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        • 檸檬酸合酶(CS)活性檢測試劑盒 微量法
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        • 檸檬酸合酶(CS)活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        檸檬酸合酶(CS)活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-10
        儲存條件
        -20℃
        檸檬酸合酶(CS)活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個月
        單位

        英文名稱
        Citrate Synthase(CS) Activity Assay Kit
        別名
        檸檬酸合酶試劑盒 CS Kit 檸檬酸合酶(CS)試劑盒 檸檬酸合酶(CS)測試盒,生化法試劑盒
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC1065
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途測定意義: CS(EC 2.3.3.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        檸檬酸合酶
        (CS)活性檢測試劑盒說明書

        微量法
        貨號BC1065
        規(guī)格100T/48S
        產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體50 mL×1瓶-20保存
        試劑液體10 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑液體0.6 mL×1支-20保存
        試劑液體40 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑液體2mL×12-8℃保存
        試劑五粉劑×2-20保存
        試劑六粉劑×1-20保存

        溶液的配制:

        1. 試劑:臨用前加入500 μL雙蒸水,用不完的試劑仍-20℃保存;

        2. 試劑:臨用前加入1.5 mL雙蒸水,用不完的試劑仍-20℃保存。

        產(chǎn)品說明
        CS(EC 2.3.3.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)第一個限速酶,是三羧酸循環(huán)主要調(diào)控位點之一。
        CS催化乙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生檸檬酰輔*A,進一步水解產(chǎn)生檸檬酸;該反應(yīng)促使DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在412nm處有特征吸光值。
        注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
        需自備的儀器用品:
        可見分光光度計/酶標(biāo)儀、低溫離心機、水浴鍋、研缽/勻漿器、可調(diào)節(jié)移液器、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸餾水。
        操作步驟具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

        注意事項:
        1、測定過程中樣本和所有試劑在冰上放置,以免變性和失活。
        2、比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃25℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃25℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
        3、最好兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
        4、用96孔板測定時,根據(jù)測定管數(shù)量配制測定管工作液(試劑三、四、五、六)和對照管工作液(試劑三、四),因通過單位時間內(nèi)吸光值變化計算酶活,不推薦同時測多個樣本。
        5、推薦使用樣本蛋白濃度計算酶活,若用樣本質(zhì)量計算,則需加測胞漿提取物酶活,上清和沉淀酶活之和方為總酶活。
        6、附:使用樣本鮮重計算公式:
        A、按微量玻璃比色皿計算
        單位的定義:37℃或25℃下每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol TNB定義為一個酶活力單位。
        CS上清(U/g 質(zhì)量)=ΔA上清÷ε×d×V反總÷W×V樣本÷V提?。?span style="font-family: Times New Roman, Times, serif">÷T=1061×ΔA上清÷W
        CS沉淀(U/g 質(zhì)量)=ΔA沉淀÷ε×d×V反總÷W×V樣本÷V樣總÷T=212×ΔA沉淀÷W
        CS(U/g 質(zhì)量)=CS上清+CS沉淀=1061×ΔA上清÷W+212×ΔA沉淀÷W
        ΔA上清:上清測定值;ΔA沉淀:沉淀測定值;εTNB的消光系數(shù),13.6×10-3mL/(nmol·cm);V反總:反應(yīng)體系總體積,0.2 mL;d:比色皿光徑,1cmV樣本:加入的樣本體積,0.007mLV提?。禾崛∫后w積,1.01mL;V樣總:溶解沉淀的總體積,0.202mL;T:反應(yīng)時間,2minW:樣本質(zhì)量,g。
        B、按96孔板計算
        將上述公式中的d=1cm改為d=0.6cm96孔板光徑)進行計算即可。
        實驗實例:

        1. 0.1g小鼠心臟樣本加入1mL提取液和10μL試劑二進行勻漿研磨,取上清后再離心,取上清,取沉淀后加入200μL劑一和2μL試劑二,之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測吸光度后計算上清中:ΔA1=A2-A1 =1.4577-0.8015=0.6562ΔA1’=A2’-A1’=0.7842-0.7331=0.0511,ΔA上清=ΔA1-ΔA1’=0.6051;沉淀中:ΔA1= A2 -A1 =0.4166-0.1303=0.2863,ΔA1’=A2’-A1’=0,ΔA沉淀=ΔA1-ΔA1’=0.2863,按樣本質(zhì)量計算酶活得:CSU/g 質(zhì)量)= CS上清+CS沉淀=1061×ΔA上清÷W+212×ΔA沉淀÷W

        = 1061×0.6051÷0.1+212×0.2863÷0.1=7027.067 U/g 質(zhì)量。
        相關(guān)發(fā)表文獻:

        1. Ming Song,Fangfang Chen,Yihui Li,et al. Trimetazidine restores the positive adaptation to exercise training by mitigating statin-induced skeletal muscle injury. Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle. November 2017;(IF10.754)

        2. Zhang J, Lv J, Xie J, et al. Nitrogen Source Affects the Composition of Metabolites in Pepper (Capsicum annuum L.) and Regulates the Synthesis of Capsaicinoids through the GOGAT–GS Pathway[J]. Foods, 2020, 9(2): 150.

        參考文獻:
        [1]  Agostinho F R, Réus G Z, Stringari R B, et al. Treatment with olanzapine, fluoxetine and olanzapine/fluoxetine alters citrate synthase activity in rat brain[J]. Neuroscience letters, 2011, 487(3): 278-281.
        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0310/BC0315 輔*NADH)含量檢測試劑盒
        BC1030/BC1035 NAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒
        BC0630/BC0635 NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒
        BC1130/BC1135 NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)活性檢測試劑盒

        檸檬酸合酶(CS)活性檢測試劑盒 微量法 檸檬酸合酶(CS)活性檢測試劑盒 微量法

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