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        • 血清淀*酶活性檢測試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        血清淀*酶活性檢測試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-08
        血清淀*酶活性檢測試劑盒 微量法
        有效期
        6個(gè)月
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        單位

        英文名稱
        Serum Amylase(AMY)Activity Assay Kit
        檢測方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/48S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC5055
        規(guī)格100T/48S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途血清淀*酶活性檢測應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        血清淀*酶(AMY活性檢測試劑盒(碘-淀粉比色法)說明書

        微量法

        貨號(hào):BC5055

        規(guī)格:100T/48S

        產(chǎn)品內(nèi)容:使用前請認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        試劑一

        粉劑×1

        2-8℃保存

        試劑二

        液體30mL×1

        2-8℃保存

        試劑三A

        粉劑×1

        2-8℃保存

        試劑三B

        粉劑×1

        2-8℃保存

        標(biāo)準(zhǔn)品

        粉劑×1

        2-8℃保存

        溶液的配制:

        1、 試劑一:臨用前加入12.5mL試劑二,置于常溫水中并加熱至煮沸,期間不斷攪拌粉劑至溶解;用不完的試劑2-8保存1個(gè)月。

        2、 試劑三的配制:將試劑三A倒入試劑三B中,用蒸餾水定容至10mL,2-8℃避光保存一個(gè)月。

        3、 標(biāo)準(zhǔn)品:10mg淀粉標(biāo)準(zhǔn)品。臨用前加10mL試劑二,置于常溫水中并加熱至煮沸,配成1mg/mL淀粉標(biāo)準(zhǔn)液。用不完的試劑2-8保存1個(gè)月。

        產(chǎn)品說明:

        血清淀*酶( Serum amylase, AMY) 屬于α-淀*酶,以無規(guī)則方式水解多糖分子內(nèi)部的α-1,4糖苷鍵,生成寡聚糖、麥芽糖和葡萄糖的混合物。AMY主要由唾液腺和胰腺分泌,另外近端十二指腸、肺、子宮、泌乳期的乳腺等器官也有少量分泌。

        AMY催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等,碘可以與未被水解的淀粉結(jié)合,生成在570nm下有特征吸收峰的復(fù)合物,其深淺可計(jì)算出淀*酶的活力單位。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

        需自備的儀器和用品:

        酶標(biāo)儀/可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋/培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板/微量玻璃比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。

        操作步驟:

        一、粗酶液提取

        40μL血清和160μL蒸餾水混合(即將血清稀釋5倍),分為2100μL分別作為測定管和對(duì)照管。若實(shí)驗(yàn)后所測數(shù)值偏大或者偏小,可以調(diào)整稀釋比例(比如數(shù)值偏小可以將80μL血清和120μL蒸餾水混合即將血清稀釋2.5倍)

        二、測定步驟和加樣表

         

        分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到570 nm,蒸餾水調(diào)零。

        將淀粉標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋為0.50.4、0.2、0.10.05、0.025、0.01250.00625mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        按操作表依次加入各試劑:

        試劑(μL

        測定管

        對(duì)照管

        空白管1

        標(biāo)準(zhǔn)管

        空白管2

        血清稀釋液

        100

        100

        -

        -

        -

        蒸餾水

        -

        -

        100

        -

        100

        標(biāo)準(zhǔn)溶液

        -

        -

        -

        100

        -

        試劑一

        100

        -

        100

        -

        -

        試劑

        -

        100

        -

        100

        100

        37℃恒溫水浴中準(zhǔn)確保溫10min

        試劑

        50

        50

        50

        50

        50

        混勻后吸取200μL于微量玻璃比色皿或者96孔板中,于15min內(nèi)讀取測定管、對(duì)照管、空白管1、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管2 570nm下的吸光度,分別記為A測定、A對(duì)照、A空白1、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白2,計(jì)算ΔA測定=A空白1-A空白2-A測定-A對(duì)照),ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白2。

        三、AMY活性計(jì)算

        1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

        ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸,以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到方程y=kx+b。將ΔA測定帶入方程得到xmg/mL)。

        2、按照血清體積計(jì)算:

        單位定義:每mL血清每分鐘消耗1mg淀粉定義為1個(gè)酶活性單位。

        AMY活性 (U/mL)= x×V÷V÷T×F =0.1×x×F

        V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1mLT:反應(yīng)時(shí)間,10min;F:稀釋倍數(shù)。

        注意事項(xiàng):

        1. ΔA測定大于1.5時(shí),可以對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后測定。

        2. 反應(yīng)完成后需在15min內(nèi)測定吸光度。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1、 40μL牛血清和160μL蒸餾水混合(即血清稀釋5倍)后按照測定步驟操作,96孔板測得計(jì)算ΔA測定= A空白-A測定-A對(duì)照)=1.409-0.067-1.297-0.058=0.103,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=2.6047x-0.0165,計(jì)算x=0.0459,按公式計(jì)算活性:

        AMYU/mL= x×V÷V÷T=0.1×x×F=0.1×x×F =0.0230 U/ mL

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC0700/ BC0705 淀粉含量檢測試劑盒

        BC4260/ BC4265 直鏈淀粉含量檢測試劑盒

        BC4270/ BC4275 支鏈淀粉含量檢測試劑盒

        BC4570/ BC4575 α-淀*酶活性檢測試劑盒 (-淀粉比色法)

        BC4580/ BC4585 β-淀*酶活性檢測試劑盒 (-淀粉比色法

        血清淀*酶活性檢測試劑盒 微量法 血清淀*酶活性檢測試劑盒 微量法

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