直鏈淀粉含量檢測試劑
盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC4260
規(guī)格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：*50 mL自備；

2. 試劑四：提供125mL空瓶一個；將試劑三：H₂O =9 mL：91 mL混勻，現用現配，2-8℃保存半年；

3. 標準品：10 mg直鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的直鏈淀粉，2-8℃保存半年。

產品說明：
直鏈淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷鍵鏈接的多糖鏈，直鏈淀粉含量影響著食品的食用品質和外觀品質，與食品安全息息相關。
直鏈淀粉和碘形成藍色絡合物，利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉，再用碘與其反應得到直鏈淀粉含量。

技術指標：
低檢出限：0.006 mg/mL
線性范圍：0.0125-0.6 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、天平、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、*、無水乙醇、EP管、蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

1. 稱取0.01g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；

2. 80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；

3. 在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；

4. 在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測。

二、測定步驟

1. 分光光度計預熱30min以上，調節(jié)雙波長至550nm和485nm，蒸餾水調零。

2. 標準溶液的稀釋：取40μL 10mg/mL標準溶液，加入960μL試劑四，充分混勻，配制成0.4mg/mL標準溶液使用，現用現配。（實驗中每管需要100μL，為減小實驗誤差，故配制大體積。）

3. 操作表 (在1.5mL離心管中依次加入下列試劑) ：

三、直鏈淀粉含量計算
直鏈淀粉含量（mg/g 質量）=ΔA測定÷（ΔA標準÷C標準）×V樣總÷W=2×ΔA測定÷ΔA標準÷W
C標準：標準溶液濃度，0.4mg/mL；V樣總：加入試劑四體積，5mL；W：樣本質量，g。
注意事項：

1. 反應后建議在20min內檢測完成防止褪色。

2. 若A測定大于1，建議樣本上清用試劑四稀釋后再進行測定；若A測定低于0.03時，可以提取時減少試劑四體積進行測定。注意同步修改計算公式。

實驗實例：

1. 取0.01g烘干玉米于研缽中研碎，加入 1mL試劑一，充分勻漿后轉移到 EP 管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心 5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑二（乙*）振蕩5min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清，之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白）=（0.664-0.003）-（0.474-0.034）=0.221，ΔA標準=（A標準-A空白）-（A’標準-A’空白）=（0.723-0.003）-（0.447-0.034）=0.307，按樣本質量計算含量得：直鏈淀粉含量（mg/g 質量）=2×ΔA測定÷ΔA標準÷W=143.97 mg/g質量。

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