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        • 白蛋白含量檢測試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        白蛋白含量檢測試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-23
        有效期
        6個月
        儲存條件
        -20℃
        中文名稱
        白蛋白含量檢測試劑盒
        單位

        英文名稱
        Albumin Content Assay Kit (Bromocresol Purple Colorimetry)
        檢測方法
        可見分光光度法
        規(guī)格
        50T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC5820
        規(guī)格50T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途白蛋白含量檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        白蛋白含量檢測試劑盒(溴甲酚紫顯色法)說明書

        可見分光光度

        貨號:BC5820

        規(guī)格:50T/48S

        產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液

        液體60 mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體0.24 mL×1

        2-8℃保存

        試劑二

        液體60 mL×1

        2-8℃保存

        試劑三

        液體0.8 mL×1

        2-8℃保存

        標(biāo)準(zhǔn)品

        液體1 mL×1

        -20℃保存

        溶液的配制:

        1、 顯色液:臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑一:試劑二:試劑三=10μL: 3990μL :40μL4040μL4T)的比例配制顯色液,充分混勻,現(xiàn)配現(xiàn)用;

        2、 標(biāo)準(zhǔn)品:10mg/mL白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液。臨用前取50μL10mg/mL白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液,加入150μL提取液,配制成2.5mg/mL白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        產(chǎn)品說明:

        白蛋白是人體血漿中最主要的蛋白質(zhì),由肝臟合成,是人體內(nèi)一種重要的營養(yǎng)物質(zhì),可以維持血漿滲透壓,并可與多種營養(yǎng)物質(zhì)、激素和藥物相結(jié)合。白蛋白含量可以反映機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài),也可排查影響肝臟代謝功能的疾病,如肝硬化、肝損傷、營養(yǎng)不良、惡性腫瘤等。

        在酸性環(huán)境下,白蛋白分子帶正電荷,與帶負(fù)電荷的溴甲酚紫(Bromocresol Purple,BCP)結(jié)合生成綠色復(fù)合物,在603nm處有特定吸收峰,該復(fù)合物吸光值與白蛋白濃度成正比。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

        需自備的儀器和用品:

        可見分光光度計、低溫離心機(jī)、分析天平、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

        操作步驟:

        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        1. 組織樣本:按質(zhì)量(g: 提取液體積(mL1 : 5~10比例加入提取液(建議稱取0.1g樣本,加入1.0mL提取液),冰浴勻漿后,于4℃,8000g,離心10min,棄沉淀,取上清液置于冰上待測。

        2. 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:按細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(106):提取液體積(mL5~10: 1的比例加入提取液(建議5細(xì)菌/細(xì)胞加入1.0mL提取液),冰浴超聲破碎細(xì)菌/細(xì)胞(功率200W,超聲3s,間隔7s,總時間5min),然后于4℃,8000g,離心10min,棄沉淀,取上清液置于冰上待測。

         

        3. 液體樣本:直接測定。若液體有渾濁則離心取上清測定。

        二、測定步驟

        1.可見分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至603nm,蒸餾水調(diào)零。

        2.操作表:(1mL玻璃比色皿中加入下列試劑)

        試劑名稱(μL

        測定管

        標(biāo)準(zhǔn)管

        空白管

        樣本

        100

        -

        -

        標(biāo)準(zhǔn)品

        -

        100

        -

        提取液

        -

        -

        100

        顯色液

        1000

        1000

        1000

        混勻,常溫靜置1min,于603nm處測定各管吸光值,分別記為A測定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,計算ΔA測定=A測定-A空白,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白??瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)管只需測1-2次。

        注意:靜置時間長短會影響檢測結(jié)果,建議直接在1mL玻璃比色皿中直接反應(yīng)1min,測定吸光值。

        三、白蛋白含量計算

        1. 按樣本蛋白濃度計算

        白蛋白含量(mg/mg prot= ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V÷V×Cpr=2.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr

        2. 按樣本質(zhì)量計算

        白蛋白含量(mg/g 質(zhì)量)= ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V÷W×V÷V樣總=2.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

        3. 細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量計算

        白蛋白含量(mg/106 cell=ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V÷V×N÷V樣總=2.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷N

        4. 按液體體積計算

        白蛋白含量(mg/mL= ΔA測定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V÷V= 2.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)

        C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,2.5mg/mL;V樣:加入樣本體積,0.1mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;N:細(xì)菌/細(xì)胞總數(shù),以106計。

        注意事項(xiàng):

        1、 如果?A測定小于0.005或測定管吸光值接近空白管,可以增加樣本量后再進(jìn)行測定;如果?A測定大于0.5,建議將樣本上清用提取液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。注意同步修改計算公式。

        2、 如果樣本加入顯色劑后出現(xiàn)渾濁,建議將樣本上清用提取液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。注意同步修改計算公式。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 100μL人血清樣本,用提取液稀釋10倍,按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算:ΔA測定=A測定-A空白=0.524-0.121= 0.403,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.387-0.121=0.266,按液體體積計算得:

        白蛋白含量(mg/mL=2.5×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×10 =37.876 mg/mL。

        參考文獻(xiàn):

        [1] Tada S, Yasukawa K, Yatomi Y, et al. A simple colorimetric assay to determine the concentration and proportion of human mercaptalbumin[J]. Practical Laboratory Medicine, 2022, 31: e00281.

        [2] Muramoto Y , Matsushita M , Irino T .Reduction of reaction differences between human mercaptalbumin and human nonmercaptalbumin measured by the bromcresol purple method[J].Clinica Chimica Acta, 1999, 289(1-2):69-78.


        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC1270/BC1275 蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒

        BC3180/BC3185 雙縮脲法蛋白含量檢測試劑盒


        白蛋白含量檢測試劑盒

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