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        • 白蛋白含量檢測(cè)試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        白蛋白含量檢測(cè)試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-23
        有效期
        6個(gè)月
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        中文名稱
        白蛋白含量檢測(cè)試劑盒 微量法
        單位

        英文名稱
        Albumin Content Assay Kit (Bromocresol Green Colorimetry)
        檢測(cè)方法
        微量法
        規(guī)格
        100T/96S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC5835
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途白蛋白含量檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        白蛋白含量檢測(cè)試劑盒(溴甲酚綠顯色法)說明書

        微量法

        貨號(hào):BC5835

        規(guī)格:100T/96S

        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液

        液體110 mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體0.28 mL×1

        2-8℃保存

        試劑二

        液體25 mL×1

        2-8℃保存

        試劑三

        液體0.3 mL×1

        2-8℃保存

        標(biāo)準(zhǔn)品

        液體1mL×1

        -20℃保存

        溶液的配制:

        1、 顯色液:臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑一:試劑二:試劑三=10μL: 990μL:10μL1010μL,5T)的比例配制顯色液,充分混勻,現(xiàn)配現(xiàn)用;

        2、 標(biāo)準(zhǔn)品: 10mg/mL白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液。臨用前取200μL10mg/mL白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液,加入200μL提取液,配制成5mg/mL白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        產(chǎn)品說明:

        白蛋白是人體血漿中最主要的蛋白質(zhì),由肝臟合成,是人體內(nèi)一種重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可以維持血漿滲透壓,并可與多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和藥物相結(jié)合。白蛋白含量可以反映機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀態(tài),也可排查影響肝臟代謝功能的疾病,如肝硬化、肝損傷、營(yíng)養(yǎng)不良、惡性腫瘤等。

        血清白蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷,在有非離子型表面活性劑存在時(shí),可與帶負(fù)電荷的染料溴甲酚綠結(jié)合形成藍(lán)綠色復(fù)合物,在波長(zhǎng)630nm處有吸收峰,其顏色深淺與白蛋白濃度成正比例。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

        需自備的儀器和用品:

        可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、分析天平、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

        操作步驟:

        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        1. 組織樣本:按質(zhì)量(g: 提取液體積(mL1 : 5~10比例加入提取液(建議稱取0.1g樣本,加入1.0mL提取液),冰浴勻漿后,于4℃8000g,離心10min,棄沉淀,取上清液置于冰上待測(cè)。

        2. 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:按細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(106):提取液體積(mL5~10 : 1的比例加入提取液(建議5百萬細(xì)菌/細(xì)胞加入1.0mL提取液),冰浴超聲破碎細(xì)菌/細(xì)胞(功率200W,超聲3s,間隔7s,總時(shí)間5min),然后于4℃,8000g,離心10min,棄沉淀,取上清液置于冰上待測(cè)。

         

        3. 液體樣本:直接測(cè)定。若液體有渾濁則離心取上清測(cè)定。

        二、測(cè)定步驟

        1.可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至630nm,可見分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

        2.操作表:(微量玻璃比色皿/96孔板中加入下列試劑)

        試劑名稱(μL

        測(cè)定管

        標(biāo)準(zhǔn)管

        空白管

        樣本

        20

        -

        -

        標(biāo)準(zhǔn)品

        -

        20

        -

        提取液

        -

        -

        20

        顯色液

        200

        200

        200

        混勻,常溫靜置20s,于630nm處測(cè)定各管吸光值,分別記為A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)1-2次。

        注意:靜置時(shí)間長(zhǎng)短會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果,建議直接在微量玻璃比色皿/96孔板中直接反應(yīng)20s,測(cè)定吸光值。

        三、白蛋白含量計(jì)算

        1. 按樣本蛋白濃度計(jì)算

        白蛋白含量(mg/mg prot= ΔA測(cè)定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V÷V×Cpr=5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr

        2. 按樣本質(zhì)量計(jì)算

        白蛋白含量(mg/g 質(zhì)量)= ΔA測(cè)定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V÷W×V÷V樣總)=5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

        3. 按細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

        白蛋白含量(mg/106 cell=ΔA測(cè)定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V÷V×N÷V樣總)=5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷N

        4. 按液體體積計(jì)算

        白蛋白含量(mg/mL= ΔA測(cè)定×C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn))×V÷V= 5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)

        C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,5 mg/mLV樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;N:細(xì)菌/細(xì)胞總數(shù),以106計(jì)。

        注意事項(xiàng):

        1、 如果?A測(cè)定小于0.010或測(cè)定管吸光值接近空白管,可以增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定;如果?A測(cè)定大于0.5,建議將樣本上清用提取液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。

        2、 如果樣本加入顯色劑后出現(xiàn)渾濁,建議將樣本上清用提取液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 20μL人血清樣本,用提取液稀釋10倍,按照測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得計(jì)算:ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白=0.426-0.124=0.302,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.406-0.124=0.282,按液體體積計(jì)算得:

        白蛋白含量(mg/mL=5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×10(稀釋倍數(shù))=53.546 mg/mL。

        參考文獻(xiàn):

        [1] Tada S, Yasukawa K, Yatomi Y, et al. A simple colorimetric assay to determine the concentration and proportion of human mercaptalbumin[J]. Practical Laboratory Medicine, 2022, 31: e00281.

        [2] Khalifa F .Quantitative Determination of Albumin in Serum (By Bromocresol Green)[J]. 2020.

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC1270/BC1275 蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè)試劑盒

        BC3180/BC3185 雙縮脲法蛋白含量檢測(cè)試劑盒


         白蛋白含量檢測(cè)試劑盒 微量法 白蛋白含量檢測(cè)試劑盒 微量法

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