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        • NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 輔酶系列
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        產(chǎn)品名稱:

        NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 輔酶系列

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-24
        儲存條件
        -20℃
        中文名稱
        NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 輔酶系列
        有效期
        6個月
        單位

        英文名稱
        NADH Oxidase(NOX) Activity Assay Kit
        檢測方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC0630
        規(guī)格50管/24樣供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途NADH氧化酶(NOX)活性檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒說明書
        可見分光光度法
        貨號:BC0630
        規(guī)格:50T/24S
        產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        試劑一液體25 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二液體5 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑三液體0.5 mL×1-20保存
        試劑四液體70 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑五液體10 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑六粉劑×2-20保存

        溶液的配制:
        試劑:臨用前加入9 mL雙蒸水,用不完的試劑-20℃分裝保存。
        產(chǎn)品說明
        NOX(EC 1.6.99.3)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,可在氧氣存在下,直接將NADH氧化為NAD+。該酶不僅參與NAD+的再生,而且與免疫反應(yīng)密切相關(guān)。
        NOX能夠?qū)?span style="font-family: Times New Roman, Times, serif;">NADH氧化為NAD+,NADH的氧化與2,6二氯酚靛藍(DCPIP)的還原相偶聯(lián),藍色的DCPIP被還原為無色的DCPIP,在600nm下測定藍色DCPIP的還原速率計算出NADH氧化酶活性的大小。
        注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
        自備的儀器和用品:
        可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。
        操作步驟:“具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件"
        注意事項:
        1、粗酶液的提取必須在0℃- 4℃中操作完成,以防止酶變性失活。
        2、比色皿中反應(yīng)液的溫度最好保持37℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
        3、最好兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結(jié)果的準確性。
        4、實驗時,試劑六樣本在冰上放置,以免變性和失活。
        5推薦使用樣本蛋白濃度計算酶活,若用樣本質(zhì)量計算,則需加測胞漿提取物酶活,上清和沉淀酶活之和方為總酶活。
        6、使用樣本鮮重計算公式
        單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘A600變化0.01定義為一個酶活力單位。
        NOX上清活性(U/g 質(zhì)量)=ΔA1÷0.01×V反總÷(W÷V提取×V)÷T=2525×ΔA1÷W
        NOX沉淀活性(U/g 質(zhì)量)=ΔA2÷0.01×V反總÷(W÷V樣總×V)÷T=505×ΔA2÷W
        NOX活性(U/g 質(zhì)量)= NOX上清+ NOX沉淀=2525×ΔA1÷W +505×ΔA2÷W
         ΔA1:上清測定值;ΔA2:沉淀測定值;V反總:反應(yīng)總體積,1mL;V樣:加入樣本體積,0.04mL;V提取:
        加入試劑一體積,1.01mL;V樣總:沉淀重懸體積,0.202mLW:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,1min。
        實驗實例:

        1. 取0.1g肺部樣本進行樣本處理,按照測定步驟操作,測得ΔA1=ΔA測定-ΔA對照=0.841-0.094-0.956-0.849=0.64,ΔA2=ΔA測定-ΔA對照=(0.945-0.471)-(1.009-0.982)=0.447,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

        NOX上清活性(U/g 質(zhì)量)=2525×ΔA1÷W=2525×0.64÷0.1=16160
        NOX沉淀活性(U/g 質(zhì)量)=505×ΔA2÷W=505×0.447÷0.1=2257.35
        NOX活性(U/g質(zhì)量)=NOX上清+NOX沉淀=2525×ΔA1÷W +505×ΔA2÷W
        =2525×0.64÷0.1+505×0.447÷0.1=16160+2257.35=18417.35 U/g 質(zhì)量

        1. 取0.1g葉片樣本進行樣本處理,按照測定步驟操作,測得ΔA1=ΔA測定-ΔA對照=0.875-0.812-(0.903-0.888)=0.048,ΔA2=ΔA測定-ΔA對照=0.919-0.868-0.91-0.879=0.02,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

        NOX上清活性(U/g 質(zhì)量)=2525×ΔA1÷W=2525×0.048÷0.1=1212
        NOX沉淀活性(U/g 質(zhì)量)=505×ΔA2÷W=505×0.02÷0.1=101
        NOX活性(U/g 質(zhì)量)=NOX上清+NOX沉淀=2525×ΔA1÷W +505×ΔA2÷W
        =2525×0.048÷0.1+505×0.02÷0.1=1313 U/g 質(zhì)量。
        相關(guān)發(fā)表文獻:

        1. Dou S, Liu S, Xu X, et al. Octanal inhibits spore germination of Penicillium digitatum involving membrane peroxidation[J]. Protoplasma, 2017, 254(4): 1539-1545.

        2. Liu P, Zhang H M, Hu K, et al. Sensory plasticity of carotid body is correlated with oxidative stress in paraventricular nucleus during chronic intermittent hypoxia[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(8): 13534-13543.

        3. Yongtao Du,Mengjie Zhao,Changtao Wang,et al. Identification and characterization of GmMYB118 responses to drought and salt stress. BMC Plant Biology. December 2018;(IF3.67)

        4. Youqiang Xu,Chunyan Xu,Xiuting Li,et al. A combinational optimization method for efficient synthesis of * by the recombinant Escherichia coli. Biochemical Engineering Journal. January 2018;(IF3.371)

        5. Weida Li,Kai Wang,Nanfang Jiang,et al. Antioxidant and antihyperlipidemic activities of purified polysaccharides from Ulva pertusa. Journal of Applied Phycology. April 2018;(IF4.784)

        參考文獻:

        1. Kawai S, Mori S, Mukai T, et al. Cytosolic NADP phosphatases I and II from Arthrobacter sp. strain KM: implication in regulation of NAD+/NADP+ balance[J]. Journal of Basic Microbiology: An International Journal on Biochemistry, Physiology, Genetics, Morphology, and Ecology of Microorganisms, 2004, 44(3): 185-196.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0310/BC0315 輔酶Ⅰ NADH含量檢測試劑盒
        BC1030/BC1035 NAD激酶NADK活性檢測試劑盒
        BC1040/BC1045 NAD-蘋果酸脫氫酶NAD-MDH活性檢測試劑盒

        NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 輔酶系列 NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒 輔酶系列


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