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        您的位置: 網(wǎng)站首頁 > 產(chǎn)品中心 > 生化檢測試劑盒-常量法 > 輔酶Ⅰ系列 > BC1030-50T/24SNAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒 輔酶
        • NAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒 輔酶
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        產(chǎn)品名稱:

        NAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒 輔酶

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-24
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        中文名稱
        NAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒 輔酶
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        NAD Kinase(NADK) Activity Assay Kit
        檢測方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S
        自備試劑
        該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC1030
        規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途NAD激酶(NADK)活性檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        NAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒說明書
        可見分光光度法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號(hào):BC1030
        規(guī)格:50T/24S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體30 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體10 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二液體25 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑三粉劑×1-20℃保存
        試劑四粉劑×1-20℃保存
        試劑五粉劑×2-20℃保存
        試劑六粉劑×1-20℃保存
        試劑七粉劑×12-8℃保存
        試劑八液體42 μL×1瓶2-8℃保存
        試劑九液體50 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑十液體100 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
        標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑三:用時(shí)加入3.75mL雙蒸水,充分溶解,可分裝保存,-20℃保存兩周,禁止反復(fù)凍融;臨用前取出一支稀釋100倍使用。

        2. 試劑四:用時(shí)加入2.5 mL雙蒸水,充分溶解,2-8℃保存;

        3. 試劑五:用時(shí)每瓶加入3 mL雙蒸水,充分溶解,2-8℃保存;

        4. 試劑六:用時(shí)加入6 mL雙蒸水,充分溶解,2-8℃保存;

        5. 試劑七:用時(shí)加入6 mL雙蒸水,充分溶解,2-8℃避光保存;

        6. 試劑八:液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前加入3 mL蒸餾水充分溶解,可分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

        7. 試劑十:自備95%乙醇;

        8. 標(biāo)準(zhǔn)品:加入1.9 mL蒸餾水,即得2 μmol/mL NADP標(biāo)品。臨用前稀釋100倍得20 nmol/mL NADP標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

        產(chǎn)品說明:
        NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)*[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)NADP(H)的平衡上具有重要作用。


        NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT),通過其在570nm的吸光值大小可反映出NADK活性的大小。
        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、無水乙醇、冰和蒸餾水。
        操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

        注意事項(xiàng):

        1. 樣本的處理必須在0℃-4℃中操作完成,以防止酶變性失活。建議在正式實(shí)驗(yàn)前,選取差別較大的兩個(gè)樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。

        2、試劑三、四、五、六、七、八在測定過程中都必須在冰上放置。
        3、當(dāng)初始吸光值大于0.6時(shí),建議將樣本用PBS稀釋后測量。
        4、若測量樣本數(shù)量過多,可以將試劑二、五、六、七按比例配成工作液使用。
        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1大鼠腎臟加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清稀釋2倍后按照測定步驟操作,測得A測定=0.455,A對(duì)照=0.213,計(jì)算ΔA測定=A測定-A對(duì)照=0.455-0.213=0.242,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.1662x-0.0343,計(jì)算x=0.242+0.0343/0.1662=1.66,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        NADK(U/g 質(zhì)量)=0.067×x÷W×稀釋倍數(shù)=0.067×1.66÷0.1×2=2.22 U/g 質(zhì)量。

        1. 取小鼠血漿直接檢測,測得A測定=0.131A對(duì)照=0.094,計(jì)算ΔA測定=A測定-A對(duì)照=0.131-0.094=0.037,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.1662x-0.0343,計(jì)算x=0.037+0.0343/0.1662=0.429,按血漿體積計(jì)算酶活得:

        NADK(U/mL=0.067×x =0.067×0.429=0.028 U/mL。
        參考文獻(xiàn):

        1. Pollak N, Niere M, Ziegler M. NAD kinase levels control the NADPH concentration in human cells[J]. Journal of Biological Chemistry, 2007, 282(46): 33562-33571.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0310/BC0315  輔酶Ⅰ NAD(H)含量檢測試劑盒
        BC1040/BC1045 NAD-蘋果酸脫氫酶(NAD-MDH)活性檢測試劑盒
        BC1050/BC1055 NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)活性檢測試劑盒
        BC0630/BC0635 NADH氧化酶(NOX)活性檢測試劑盒

        NAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒 輔酶 NAD激酶(NADK)活性檢測試劑盒 輔酶


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