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        • ABTS自由基清除能力檢測試劑盒 抗氧化
        產(chǎn)品名稱:

        ABTS自由基清除能力檢測試劑盒 抗氧化

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-03-23
        儲(chǔ)存條件
        -20℃
        中文名稱
        ABTS自由基清除能力檢測試劑盒 抗氧化
        有效期
        6個(gè)月
        單位

        英文名稱
        ABTS Free Radical Scavenging Capacity Assay Kit
        檢測方法
        可見分光光度法 Spectrophotometer
        規(guī)格
        50T/24S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC4770
        規(guī)格50T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途ABTS自由基清除能力檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        ABTS自由基清除能力檢測試劑盒說明書

        可見分光光度法

        貨號(hào):BC4770

        規(guī)格:50T/24S

        產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液

        液體60 mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體80 mL×1

        2-8℃保存

        試劑二

        粉劑×1

        2-8℃保存

        試劑三

        液體20 μL×1

        2-8℃保存

        試劑四

        液體1.5 mL×1

        -20℃保存

        試劑五

        粉劑×1

        2-8℃保存

        溶液的配制: 

        1、 試劑二:臨用前加入3 mL蒸餾水,充分溶解;用不完的試劑可分裝保存,-20可保存,避免反復(fù)凍融;

        2、 試劑三工作液的配制:液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量按試劑三μL:蒸餾水(mL=1μL:12mL(注意單位)的比例配成試劑三工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配,用多少配多少,盡量在4h之內(nèi)用完

        3、 試劑四工作液的配制:可先將試劑四-20分裝保存。臨用前根據(jù)樣本量按試劑四:試劑一(V:V=1:9的比例配成試劑四工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用,現(xiàn)配現(xiàn)用,用不完的試劑放于-20℃可保存兩周。

        4、 試劑五:含有5 mg維生素C。臨用前加入2.8 mL提取液,充分振蕩溶解;配成10 mmol/L維生素C溶液,用于陽性對照。2-8℃可保存兩周。

        5、 ABTS工作液的配制:臨用前根據(jù)樣本量按試劑一:試劑二:試劑三工作液(V:V:V=76:5:4的比例配成ABTS工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配,室溫避光保存,務(wù)必在30分鐘內(nèi)使用。

        產(chǎn)品說明:

        ABTS法可用于親水性和親脂性物質(zhì)抗氧化能力測定,是使用廣泛的間接檢測方法。ABTS經(jīng)氧化后生成穩(wěn)定的藍(lán)綠色陽離子ABTS自由基,在405 nm734 nm處有最大吸收峰。被測物質(zhì)加入ABTS自由基溶液后,所含抗氧化成分能與ABTS自由基發(fā)生反應(yīng)而使反應(yīng)體系褪色,405 nm的吸光度下降,在一定范圍內(nèi)其吸光度的變化與自由基被清除的程度成正比。本試劑盒中,通過測定吸光度下降的程度來反映樣本清除ABTS自由基的能力。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

        需自備的儀器和用品:

        可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、研缽/粉碎機(jī)、烘干箱、30~50目篩、冰、蒸餾水。

         

        操作步驟:

        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        1、植物組織樣本的制備:將新鮮樣本置于60℃烘箱烘干至恒重,研缽研碎(或粉碎機(jī)粉碎),過30~50目篩;稱取約0.05 g樣本,加入1 mL提取液后置于40℃水浴鍋中浸提30 min10000 rpm 室溫離心10 min,取上清,置于冰上待測。

        2、紅酒、果汁等液體樣本:吸取100 μL樣本溶液加入900 μL提取液,旋渦振蕩混勻,室溫10000 rpm離心10 min,取上清,置冰上待測。

        3、提取物或者藥物:可用提取液配制成一定濃度,如5 mg/mL

        注意:不同樣本清除ABTS自由基的能力可能相差很大,為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,樣本要根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整(如清除率大于90%,建議將提取的樣本用提取液進(jìn)行稀釋;清除率小于5%,建議加大烘干樣本質(zhì)量或液體樣本體積進(jìn)行提取)。

        二、測定步驟

        1、分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長至405 nm,蒸餾水調(diào)零。

        2、陽性對照的準(zhǔn)備:若需要線性關(guān)系,建議將10 mmol/L的維生素C溶液用提取液配制成0.40.2、0.10.05、0.025、0.0125 mmol/L的維生素C溶液待用,稀釋可參考下表;若需要清除率約為90%的陽性對照,則建議將10 mmol/L維生素C溶液用提取液配制成大于1 mmol/L的維生素C溶液待用。

        序號(hào)

        稀釋前濃度(mmol/L

        維生素C溶液體積(µL

        提取液體積(µL

        稀釋后濃度(mmol/L

        1

        10

        100

        900

        1

        2

        1

        80

        120

        0.4

        3

        0.4

        100

        100

        0.2

        4

        0.2

        100

        100

        0.1

        5

        0.1

        100

        100

        0.05

        6

        0.05

        100

        100

        0.025

        7

        0.025

        100

        100

        0.0125

        備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)陽性對照管需50µL維生素C溶液。

        3、操作表:在EP管中分別加入下列試劑:

        試劑名稱(μL

        空白管

        測定管

        對照管

        陽性對照管

        上清液

        -

        50

        50

        -

        不同濃度的VC溶液

        -

        -

        -

        50

        蒸餾

        50

        -

        -

        -

        試劑四工作液

        100

        100

        -

        100

        ABTS工作液

        850

        850

        -

        850

        試劑一

        -

        -

        950

        -

        充分混勻,室溫避光靜置6 min。測定405 nm處的吸光度。分別記為A空白、A測定A對照、A陽性對照,陽性對照管和空白管只需測1-2次。

         

        三、ABTS自由基清除率的計(jì)算

        1.  陽性對照的自由基清除率計(jì)算公式:

        ABTS自由基清除率DVC% =[(A空白-A陽性對照)÷A空白]×100%。

        2.  樣本的自由基清除率計(jì)算公式:

        ABTS自由基清除率D% =[A空白-(A測定-A對照)]÷A空白×100%。

        注意事項(xiàng):

        1、不同樣本清除ABTS自由基的能力可能相差很大,如果要比較不同樣本的ABTS自由基清除能力,建議對于同一批樣本加入等量的樣本,紅酒、組織勻漿、果汁等液體樣本加入同樣體積,提取物(或者藥物)配制成同樣濃度。在比較時(shí),將樣本根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整,比較同樣濃度(相同稀釋倍數(shù))的清除率大小。

        2、樣本建議當(dāng)天提取當(dāng)天檢測。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1、 0.0502 g菠菜葉片加入1 mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,離心取上清后按照測定步驟操作,使用玻璃比色皿測定吸光值,計(jì)算清除率得:

        D% =[A空白-(A測定-A對照)]÷A空白×100% =[1.095-(0.352-0.305)]÷1.095×100%=95.71%。

        2、 0.2 mmol/L VC陽性對照管按照測定步驟操作,使用玻璃比色皿測定吸光值,計(jì)算清除率得:

        DVC% =[(A空白-A陽性對照)÷A空白]×100% =[1.095-0.657]÷1.095×100%=40%。

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