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        • 基因工程試劑BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞
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        產(chǎn)品名稱:

        基因工程試劑BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2022-08-13
        基因工程試劑BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞
        貨號:C1500
        規(guī)格:10×100ul / 20×100ul
        保存:-70℃保存,干冰運輸。自收貨之日起液氮保存少一年,-70℃保存少 6 個月。
        產(chǎn)品簡介:
        本公司生產(chǎn)的BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌BL21(DE3)pLysS菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶

        基因工程試劑BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞
        貨號:C1500
        規(guī)格:10×100ul / 20×100ul
        保存:-70℃保存,干冰運輸。自收貨之日起液氮保存少一年,-70℃保存少 6 個月。

         

        產(chǎn)品簡介:
            本公司生產(chǎn)的BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌BL21(DE3)pLysS菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 10 7 ,-70℃保存 6 個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
            基因型:F-, ompT, hsdSB(rB-mB-), dcm, gal(DE3), pLysS, Cmr
            特點:該菌株帶有質(zhì)粒 pLysS,因此具有氯霉素抗性。質(zhì)粒 pLysS 含有表達(dá) T7 溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平,但不干擾目的蛋白的表達(dá)。該菌適合表達(dá)毒性蛋白和非毒性蛋白。


        操作方法:(以下各步驟均為無菌操作)

        1、將感受態(tài)細(xì)胞置于冰上融化,以下實驗以 100ul 感受態(tài)細(xì)胞為例。
        2、向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入需轉(zhuǎn)化的目的 DNA,注意目的 DNA 的體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一,輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物,冰浴放置 30 分鐘。
        3、將離心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒,然后快速轉(zhuǎn)移到冰浴中放置 2-3 分鐘,不要搖動離心管。
        4、向離心管中加入 500ul 無菌無抗的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基,37℃ 150rpm 振蕩培養(yǎng) 1 小時。目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá),使菌體復(fù)蘇。
        5、取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞涂布含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 平板,37℃倒置培養(yǎng) 12-16 小時。涂布用量可根據(jù)具體實驗來調(diào)整,如轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多,可取 100ul 左右的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板;反之,如轉(zhuǎn)化的 DNA總量較少,可取 200-300ul 的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板。如果預(yù)計的克隆較少,可通過離心后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。涂布剩余的菌液可 4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少可以將剩下的菌液再涂布新的平板。

         

        注意事項:

        1、實驗過程中應(yīng)嚴(yán)格無菌操作,防止其它 DNA 或雜菌的污染,避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。
        2、感受態(tài)細(xì)胞不可反復(fù)凍融,否則其轉(zhuǎn)化效率將會降低。
        3、轉(zhuǎn)化時,轉(zhuǎn)化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內(nèi)成正比,但當(dāng)加入的外源 DNA 量過多或體積過大反而會降低轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化時 DNA 體積要小于感受態(tài)細(xì)胞體積的十分之一。
        4、為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功,可以保留部分連接產(chǎn)物,以重新轉(zhuǎn)化,將損失將到低。

         

        相關(guān)產(chǎn)品:

        I1020  IPTG  溶液 (50mg/ml)
        K1030  Kanamycin (100mg/ml) 卡那霉素
        L1015  LB 固體培養(yǎng)基 ( 干粉 )
        L1020  SOC 液體培養(yǎng)基 ( 干粉 )
        X1010  X-gal(20mg/ml)


        基因工程試劑BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞訂購說明:

        1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
        2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
        3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
        4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
        5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


        運輸說明:

        1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
        2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
        3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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