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        • 土壤尿酸酶活性檢測(cè)試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        土壤尿酸酶活性檢測(cè)試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-16
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        土壤尿酸酶活性檢測(cè)試劑盒
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Soil uricase Activity Assay Kit
        檢測(cè)方法
        紫外分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑,詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC4410
        規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途土壤尿酸酶活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        土壤尿酸酶活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

        紫外分光光度法

        貨號(hào):BC4410

        規(guī)格50T/24S

        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        試劑一

        液體2 mL×1瓶(自備)

        2-8℃保存

        試劑二A

        液體0.5 mL×1

        2-8℃保存

        試劑二B

        液體17.5 mL×1

        2-8℃保存

        試劑三

        液體40 mL×1

        2-8℃保存

        試劑四

        液體60 mL×1

        2-8℃保存

        標(biāo)準(zhǔn)品

        液體1 mL×1

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、試劑一:自備甲苯;

        2、試劑二:臨用前按照試劑二A液︰試劑二B= 135的比例混合,根據(jù)樣本量所需使用當(dāng)天現(xiàn)配現(xiàn)用;

        3、標(biāo)準(zhǔn)品:5 µmol/mL的尿酸溶液。

        產(chǎn)品說(shuō)明:

        土壤尿酸酶(Soil UricaseS-UR)是一種與核酸代謝有關(guān)的氧化還原酶,主要是將土壤中的核酸腺嘌呤與尿酸等物質(zhì)轉(zhuǎn)化成尿*素和尿囊酸,進(jìn)而生成尿素供植物利用。

        土壤尿酸酶能夠催化尿酸生成尿*素、CO2H2O2,尿酸在284 nm有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)前后尿酸的減少量,來(lái)表示土壤尿酸酶活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

        需自備的儀器和用品:

        紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、研缽、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、冰、30~50目篩、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

        操作步驟:

        一、 樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。

        二、測(cè)定步驟

        1、紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至284 nm,蒸餾水調(diào)零。

        2、5 µmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液用蒸餾水倍比稀釋為0.5、0.250.125、0.0625、0.03125、0.015625 µmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待用。

         

        3、標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:

        序號(hào)

        稀釋前濃度(µmol/mL

        標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL

        蒸餾水體積(µL

        稀釋后濃度(µmol/mL

        1

        5

        50

        450

        0.5

        2

        0.5

        200

        200

        0.25

        3

        0.25

        200

        200

        0.125

        4

        0.125

        200

        200

        0.0625

        5

        0.0625

        200

        200

        0.03125

        6

        0.03125

        200

        200

        0.015625

        備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需150µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        4、加樣表:

        試劑名稱

        測(cè)定管

        對(duì)照管

        無(wú)土管

        標(biāo)準(zhǔn)管

        空白管

        風(fēng)干土樣(g

        0.1

        0.1

        -

        -

        -

        試劑一(μL

        25

        25

        25

        -

        -

        充分蕩,使土樣全部濕潤(rùn),室溫放置30 min。

        試劑二(μL

        500

        -

        500

        -

        -

        蒸餾水(μL

        500

        500

        500

        -

        -

        試劑三(μL

        500

        1000

        500

        -

        -

        振蕩混勻,30℃恒溫培養(yǎng)24 h;10000 rpm,25℃,離心10 min,取上清。

        上清液(μL

        150

        150

        150

        -

        -

        標(biāo)準(zhǔn)液(μL

        -

        -

        -

        150

        -

        蒸餾水(μL

        -

        -

        -

        -

        150

        試劑四(μL

        850

        850

        850

        850

        850

        充分混勻,1 mL石英比色皿中測(cè)定284 nm處吸光值,記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A無(wú)土管、A標(biāo)準(zhǔn)管和A空白管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A無(wú)土管-空白管)-A測(cè)定管-A對(duì)照管)、ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管,同一批次樣本檢測(cè)無(wú)土管、空白管只需檢測(cè)1-2,標(biāo)準(zhǔn)曲線只需測(cè)1-2。

        三、土壤尿酸酶活性計(jì)算

        1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

        根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(xμmol/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(y,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測(cè)定(y,ΔA測(cè)定)帶入公式計(jì)算樣本濃度(x,μmol/mL。

        2、 土壤尿酸酶活性的計(jì)算:

        酶活定義:每天每g土樣中消耗1 μmol的尿酸定義為一個(gè)酶活力單位

        土壤尿酸酶活力(U/g 土樣)=x×V反總÷W÷T=1.525x÷W

        T:反應(yīng)時(shí)間,1 d = 24 h;V反總:反應(yīng)體系總體積:1.525 mLW:樣本質(zhì)量,g。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1、 稱取兩管2-1-20號(hào)土樣0.1g,按照操作步驟進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得計(jì)算ΔA=A無(wú)土管-空白管)-A測(cè)定管-A對(duì)照管)=1.136-0.001-0.703-0.05=0.482,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=1.7444x - 0.0013,計(jì)算x=0.2771,按照計(jì)算公式計(jì)算酶活得:

        土壤尿酸酶活力(U/g 土樣)= 1.525×x÷W=1.525×0.2771÷0.1=4.226 U/g 土樣。

        土壤尿酸酶活性檢測(cè)試劑盒 

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