土壤硝態(tài)氮含量檢測試劑盒

可見分光光度法

注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。

貨號：BC0040

規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 試劑一：臨用前取1瓶加入2 mL濃硫酸充分溶解。配制好后盡快使用，2-8℃可保存一周。

2、 標準品：10 mg硝酸鉀。臨用前加入1.386 mL蒸餾水溶解，配成1000 μg/mL的NO₃^--N標準液，2-8℃保存兩周。

產(chǎn)品說明：

硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素，土壤中硝態(tài)氮是高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接關(guān)系到作物的產(chǎn)量與品質(zhì)。在濃酸條件下，NO₃^-與水楊酸反應(yīng)生成硝基水楊酸，在堿性條件下（pH>12）呈黃色，其顏色深淺與含量成正比，即可計算得硝態(tài)氮含量。

技術(shù)指標：

*檢出限：0.0495 μg/mL

線性范圍：0.1953125-80 μg/mL

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、振蕩器、濃硫酸、蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

按照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積（mL）為 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g土樣，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，置于震蕩儀中振蕩提取1h，10000g，25℃離心10min，取上清待測。（土樣要求參考注意事項1.2.3.）。

二、測定步驟

1、 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至410nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 標準溶液的稀釋：取25μL 1000μg/mL NO₃^--N標準液，加入975μL蒸餾水，充分混勻，配制成25μg/mL標準液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實驗中每管需要40μL，為減小實驗誤差，故配制大體積）。

3、 操作表：

三、NO₃^--N含量的計算

NO₃^--N含量（μg/g 土樣）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準×V提取÷W=25×ΔA測定÷ΔA標準÷W

W：樣本質(zhì)量，g；C標準：標準溶液濃度，25μg/mL；V提?。禾崛∫后w積，1mL。

注意事項：

1、 土壤膠體不吸附硝酸根離子，且其易溶于水，在土壤內(nèi)部移動，所以測定多個樣本或者重復(fù)樣本室注意保持相同的采樣深度。

2、 土壤經(jīng)風(fēng)干或者烘干很容易引起硝態(tài)氮含量的變化，所以建議采用新鮮土壤進行測定。樣品采集后應(yīng)于4℃ 下密封運輸和保存，并在3d內(nèi)分析完畢。否則，應(yīng)于-20℃（深度冷凍）下以小塊、小份保存，樣品中硝酸鹽氮可以保存數(shù)周。當(dāng)測定深度冷凍的硝酸鹽氮含量時，應(yīng)控制解凍的溫度和時間。室溫環(huán)境下解凍時，需在4 h內(nèi)完成樣品解凍、勻質(zhì)化和提取；如果在4℃下解凍，解凍時間不應(yīng)超過48 h。

3、 如果要比較不同樣本間的硝態(tài)氮含量，需將土樣烘干后按干重計算后再進行比較。

4、 試劑一和試劑二均具有強腐蝕性，操作時需做好防護措施。

5、 如果吸光值大于1.5，建議將樣本用蒸餾水稀釋后再進行測定。

參考文獻：

[1] Vendrell P F, Zupancic J. Determination of soil nitrate by transnitration of salicylic acid[J]. Communications in Soil Science and Plant Analysis, 1990, 21(13-16): 1705-1713.

[2] Cataldo D A, Maroon M, Schrader L E, et al. Rapid colorimetric determination of nitrate in plant tissue by nitration of salicylic acid[J]. Communications in soil science and plant analysis, 1975, 6(1): 71-80.

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