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        • 乙酰輔酶羧化酶活性檢測試劑盒 微量法
        • 乙酰輔酶羧化酶活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        乙酰輔酶羧化酶活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-24
        儲存條件
        -20℃
        有效期
        6個月
        中文名稱
        乙酰輔酶羧化酶活性檢測試劑盒 微量法
        單位

        英文名稱
        Acetyl CoA carboxylase(ACC) Activity Assay Kit(Enzymatic method)
        檢測方法
        微量法
        規(guī)格
        100T/96S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC6025
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途乙酰輔酶羧化酶活性檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        乙酰輔酶羧化酶(ACC)活性檢測試劑盒(酶法)說明書

        微量法

        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。

        貨號:BC6025

        規(guī)格:100T/96S

        產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液一

        液體110 mL×1瓶

        2-8℃保存

        提取液二

        液體0.6 mL×2支

        -20℃保存

        試劑一A

        液體6 mL×1瓶

        2-8℃保存

        試劑一B

        粉劑×1

        -20℃保存

        試劑二

        粉劑×1

        -20℃保存

        試劑三

        液體25 μL×1支

        2-8℃保存

        試劑四

        液體10 μL×1支

        2-8℃保存

        試劑五

        粉劑×1

        -20℃保存

        試劑六

        粉劑×1

        -20℃保存

        溶液的配制:

        1.提取液二:為易揮發(fā)試劑,用完后盡快密封,-20℃保存。

        2.提取液的配制:按提取液一:提取液二=990μL:10μL的比例配制,根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用,禁止將提取液二一次性全部加入提取液一中。

        3.試劑一:臨用前將試劑一B全部倒入試劑一A,充分溶解待用;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融。

        4.試劑二:試劑放于棕色瓶內(nèi)玻璃瓶中,臨用前加入5 mL蒸餾水,充分溶解待用;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融。

        5.試劑三稀釋液:臨用前離心,根據(jù)樣本量按照試劑三:蒸餾水=1μL:50μL(共51μL,約5T)的比例充分混勻,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        6.試劑四稀釋液:臨用前離心,根據(jù)樣本量按照試劑四:蒸餾水=1μL:125μL(共126μL,約12T)的比例充分混勻,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        7.試劑五:試劑放于棕色瓶內(nèi)玻璃瓶中,臨用前加入5 mL蒸餾水;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融。

        8.試劑六:試劑放于棕色瓶內(nèi)玻璃瓶中,臨用前加入5 mL蒸餾水;可分裝后-20℃保存4周,避免反復(fù)凍融。

        9.工作液的配制:臨用前根據(jù)樣本量按試劑三稀釋液:試劑四稀釋液:試劑五:試劑六=50μL:50μL:200μL:200μL(共500μL,約5T)的比例配制,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        產(chǎn)品說明:

        乙酰輔酶羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACC)在生物體內(nèi)催化乙酰輔酶羧化生成丙二酰輔酶,是脂肪酸和許多次生代謝產(chǎn)物合成的關(guān)鍵酶。ACC的活性在一定程度上決定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。

        ACC能夠催化乙酰輔酶、NaHCO3和ATP生成丙二酰輔酶、ADP和無機(jī)磷,丙 酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH生成NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映ACC活性。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

        需自備的儀器和用品:

        紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、分析天平、低溫離心機(jī)、微量石英比色皿/96UV板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、漩渦震蕩儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、蒸餾水和冰。

         

        操作步驟:具體的操作步驟請見“產(chǎn)品資料"文件

         

        注意事項(xiàng):

        1、 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃水浴鍋

        中,在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。

        2、 最好兩個人同時做此實(shí)驗(yàn),一個人比色,一個人計(jì)時,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

        3、 當(dāng)A1測定空白時,建議將樣本用蒸餾水稀釋后再進(jìn)行測定;當(dāng)樣本?A過小時,建議增大樣本量或延長反應(yīng)時間,注意同步修改計(jì)算公式。

        4、 由于提取液一中含有蛋白(約1mg/mL),若需要測定樣本的蛋白濃度,需要減去提取液本身的蛋白濃度。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 取0.1044g小鼠腦組織,加入1mL提取液,進(jìn)行勻漿、離心、取上清,之后按照測定步驟操作,用96孔UV板測得計(jì)算ΔA=A1測定-A2測定)-A1空白-A2空白)=0.828-0.162-0.788-0.774=0.652,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        ACC酶活(U/g 質(zhì)量)=535.9×?A÷W=3346.8 U/g 質(zhì)量。

        2. 取0.1041g向日葵葉片組織,加入1mL提取液,進(jìn)行勻漿、離心、取上清,之后按照測定步驟操作,用96孔UV板測得計(jì)算ΔA=A1測定-A2測定)-A1空白-A2空白)=0.841-0.811-0.788-0.774=0.016,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

        ACC酶活(U/g 質(zhì)量)=535.9×?A÷W=82.37 U/g 質(zhì)量。

        3. 取3×106個Raw細(xì)胞,加入1mL提取液,進(jìn)行勻漿、離心、取上清,之后按照測定步驟操作,用96孔UV板測得計(jì)算ΔA=A1測定-A2測定)-A1空白-A2空白)=0.655-0.557-0.788-0.774=0.084,按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算酶活得:

        ACC酶活(U/106 cell)=535.9×?A÷N=15.01 U/106 cell。

        4. 取30μL兔血清,按照測定步驟操作,用96孔UV板測得計(jì)算ΔA=A1測定-A2測定)-A1空白-A2空白)=0.846-0.810-0.788-0.774=0.022,按樣本血清(漿)體積計(jì)算酶活得:

        ACC酶活(U/mL=[?A×V反總÷(?×d×109]÷V樣÷T=178.63?×A=3.93U/mL

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC1080/BC1085  乙醇脫氫酶(ADH)活性檢測試劑盒

        BC2350/BC2355  ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測試劑盒

        BC0750/BC0755  乙醛脫氫酶(ALDH)活性檢測試劑盒


        乙酰輔酶羧化酶活性檢測試劑盒 微量法 乙酰輔酶羧化酶活性檢測試劑盒 微量法

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