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        • 多胺氧化酶(PAO)活性檢測(cè)試劑盒 土壤
        產(chǎn)品名稱:

        多胺氧化酶(PAO)活性檢測(cè)試劑盒 土壤

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-04-19
        多胺氧化酶(PAO)活性檢測(cè)試劑盒 土壤
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        Polyamine Oxidase (PAO)Activity Assay Kit
        檢測(cè)方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC5220
        規(guī)格50T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途多胺氧化酶(PAO)活性檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        多胺氧化酶(PAO)活性檢測(cè)試劑盒說明書

        可見分光光度法

        貨號(hào):BC5220

        規(guī)格:50T/48S

        產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液

        液體60mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體35mL×1

        2-8℃保存

        試劑二

        液體3.5mL×1

        2-8℃保存

        試劑三

        液體3.5mL×1

        2-8℃保存

        試劑四

        液體3mL×1

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、 工作液:臨用前根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需量按照試劑一:試劑二:試劑三=600μL60μL60μL(約1T)的比例配制工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

        產(chǎn)品說明:

        多胺氧化酶(Polyamine Oxidases,PAO)是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶,多胺能夠與核酸、蛋白質(zhì)、細(xì)胞膜分子互作,直接影響細(xì)胞的生長、分化和凋亡,而PAO可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)多胺水平和生成物的濃度,參與各種植物體對(duì)逆境脅迫的反應(yīng)和生長發(fā)育過程。

        PAO催化多胺氧化生成H2O2,過氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解,同時(shí)將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì),在500nm處有特征吸收峰,顏色深淺與PAO活性成線性關(guān)系

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

        需自備的儀器和用品:

        可見分光光度計(jì)、天平、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺(tái)式低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰、蒸餾水。

        操作步驟:

        一、樣本的處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        1. 組織:按照組織質(zhì)量(g)︰提取液體積(mL)為15~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿。于4℃10000g離心10min,取上清,置于冰上待測(cè)。

        2. 細(xì)胞或細(xì)菌:按照細(xì)胞或細(xì)菌數(shù)量(104個(gè))︰提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞或細(xì)菌加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞或細(xì)菌(功率200W,超聲3s,間隔7s,總時(shí)間3min),于4℃10000g離心10min,取上清,置于冰上待測(cè)。

        3. 液體:直接測(cè)定。若有沉淀,離心后測(cè)定。


        二、測(cè)定步驟

        1、 可見分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至500nm,蒸餾水調(diào)零。

        2、 測(cè)定前將工作液37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱預(yù)熱10min以上。

        3、操作表:在EP管中分別加入下列試劑:

        試劑名稱(μL

        測(cè)定管

        空白管

        工作液

        700

        700

        試劑四

        50

        50

        上清液

        250

        -

        蒸餾水

        -

        250

        充分混勻,于500 nm處測(cè)定30s吸光度A1,然后在37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱反應(yīng)1h,測(cè)定1h30s吸光度A2,計(jì)算ΔA=A2-A1??瞻坠苤恍枳?/span>1-2次。若反應(yīng)1h后有沉淀,4℃離心后取上清測(cè)定。

        三、計(jì)算公式

        1. 按照樣本蛋白濃度計(jì)算

        酶活單位定義:在每毫升反應(yīng)體系中,每毫克蛋白每分鐘催化在500nm處吸光值增加0.001定義為一個(gè)酶活力單位。

        PAO活性(U/mg prot=ΔA×V÷V×Cpr÷T÷0.001×F=66.67×ΔA÷Cpr×F

        2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

        酶活單位定義:在每毫升反應(yīng)體系中,每克組織每分鐘催化在500nm處吸光值增加0.001定義為一個(gè)酶活力單位。

        PAO活性(U/g 質(zhì)量)=ΔA×V÷W÷V×V÷T÷0.001×F=66.67×ΔA÷W×F

        3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

        酶活單位定義:在每毫升反應(yīng)體系中,每104 個(gè)細(xì)胞或細(xì)菌每分鐘催化在500nm處吸光值增加0.001定義為一個(gè)酶活力單位。

        PAO活性(U/104 cell=ΔA×V÷500÷V×V÷T÷0.001×F=0.133×ΔA×F

        4. 按液體體積計(jì)算

        酶活單位定義:在每毫升反應(yīng)體系中,每毫升液體樣本每分鐘催化在500nm處吸光值增加0.001定義為一個(gè)酶活力單位。

        PAO活性(U/mL=ΔA×V÷V÷T÷0.001×F=66.67×ΔA×F

        V反:反應(yīng)總體積,1.0mLV樣:加入樣本上清體積,0.25mL;V提:加入提取液的體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL500:細(xì)胞或細(xì)菌數(shù)量,500萬;T:反應(yīng)時(shí)間,60minF:稀釋倍數(shù)。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1. 稱取0.1023g珍珠梅葉片加入1mL提取液進(jìn)行樣本處理,離心取上清后按測(cè)定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測(cè)得A1=0.256A2=0.637,ΔA=A2-A1=0.381,根據(jù)計(jì)算公式得:

        PAO活性(U/g 質(zhì)量)=66.67×ΔA÷W=66.67×0.381÷0.1023=248.302 U/g 質(zhì)量

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC0090/BC0095 過氧化物酶(POD)活性檢測(cè)試劑盒

        BC0010/BC0015 單胺氧化酶活性檢測(cè)試劑盒

        BC1280/BC1285 二胺氧化酶活性檢測(cè)試劑盒

        BC0170/BC0175 超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測(cè)試劑盒

        多胺氧化酶(PAO)活性檢測(cè)試劑盒 土壤 多胺氧化酶(PAO)活性檢測(cè)試劑盒 土壤


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