測定。

        實驗實例:

        1. 稱取0.1g肝臟,加入0.6mL提取液,60℃浸提30min,加蒸餾水0.4mL,混勻后于25℃13000rpm離心10min,取上清,將上清稀釋40之后按照測定步驟操作,使用96孔板測得計算ΔA= A測定-A空白管=0.551-0.107=0.444,帶入標準曲線y=0.0054x+0.0043,計算x=81.43μg/mL,按樣本質量計算VB1含量

        VB1μg/g質量)= x×V樣總÷W×40(稀釋倍數(shù))=81.43×1÷0.1×40=32572 μg/g 質量。

        1. 稱取0.1g稗草,加入0.6mL提取液,60℃浸提30min,加蒸餾水0.4mL,混勻后于25℃13000rpm離心10min,取上清,將上清稀釋40之后按照測定步驟操作,使用96孔板測得計算ΔA= A測定-A空白管=0.727-0.107=0.62,帶入標準曲線y=0.0054x+0.0043,計算x =114.02 μg/mL,按樣本質量計算VB1含量

        VB1μg/g質量)= x×V樣總÷W×40(稀釋倍數(shù))=114.02×1÷0.1×40=45608 μg/g 質量。
        相關系列產(chǎn)品:
        BC2110/BC2115 維生素B6VB6)含量檢測試劑盒
        BC1420/BC1425 維生素EVE)含量檢測試劑盒

        維生素B1(VB1)含量檢測試劑盒 微量法 維生素B1(VB1)含量檢測試劑盒 微量法

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