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        • H2S含量檢測(cè)試劑盒 微量法
        產(chǎn)品名稱:

        H2S含量檢測(cè)試劑盒 微量法

        產(chǎn)品品牌: SOLARBIO/索萊寶 價(jià)格:
        廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-07-08
        H2S含量檢測(cè)試劑盒 微量法
        有效期
        6個(gè)月
        儲(chǔ)存條件
        2-8℃
        單位

        英文名稱
        H2S content Assay Kit
        別名
        H2S含量測(cè)定試劑盒 H2S含量測(cè)試盒 硫化氫含量測(cè)定
        檢測(cè)方法
        微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
        規(guī)格
        100T/96S

        產(chǎn)品概述

        品牌SOLARBIO/索萊寶CAS詳詢
        分子式詳詢純度詳詢
        分子量詳詢貨號(hào)BC2055
        規(guī)格100T/96S供貨周期現(xiàn)貨
        主要用途H2S含量檢測(cè)應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

        硫化氫(H2S)含量檢測(cè)試劑盒說明書

        微量法

        貨號(hào):BC2055

        規(guī)格:100T/96S

        產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

        試劑名稱

        規(guī)格

        保存條件

        提取液一

        液體 110mL×1

        2-8℃保存

        提取液二

        液體20mL×1

        2-8℃保存

        試劑一

        液體8mL×1

        2-8℃保存

        試劑二

        液體8mL×1

        2-8℃保存

        產(chǎn)品說明:

        硫化氫(H2S)是一種新型氣態(tài)信號(hào)分子,存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì),生理濃度的H2S對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長時(shí)程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用,并對(duì)自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。

        H2SN, N-二甲基對(duì)苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán),亞甲基藍(lán)在665nm處有最大吸收峰,通過測(cè)定其吸光值可計(jì)算H2S含量。

        注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

        需自備的儀器和用品:

        可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

        操作步驟:

        一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

        1. 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞樣本:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL=500-1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率200W,超聲3s,間隔7s,總時(shí)間3min),12000g 4℃離心10min;然后取0.8mL上清液,再加入0.15mL提取液二,12000g 4℃離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

        2. 組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):提取液一體積(mL)為1:5-10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液一),進(jìn)行冰浴勻漿;12000g 4℃離心10min;然后0.8mL上清液,再加入0.15mL提取液二,12000g 4℃離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

        3. 血清(漿)或其它液體樣本100μL血清(漿)或其它液體樣本加入1mL提取液一,12000g 4℃離心10min;然后0.8mL上清液,再加入0.15mL提取液二,12000g 4℃離心10min,取上清置于冰上待測(cè)

        二、測(cè)定步驟

        1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至665nm,分光光度計(jì)用蒸餾水調(diào)零。

         

         

        2. 加樣表(按順序在EP管或96孔板中加入下列試劑)

        試劑名稱(μL

        測(cè)定管

        空白管

        50

        -

        蒸餾水

        -

        50

        試劑一

        75

        75

        試劑二

        75

        75

        充分混勻,室溫靜置10min后,665nm處測(cè)定各管吸光值A,分別記為A測(cè)定、A空白,計(jì)算ΔA=A測(cè)定-A空白??瞻坠苤恍铚y(cè)1-2。

        三、H2S含量計(jì)算

        1、用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

        以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(nmol/mL)為x軸,以其對(duì)應(yīng)的吸光值為y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程y = 0.0026x-0.0268,R2 = 0.9973;ΔA帶入公式中得到xnmol/mL)。

        1)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

        H2S含量(nmol/g 質(zhì)量)= V上清+V提取液二)÷ W×V上清÷V提取液一)=1.1875×x÷W

        2)按照樣本蛋白濃度計(jì)算

        H2S含量(nmol/mg prot= x×V÷V×Cpr= x÷Cpr

        (3)按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

        H2S含量(nmol/104 cell= x×V上清+V提取液二)÷ cells×V上清÷V提取液一)=1.1875×x÷cells

        (4)按照液體體積計(jì)算

        H2S含量(nmol/mL= V上清+V提取液二)÷ [V液體×V上清÷V提取液一+V液體)]=13.0625×x

        V上清:提取時(shí)上清液的體積:0.8mL;V提取液一:加入提取液一的體積:1mL;V提取液二:加入提取液二的體積:0.15mL;V樣本:反應(yīng)液中加入樣本的體積,0.05mLCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,gcells:細(xì)胞數(shù)量,104個(gè);V液體:液體樣本體積:0.1mL。

        2、用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

        以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(nmol/mL)為x軸,以其對(duì)應(yīng)的吸光值為y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程y = 0.0020x-0.0633,R2 = 0.9951ΔA帶入公式中得到xnmol/mL)。

        1)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

        H2S含量(nmol/g 質(zhì)量)= V上清+V提取液二)÷ W×V上清÷V提取液一)=1.1875×x÷W

        2)按照樣本蛋白濃度計(jì)算

        H2S含量(nmol/mg prot= x×V÷V×Cpr= x÷Cpr

        (5)按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

        H2S含量(nmol/104 cell= x×V上清+V提取液二)÷ cells×V上清÷V提取液一)=1.1875×x÷cells

        (6)按照液體體積計(jì)算

        H2S含量(nmol/mL= V上清+V提取液二)÷ [V液體×V上清÷V提取液一+V液體)]=13.0625×x

        V上清:提取時(shí)上清液的體積:0.8mL;V提取液一:加入提取液一的體積:1mL;V提取液二:加入提取液二的體積:0.15mL;V樣本:反應(yīng)液中加入樣本的體積,0.05mLCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;cells:細(xì)胞數(shù)量,104個(gè);V液體:液體樣本體積:0.1mL。

         

         

         

        注意事項(xiàng):

        1、如果ΔA值過低或接近空白值,建議增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定;如果ΔA1.2,建議稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算公式中要乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

        實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

        1、 0.1g小鼠肝臟按照樣本提取步驟處理,按照測(cè)定步驟操作,使96孔板測(cè)定665nm處反應(yīng)液吸光度,計(jì)算ΔA = A測(cè)定-A空白=0.150-0.121=0.029,ΔA代入標(biāo)準(zhǔn)方程y = 0.0020x-0.0633,R2 = 0.9951,計(jì)算得x;按樣本質(zhì)量計(jì)算得:

        H2S含量(nmol/g 質(zhì)量)= V上清+V提取液二)÷ W×V上清÷V提取液一)=548.03nmol/g 質(zhì)量

        2、 0.1g紫葉李按照樣本提取步驟處理,按照測(cè)定步驟操作,使96孔板測(cè)定665nm處反應(yīng)液吸光度,計(jì)算ΔA = A測(cè)定-A空白=0.270-0.121=0.149,ΔA代入標(biāo)準(zhǔn)方程y = 0.0020x-0.0633R2 = 0.9951,計(jì)算得x按樣本質(zhì)量計(jì)算得:

        H2S含量(nmol/g 質(zhì)量)= V上清+V提取液二)÷ W×V上清÷V提取液一)=1260.53nmol/g 質(zhì)量。

        相關(guān)系列產(chǎn)品:

        BC1170/ BC1175 還原型谷*甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒

                BC1180/ BC1185 氧化型谷*甘肽(GSSG)含量檢測(cè)試劑盒

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        H2S含量檢測(cè)試劑盒 微量法 H2S含量檢測(cè)試劑盒 微量法

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