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        • 原果膠含量檢測(cè)試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        原果膠含量檢測(cè)試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-15
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        原果膠含量檢測(cè)試劑盒
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Protopectin Content Assay Kit
        檢測(cè)方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC3680
        規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途原果膠含量檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        原果膠含量檢測(cè)試劑盒說明書

        可見分光光度法

        貨號(hào):BC3680

        規(guī)格:50T/24S

        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液一

        液體100 mL×1瓶(自備)

        2-8℃保存

        提取液二

        液體30 mL×1

        2-8℃保存

        提取液三

        液體50 mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體60 mL×1瓶(自備)

        2-8℃保存

        試劑二

        液體3 mL×1

        2-8℃保存

        試劑三

        液體5 mL×1

        2-8℃保存

        標(biāo)準(zhǔn)品

        粉劑×1

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、 提取液一:80%乙醇,自備。即將80 mL無水乙醇和20 mL蒸餾水混合。

        2、 試劑一:濃硫酸60 mL,自備。

        3、 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg半乳糖醛酸,臨用前加入0.943 mL提取液三,配成50 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。

        產(chǎn)品說明:

        果膠是植物細(xì)胞壁主要組成成分之一,分為水溶性果膠和不溶性果膠,不溶性果膠為原果膠。原果膠是不溶于水的物質(zhì),但可在酸、堿、鹽等化學(xué)試劑及酶的作用下,加水分解轉(zhuǎn)變成水溶性果膠,在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領(lǐng)域具有較廣泛的應(yīng)用。

        原果膠在堿性條件下水解為可溶性果膠,并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為半乳糖醛酸,產(chǎn)物在強(qiáng)酸中與咔唑縮合生成紫紅色化合物,在530nm處有特征吸收峰。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

        需自備的儀器和用品:

        可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、丙酮、濃硫酸、無水乙醇和蒸餾水。

        操作步驟:

        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        取約0.1g樣本,加入1mL 提取液一,室溫快速勻漿,95℃水浴20min,冷卻至室溫,4000g 25℃離心10min,棄上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙酮交替各洗2遍(渦旋振蕩2min左右,4000g 25℃離心10min,棄上清即可),沉淀即為粗細(xì)胞壁,加入1mL提取液二(去除淀粉)浸泡15小時(shí),4000g 25℃離心10min,棄上清,加入1mL提取液三,充分勻漿。8000g 4離心10min,取上清液待測(cè)。

         

        二、測(cè)定步驟

        1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至530nm,蒸餾水調(diào)零。

        2、 50μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液用提取液三稀釋為0.7、0.6、0.50.4、0.2、0.10.05、0.025μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

        3、 操作表:

        試劑名稱

        空白管

        標(biāo)準(zhǔn)管

        對(duì)照管

        測(cè)定管

        樣本(μL

        -

        -

        100

        100

        標(biāo)準(zhǔn)品(μL

        -

        100

        -

        -

        蒸餾水(μL

        100

        -

        -

        -

        試劑一(μL

        800

        800

        800

        800

        混勻、90放置10min,取出后冷卻

        試劑二(μL

        -

        -

        100

        -

        試劑三(μL

        100

        100

        -

        100

        混勻,25靜置30min后測(cè)定530nm處吸光值,分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A對(duì)照管和A測(cè)定管。ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管。

        三、原果膠含量的計(jì)算

        1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

        以各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸,其對(duì)應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b,將ΔA測(cè)定帶入方程得到xμmol/mL)。

        2、 原果膠含量的計(jì)算:原果膠含量(μmol/g 質(zhì)量)=x×V提取液三÷W =x÷W

        V提取液三:加入提取液三的體積,1mLW:樣本質(zhì)量,g。

        注意事項(xiàng):

        1、 濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性,操作時(shí)需特別注意,90℃加熱取出后冷卻再打開蓋子,以防液體飛濺燒傷。

        2、 ΔA超過0.6,可將樣本用提取液三進(jìn)行適當(dāng)稀釋再進(jìn)行測(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 0.1g木槿加入1mL 提取液一,室溫快速勻漿,95℃水浴20min,冷卻至室溫,4000g 25℃離心10min,棄上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙酮交替各洗2遍(渦旋振蕩2min左右,4000g 25℃離心10min,棄上清即可),沉淀即為粗細(xì)胞壁,加入1mL提取液二浸泡15小時(shí),4000g 25℃離心10min,棄上清,加入1mL提取液三,充分勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清液之后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.194-0.044=0.15,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.9322x-0.0232,計(jì)算X=0.1858μmol/mL;按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得:原果膠含量(μmol/g 質(zhì)量)= x÷W=1.858 μmol/g 質(zhì)量。

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC2630/BC2635  果膠酶活性檢測(cè)試劑盒

        BC4120/BC4125  可溶性果膠含量檢測(cè)試劑盒

        BC2640/BC2645  果膠裂解酶(PL)活性檢測(cè)試劑盒

        原果膠含量檢測(cè)試劑盒

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