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        • 植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 其他系列
        產(chǎn)品名稱:

        植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 其他系列

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-16
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        中文名稱
        植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 其他系列
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Plant Ureides Content Assay Kit
        檢測(cè)方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC4370
        規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途植物中酰脲含量檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒說明書

        可見分光光度法

        貨號(hào)BC4370

        規(guī)格50T/24S

        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液A

        液體30 mL×1(自備)

        常溫保存

        提取液B

        液體30 mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體4 mL×1

        2-8℃保存

        試劑二

        液體4 mL×1

        2-8℃保存

        試劑

        液體4 mL×1

        2-8℃保存

        試劑

        液體10 mL×1

        2-8℃保存

        試劑五

        粉劑×2

        -20保存

        試劑六

        液體50 mL×1(自備)

        常溫保存

        試劑七

        液體10 mL×1

        2-8℃保存

        標(biāo)準(zhǔn)品

        粉劑×1

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、提取液A:自備無(wú)水乙醇;

        2、試劑五:臨用前1加入5 mL蒸餾水溶解備用,可分裝后-20保存,-20℃保存一周

        3、試劑六:自備濃鹽酸;

        4、標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg尿*素。臨用前加入632.5 μL蒸餾水配制成100 μmol/mL酰脲標(biāo)準(zhǔn)液。

        產(chǎn)品說明

        選育高固氮活性豆科植物品種是提高豆科植物固氮能力的一個(gè)有效途徑。豆科植物根瘤菌固氮的最初輸出產(chǎn)物主要是酰脲(尿*素和尿囊酸)。酰脲是豆科植物一根瘤菌共生固氮中的氮代謝產(chǎn)物,是氮素貯藏和運(yùn)輸?shù)闹饕问?,在豆科植物氮代謝中起著重要作用。可通過測(cè)定豆科植物組織中酰脲的含量,從而評(píng)估其固氮能力。

        尿*素在過酸或堿條件下水解產(chǎn)生乙醛酸,然后在*和強(qiáng)酸條件下可被氧化,生成紅色絡(luò)合物,在535 nm處有特殊吸收峰,據(jù)此可由吸光值計(jì)算出樣本中酰脲的含量。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

        自備的儀器和用品

        可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、鼓風(fēng)烘箱、1 mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、30~50目篩、研缽、冰和蒸餾水、無(wú)水乙醇、濃鹽酸和EP管。

        操作步驟:

        一、 樣本處理可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)

         

        植物樣本:將供試的植物樣本在65℃的鼓風(fēng)烘箱中烘干,研磨成粉狀,過30~50目篩。按質(zhì)量(g︰提取液體積(mL110~20比例(建議稱取0.1 g烘干樣本,依次加入1.0 mL提取液A1.0 mL提取液B,禁止將提取液A與提取液B混勻待用),漩渦混勻,在80℃水浴鍋中萃取5 min,然后3500 rpm,室溫,離心15 min,棄沉淀,取上清液置于冰上待測(cè)。

        二、測(cè)定步驟

        1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至535 nm,蒸餾水調(diào)零。  

        2、 將試劑六與試劑七置于冰水浴中預(yù)冷30 min以上,并置于冰上待用。

        3、 標(biāo)準(zhǔn)液的處理:將標(biāo)準(zhǔn)品配制成100 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液后,用蒸餾水稀釋至12.56.25、3.1251.5625、0.78125 nmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

        4、 操作表:(在1.5mL EP管中操作)


        對(duì)照管

        尿囊酸測(cè)定管

        酰脲測(cè)定管

        標(biāo)準(zhǔn)管

        空白管

        樣本(µL

        400

        400

        400

        -

        -

        標(biāo)準(zhǔn)溶液(µL

        -

        -

        -

        400

        -

        蒸餾水(µL

        -

        -

        -

        -

        400

        試劑一 µL

        50

        -

        50

        50

        50

        試劑三(µL

        -

        100

        -

        -

        -

        -

        充分混勻,沸水浴7 min,冷卻至室溫。

        試劑二(µL

        50

        -

        50

        50

        50

        -

        充分混勻,100℃水浴加熱6 min,冷卻至室溫

        試劑四(µL

        100

        100

        100

        100

        100

        試劑五(µL

        100

        100

        100

        100

        100

        充分混勻,室溫下靜置6 min,然后轉(zhuǎn)移至冰水浴中,冷卻至4℃

        試劑六(µL

        500

        500

        500

        500

        500

        試劑七(µL

        100

        100

        100

        100

        100

        充分混勻,室溫下靜置15 min

        1 mL反應(yīng)液,于1 mL玻璃比色皿中測(cè)定535 nm處吸光值A,分別記為A對(duì)照管、A尿囊酸測(cè)定管、A酰脲測(cè)定管、A標(biāo)準(zhǔn)管及A空白管。計(jì)算ΔA尿囊酸=A尿囊酸測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA酰脲=A酰脲測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。

        注意:對(duì)照管不進(jìn)行水浴加熱處理;尿囊酸測(cè)定管只需進(jìn)行第二次的沸水??;測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管及空白管在沸水浴加熱時(shí),EP管蓋緊并用封口膜密封,避免液體蒸發(fā)影響試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

        三、植物中酰脲含量的計(jì)算

        1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

        以各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸,其對(duì)應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程y= kx+b,將ΔA尿囊酸和ΔA酰脲分別帶入方程得到x1nmol/mL)和x2nmol/mL

        2、 豆科植物中酰脲含量的計(jì)算:

        尿囊酸含量(nmol/g 質(zhì)量= x1×V提取÷W=2×x1÷W

        酰脲含量(nmol/g 質(zhì)量= x2×V提取÷W=2×x2÷W

        V提取:加入提取液體積,2.0 mLW:樣本質(zhì)量,g。

         

        注意事項(xiàng)

        1、同一批檢測(cè)樣本需配1-2個(gè)空白管。

        2、當(dāng)OD值高于0.9時(shí),建議將樣本稀釋后檢測(cè),并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

        3、試劑六與試劑七在使用之前請(qǐng)先置于冰上預(yù)冷30 min以上。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1、0.1g馬齒莧,進(jìn)行樣本處理,按照測(cè)定步驟操作,測(cè)定計(jì)算ΔA酰脲=A酰脲測(cè)定管-A對(duì)照管=0.559-0.385=0.174,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.0708x+0.0059,計(jì)算x2=2.3743,按照計(jì)算公式計(jì)算得:

        酰脲含量(nmol/g 質(zhì)量= x2×V提取÷W=2×x2÷W=2.3478÷0.1=47.486 nmol/g 質(zhì)量。

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC4110/BC4115 脲酶(UE)活性檢測(cè)試劑盒

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