谷*甘肽還原酶（GR）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號：BC1160
規(guī)格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入3mL蒸餾水溶解備用，2-8℃可保存4周；

2. 試劑三：試劑存于試劑瓶內玻璃瓶中；臨用前加入6mL蒸餾水溶解備用，-20℃可分裝保存4周，避免反復凍融。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、移液器、勻漿器/研缽/細胞超聲破碎儀、1mL石英比色皿、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：

1. 樣本處理等過程均需要在冰上進行，且須在當日測定酶活力，勻漿液避免反復凍融；

2. 測定前須先用1-2個樣做預實驗，哺乳動物組織一般須用試劑一稀釋2-5倍；

3. 由于試劑一中含有一定濃度的蛋白（約0.1mg/mL），所以在測定樣本蛋白濃度時需要減去試劑一本身的蛋白含量。

實驗實例：

1. 取0.1g桃樹葉片加入1.0 mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清液稀釋4倍按測定步驟檢測，ΔA測定管=A測1-A測2=1.033-0.953=0.08，ΔA空白管=A空1-A空2=0.768-0.762=0.006，按樣本質量計算酶活得：GR酶活(U/g 質量)=0.536×(ΔA測定管-ΔA空白管)÷W×4（稀釋倍數）=1.587 U/g 質量。

2. 取0.1g大鼠肝臟組織加入1.0 mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清液稀釋8倍按測定步驟檢測，ΔA測定管=A測1-A測2=0.886-0.533=0.353，ΔA空白管=A空1-A空2=0.768-0.762=0.006，按樣本質量計算酶活得：GR酶活(U/g 質量)=0.536×(ΔA測定管-ΔA空白管)÷W×8（稀釋倍數）=14.88 U/g 質量。

相關發(fā)表文獻：

1. Hua Li,Lanying Wang,Yanping Luo. Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (?)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan. Molecules. October 2018;(IF3.06)

2. Zeyong Zhang,Huanhuan Liu,Ce Sun,et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice. Journal of Plant Physiology.October 2018;(IF2.825)

3. Li S, Tian Y, Wu K, et al. Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture[J]. Nature, 2018, 560(7720)：595-600.

參考文獻：

1. Demiral T, Türkan I. Comparative lipid peroxidation, antioxidant defense systems and proline content in roots of two rice cul  tivars differing in salt tolerance[J]. Environmental and experimental botany, 2005, 53(3): 247-257.

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