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        • 土壤中性木聚糖酶活性檢測試劑盒
        產(chǎn)品名稱:

        土壤中性木聚糖酶活性檢測試劑盒

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時間: 2024-04-23
        儲存條件
        2-8℃
        有效期
        6個月
        中文名稱
        土壤中性木聚糖酶活性檢測試劑盒
        單位

        英文名稱
        Soil Neutral Xylanase(S-NEX)Activity Assay Kit
        檢測方法
        可見分光光度法
        規(guī)格
        50T/24S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號BC5730
        規(guī)格50T/24S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途土壤酸性木聚糖酶活性檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        土壤中性木聚糖酶(S-NEX)活性檢測試劑盒說明書

        可見分光光度法

        貨號:BC5730

        規(guī)格:50T/24S

        產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        緩沖液

        液體25mL×1瓶

        2-8℃保存

        試劑一

        液體12mL×1瓶

        2-8℃保存

        試劑二

        液體16mL×1瓶

        2-8℃保存

        標準品

        粉劑×1

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、 標準品:10mg木糖。臨用前加入667μL蒸餾水配制成100μmol/mL的木糖標準液,2-8℃保存8周。

        產(chǎn)品說明:

        土壤中性木聚糖酶(Soil neutral xylanase, S-NEX),又稱為土壤中性半纖維素酶,主要分離自最適生長pH6-8的微生物。

        在中性環(huán)境中,S-NEX催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計算S-NEX活性。

        注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

        需自備的儀器和用品:

        可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、天平、低溫離心機、水浴鍋、研缽、30~50目篩、蒸餾水。

        操作步驟:具體的操作步驟請見“產(chǎn)品資料"文件

        一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻

        新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。

        二、測定步驟

        1、 可見分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。

        2、 標準品的稀釋:臨用前將標準品用蒸餾水稀釋為1.5、1.2、1、0.80.6、0.4μmol/mL的標準溶液待測。

        3、 標準品稀釋表:

        序號

        稀釋前濃度(μmol/mL

        標準品體積(μL

        蒸餾水體積(μL

        稀釋后濃度(μmol/mL

        1

        100

        100

        900

        10

        2

        10

        150

        850

        1.5

        3

        10

        120

        880

        1.2

        4

        10

        150

        1350

        1

        5

        1

        400

        100

        0.8

        6

        1

        300

        200

        0.6

        7

        1

        200

        300

        0.4

        備注:實驗中每管需要300μL。

        4、 樣本測定(在EP管中加入下列試劑)

        試劑名稱(μL

        對照管

        測定管

        空白管

        標準管

        樣本

        0.1g

        0.1g

        -

        -

        緩沖液

        400

        400

        -

        -

        試劑一

        -

        200

        -

        -

        渦旋混勻,置于50℃水浴鍋中反應(yīng)2h,立即沸水浴中10min滅活。(注意不要讓蓋子爆開,以免進水,改變了反應(yīng)體系),冷卻至室溫。

        -

        -

        試劑一

        200

        -

        -

        -

        常溫,12000g離心10min,取上清

        -

        -

        上清液

        300

        300

        -

        -

        蒸餾水

        -

        -

        300

        -

        標準品

        -

        -

        -

        300

        試劑二

        200

        200

        200

        200

        渦旋混勻,沸水浴中準確顯色5min(注意不要讓蓋子爆開,以免進水改變了反應(yīng)體系),冷卻至室溫。

        蒸餾水

        500

        500

        500

        500

        充分混勻,于1mL玻璃比色皿中測定540nm下的吸光度,分別記為A對照、A測定、A空白、A標準。計算ΔA測定=A測定-A對照,ΔA標準=A標準-A空白。空白管和標準曲線只需測1-2次。每個測定管需設(shè)一個對照管。


        注意事項:

        1. 若樣本ΔA<0.01,可適當增大樣本量或者延長50℃反應(yīng)時間后測定;若樣本ΔA>1.5或者A測定>1.5時,可用蒸餾水稀釋上清液后測定,注意同步修改計算公式中的稀釋倍數(shù)。

        2. 建議使用螺旋管,防止沸水浴過程中蓋子爆開,改變反應(yīng)體系。

        實驗實例:

        1、 取0.1g野蘑菇土,按操作表進行第一步反應(yīng)2h后,取上清液用蒸餾水稀釋2倍后按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得ΔA測定=A測定- A對照=0.498-0.108=0.390,帶入標曲y=0.5887x-0.1537(R2=0.9982),計算x=0.924,按樣本質(zhì)量計算S-NEX活性得:

        S-NEX活性(U/g 土樣)=0.3× x÷W×F =5.544 U/g 土樣。

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC5720/BC5725  土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)活性檢測試劑盒

        BC5740/BC5745  土壤堿性木聚糖酶(S-BAX)活性檢測試劑盒


        土壤中性木聚糖酶活性檢測試劑盒 土壤中性木聚糖酶活性檢測試劑盒


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