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        • 土壤尿酸酶活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        土壤尿酸酶活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-16
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        土壤尿酸酶活性檢測試劑盒 微量法
        推薦
        若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號(hào)YA0602
        英文名稱
        Soil uricase Activity Assay Kit
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/48S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC4415
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途土壤尿酸酶活性檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        土壤尿酸酶活性檢測試劑盒說明書

        微量法

        貨號(hào)BC4415

        規(guī)格100T/48S

        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        試劑一

        液體2 mL×1瓶(自備)

        2-8℃保存

        試劑二A

        液體0.5 mL×1

        2-8℃保存

        試劑二B

        液體17.5 mL×1

        2-8℃保存

        試劑三

        液體40 mL×1

        2-8℃保存

        試劑四

        液體50 mL×1

        2-8℃保存

        標(biāo)準(zhǔn)品

        液體1 mL×1

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、試劑一:自備甲苯;

        2、試劑二:臨用前按照試劑二A液︰試劑二B= 135的比例混合,根據(jù)樣本量所需使用當(dāng)天現(xiàn)配現(xiàn)用;

        3、標(biāo)準(zhǔn)品:5 µmol/mL的尿酸溶液。

        產(chǎn)品說明:

        土壤尿酸酶是一種與核酸代謝有關(guān)的氧化還原酶,主要是將土壤中的核酸腺嘌呤與尿酸等物質(zhì)轉(zhuǎn)化成 素和尿囊酸,進(jìn)而生成尿素供植物利用。

        土壤尿酸酶能夠催化尿酸生成 素、CO2H2O2,尿酸在284 nm有特征吸收峰,通過測定反應(yīng)前后尿酸的減少量,來表示土壤尿酸酶活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

        需自備的儀器和用品:

        紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、研缽、可調(diào)式移液器、微量石英比色/96UV板、冰、30~50目篩、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

        操作步驟:

        一、 樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。

        二、測定步驟

        1、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長至284 nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

        2、5 µmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液用蒸餾水倍比稀釋為1、0.5、0.25、0.1250.0625、0.03125、0.015625 µmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待用。

        3、標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:

        序號(hào)

        稀釋前濃度(µmol/mL

        標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL

        蒸餾水體積(µL

        稀釋后濃度(µmol/mL

        1

        5

        100

        400

        1

        2

        1

        200

        200

        0.5

        3

        0.5

        200

        200

        0.25

        4

        0.25

        200

        200

        0.125

        5

        0.125

        200

        200

        0.0625

        6

        0.0625

        200

        200

        0.03125

        7

        0.03125

        200

        200

        0.015625

        備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需60µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        4、加樣表:

        試劑名稱

        測定管

        對(duì)照管

        無土管

        標(biāo)準(zhǔn)管

        空白管

        風(fēng)干土樣(g

        0.05

        0.05

        -

        -

        -

        試劑一(μL

        12.5

        12.5

        12.5

        -

        -

        充分蕩,使土樣全部濕潤,室溫放置30 min。

        試劑二(μL

        250

        -

        250

        -

        -

        蒸餾水(μL

        250

        250

        250

        -

        -

        試劑三(μL

        250

        500

        250

        -

        -

        振蕩混勻,30℃恒溫培養(yǎng)24 h;10000 rpm25℃,離心10 min,取上清。

        上清液(μL

        60

        60

        60

        -

        -

        標(biāo)準(zhǔn)液(μL

        -

        -

        -

        60

        -

        蒸餾水(μL

        -

        -

        -

        -

        60

        試劑四(μL

        340

        340

        340

        340

        340

        充分混勻,吸取200 μL于微量石英比色皿/96UV板中測定284 nm處吸光值,記為A測定管、A對(duì)照管、A無土管、A標(biāo)準(zhǔn)管和A空白管。計(jì)算ΔA=A無土管-A空白管)-A測定管-A對(duì)照管)、ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管,同一批次樣本檢測無土管、空白管只需檢測1-2,標(biāo)準(zhǔn)曲線只需測1-2。

        三、土壤尿酸酶活性計(jì)算

        1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

        根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(x,μmol/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(y,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測定(yΔA測定)帶入公式計(jì)算樣本濃度(x,μmol/mL。

        2、 土壤尿酸酶活性的計(jì)算:

        酶活定義:每天每g土樣中消耗1 μmol的尿酸定義為一個(gè)酶活力單位。

        土壤尿酸酶活力(U/g 土樣)=x×V反總÷W÷T=0.7625x÷W

        T:反應(yīng)時(shí)間,1 d = 24 hV反總:反應(yīng)體系總體積:0.7625 mL;W:樣本質(zhì)量,g。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 稱取兩管2-1-20號(hào)土樣0.05g,按照操作步驟進(jìn)行操作,使用微量石英比色皿測得計(jì)算ΔA測定=A無土管-空白管)-A測定管-A對(duì)照管)=1.0928-0.0023-0.6852-0.0509=0.4562,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=1.6894x + 0.0016,  計(jì)算x=0.2691,按照計(jì)算公式計(jì)算酶活得:

        土壤尿酸酶活力(U/g 土樣)=0.7625x÷W=0.7625×0.2691÷0.05=4.1 U/g 土樣。


        土壤尿酸酶活性檢測試劑盒 微量法  土壤尿酸酶活性檢測試劑盒 微量法

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