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        • 多酚氧化酶生化檢測試劑盒可見分光光度法
        產(chǎn)品名稱:

        多酚氧化酶生化檢測試劑盒可見分光光度法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-24
        儲存條件
        2-8℃
        中文名稱
        多酚氧化酶生化檢測試劑盒可見分光光度法
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Polyphenol Oxidase(PPO) Activity Assay Kit
        檢測方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC0190
        規(guī)格50管/24樣供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途PPO主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合

        多酚氧化酶(PPO)活性檢測試劑盒說明書

        可見分光光度法
        注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
        貨號:BC0190
        規(guī)格:50T/24S
        產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱規(guī)格保存條件
        提取液液體30 mL×1瓶2-8℃保存
        粉劑一粉劑×12-8℃保存
        試劑一液體40 mL×1瓶2-8℃保存
        試劑二液體10 mL×1瓶2-8℃保存

        溶液的配制:

        1. 提取液:臨用前將粉劑一倒入提取液中,溶液為懸濁液,使用前需搖勻。

        產(chǎn)品簡介:
        PPO主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。
        PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生鄰苯二醌,后者在410nm有特征光吸收。
        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
        需自備的儀器和用品:
        可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
        操作步驟:
        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        1. 收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200W,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。

        2. 稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。

        3. 血清(漿):直接檢測。若有渾濁請離心后去上清使用。

        二、測定步驟

        1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至410nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 樣本測定(在EP管中依次加入下列試劑)




        試劑名稱(μL測定管對照管
        試劑一600600
        試劑二150150
        樣本150-
        煮沸的樣本-150

        37℃(哺乳動(dòng)物)25℃(其它物種)中準(zhǔn)確水浴10min后,迅速放入沸水中加熱10min。冷卻后,5000g,常溫離心10min,收集上清,410nm處檢測測定管和對照管吸光度,計(jì)算ΔA=A測定-A對照。
        注意:每個(gè)測定管需要設(shè)置一個(gè)對照管,可以在不同對照管中加入不同樣本的粗酶液,然后集中進(jìn)行5min沸水浴處理。
        三、PPO活性計(jì)算
        (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
        單位的定義:每分鐘每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中使410nm處吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
        PPO活性(U/mg prot)= ΔA÷0.01×V反總÷(Cpr×V樣)÷T =60×ΔA÷Cpr
        (2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
        單位的定義:每分鐘每g組織在每mL反應(yīng)體系中使410nm處吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
        PPO活性(U/g 質(zhì)量)=ΔA÷0.01×V反總÷W÷V樣總×V樣)÷T =60×ΔA÷W
        (3)按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
        單位的定義:每分鐘每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中使410nm處吸光值變化0.01定義為一個(gè)酶活力單位。
        PPO活性(U/104 cell)= ΔA÷0.01×V反總÷500÷V樣總×V樣)÷T =0.12×ΔA
        V反總:反應(yīng)體系總體積,0.9mL;V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.15mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量,500萬;T:反應(yīng)時(shí)間,10min。
        注意事項(xiàng):
        不同樣本的多酚氧化酶最佳的反應(yīng)溫度略有差別,可在25-37℃之間進(jìn)行調(diào)節(jié)。
        相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

        1. Li B, Ding Y, Tang X, et al. Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)[J]. Food and Bioprocess Technology, 2019, 12(4): 563-574.

        2. B Li,Y Ding, X Tang,et al. MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway. Journal of Receptor and Signal Transduction Research. August 2018;(IF2.998)

        參考文獻(xiàn):

        1. González, Eva M, De Ancos B , Cano M P . Partial Characterization of Polyphenol Oxidase Activity in Raspberry Fruits[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1999, 47(10):4068-4072.

        2. Hong‐Wei Zhou, Feng X . Polyphenol oxidase from yali pear (Pyrus bretschneideri)[J]. Journal of the Science of Food & Agriculture, 1991, 57(3):307-313.

        3. Tang W, Newton R J . Increase of polyphenol oxidase and decrease of polyamines correlate with tissue browning in Virginia pine (Pinus virginiana Mill.)[J]. plant science, 2004, 167(3):621-628.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:
        BC0210/BC0215  苯*解氨酶(PAL)活性檢測試劑盒
        BC0170/BC0175  超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒
        BC0200/BC0205  過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒
        BC0090/BC0095  過氧化物酶(POD)活性檢測試劑盒

        多酚氧化酶生化檢測試劑盒可見分光光度法  多酚氧化酶生化檢測試劑盒可見分光光度法


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