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        • NADP磷酸酶(NADPase)活性檢測(cè)試劑盒 輔酶
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        • NADP磷酸酶(NADPase)活性檢測(cè)試劑盒 輔酶
        產(chǎn)品名稱:

        NADP磷酸酶(NADPase)活性檢測(cè)試劑盒 輔酶

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-24
        有效期
        6個(gè)月
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        單位

        英文名稱
        CoenzymeⅡ NADP(H) Content Assay Kit
        檢測(cè)方法
        可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S
        NADP磷酸酶(NADPase)活性檢測(cè)試劑盒 輔酶

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC1110
        規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途輔酶ⅡNADP(H)含量檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合


        NADP磷酸酶(NADPase)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
        可見(jiàn)分光光度法
        貨號(hào): BC1110
        規(guī)格: 50T/24S
        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體30 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑一液體20 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二粉劑×22-8℃保存
        試劑三粉劑×1 2-8℃保存
        試劑四粉劑×1 2-8℃保存
        試劑五液體20 mL×1 瓶常溫保存
        標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1 支2-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 試劑二:用時(shí)加入1.5 mL試劑一充分溶解備用,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        2. 試劑三:用時(shí)加入20 mL雙蒸水,溶解后2-8可保存一周。

        3. 試劑四:用時(shí)加入20 mL雙蒸水,溶解后2-8可保存一周。

        4. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液將標(biāo)準(zhǔn)品20倍稀釋,即取 0.5 mL標(biāo)準(zhǔn)液加9.5 mL蒸餾水,充分混勻,配制成0.5 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液。

        5. 定磷試劑的配制:按H2O試劑三試劑四試劑五=2:1:1:1的比例配制,配好的定磷試劑應(yīng)為淺黃色,若無(wú)色則試劑失效,若是藍(lán)色則為磷污染,定磷試劑根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量現(xiàn)用現(xiàn)配。

        注意:配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
        產(chǎn)品說(shuō)明:
        NADPase主要存在于植物組織中,是生物體內(nèi)催化NADP+降解為NAD+的酶,與NADK一起調(diào)控NADNADP之間的平衡。
        NADPase能夠催化NADP+水解為NAD+和無(wú)機(jī)磷的反應(yīng),通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)測(cè)定NADPase活性。
        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
        需自備的儀器和用品:
        可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL玻璃比色皿、勻漿器/研缽和蒸餾水。
        操作步驟具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

        注意事項(xiàng):

        1. 此法具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。所以對(duì)測(cè)定所用試管要求嚴(yán)格,要沒(méi)有一點(diǎn)磷,若試管放過(guò)磷酸或磷酸鹽緩沖液,一定要洗得非常干凈,要先用洗潔精加水煮,再用自來(lái)水沖,最后用蒸餾水沖干凈。最好用一次性塑料管或新玻璃管,避免磷污染是檢測(cè)成敗的關(guān)鍵。

        2. 由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),所以在測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需要減去提取液本身的蛋白含量。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1肝加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清之后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.410-0.385=0.025,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.365-0.005=0.360,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得NADPase (U/g質(zhì)量)=0.125×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.125×0.025÷0.360÷0.1=0.087 U/g質(zhì)量。

        2. 取0.1g狗尾巴草(塊根)加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清之后按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定= A測(cè)定-A對(duì)照=0.510-0.107=0.403,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.365-0.005=0.360,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得NADPase (U/g質(zhì)量) =0.125×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.125×0.403÷0.360÷0.1=1.399 U/g質(zhì)量。

        參考文獻(xiàn):

        1. Kawai S, Mori S, Mukai T, et al. Cytosolic NADP phosphatases I and II from Arthrobacter sp. strain KM: implication in regulation of NAD+/NADP+ balance[J]. Journal of Basic Microbiology: An International Journal on Biochemistry, Physiology, Genetics, Morphology, and Ecology of Microorganisms, 2004, 44(3): 185-196.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0260/BC0265 6-磷酸葡萄糖脫氫酶G6PDH活性檢測(cè)試劑盒
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        BC2100/BC2105 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶6PGDH活性檢測(cè)試劑盒

        NADP磷酸酶(NADPase)活性檢測(cè)試劑盒 輔酶  NADP磷酸酶(NADPase)活性檢測(cè)試劑盒 輔酶


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